不同杀菌剂对防番茄叶霉病木霉菌叶片定殖效率的影响

周勇 于海霞 贾丽慧 李克梅 刘利群

摘    要：以番茄叶霉病原为靶标，研究番茄叶片上木霉菌的生长变化规律，比较了常见杀菌剂多菌灵、代森锰锌、腐霉利、甲基硫菌灵对木霉菌株的影响。结果表明：木霉在番茄叶片上能持续生长15 d左右，叶片孢子的数量有明显的变化。常用杀菌剂对木霉的生长有一定的抑制作用，其中甲基硫菌灵处理对木霉生长的影响最大，代森锰锌处理对木霉生长的影响最小。药剂的喷洒先后顺序，对木霉的生长有一定影响。

关键词：木霉;番茄叶霉病;叶片定殖;影响

中图分类号：S482.2            文献标识码：A               DOI 编码：10.3969/j.issn.1006-6500.2016.01.025

Effects of Different Fungicides on Colonization Efficiency of the Leaves of Tomato Leaf Mold

ZHOU Yong1，YU Haixia1，JIA Lihui1，LI Kemei2，3，LIU Liqun1

（1.Xinjiang Agricultural Vocational Technical College，Changji， Xinjiang 831100，China;2.College of Agronomy，Xinjiang Agricultural University，Urumqi， Xinjiang 830052，China;3.Key Laboratory of Harmful Biological Monitoring and Safety Prevention of  Xinjiang Autonomous Region Agriculture-Forestry Universities，Urumqi， Xinjiang 830052，China）

Abstract：The tomato leaf mould pathogen as a target of tomato leaves on Trichoderma growth variation， and comparison of the common sterilization agent carbendazim， mancozeb， procymidone， methyl sulfur bacteria spirit effect on Trichoderma strains. The results showed that： Trichoderma in leaves of tomato growth could last for 15 days， the leaves of spore number of obvious changes. Commonly used pesticides on Trichoderma growth inhibition， which thiophanate methyl treatment had the greatest influence on Trichoderma， mancozeb on Trichoderma minimal impact. There is a certain effect on the growth of the wood.

Key words：wood mould; tomato leaf mold; collaborative control; leaf coionization; effect

番茄叶霉病是一种世界范围广泛分布的病害[1]，病原物为黄褐钉孢（Passalora fulva），有性型为子囊菌门球腔菌科[2]。许多试验表明，大多数生防剂在试验室培养使用时效果很好，但在田间使用时稳定性和持效性不理想。除了温度、湿度、光照条件以外，杀菌剂的大量使用是影响生物制剂田间使用效果的重要因素。木霉菌作为叶表微生物区系的成员，经常和同一生境的其它微生物发生联系，促进或削弱生防效果，在农田生态系统中，杀菌剂是影响木霉生防作用的重要因素。因此，研究常用杀菌剂对筛选拮抗木霉在叶片表面定殖效果的影响非常有必要[3-9]。

1 材料和方法

1.1 材 料

拮抗菌株：木霉TCYF4，由新疆农业职业技术学院微生物实验室提供。

植物材料：番茄品种为亨氏1100。番茄种子用75%的酒精表面消毒后，浸种催芽。准备128穴育苗盘，种子露白后，每穴1粒播种于湿润的基质中，覆盖细沙，日光温室内培养，温度25 ℃。出苗1周两叶一心时，定植于12 cm的塑料盆，按每盆装无菌栽培基质180 g（沙∶园土∶蛭石比例为2∶3∶1）准备基质，每盆定植5棵幼苗。幼苗长至8～10片真叶，挑选长势基本相同的番茄幼苗，分8组。每周用Hoagland营养液浇灌2次，培养8周。

TSM培养基：MgSO4·7H2O0.2 g;K2HP40.9 g;KCl0.15 g;NH4NO31.0 g;葡萄糖3.0 g;氯霉素0.25 g;玫瑰红0.033 g;五氯硝基苯（75%可湿性粉剂）0.2 g;琼脂粉20 g;H2O1 000 mL;pH值6.0（灭菌前调节）。

供试药剂见表1。

1.2 方 法

1.2.1 番茄叶片上木霉的生长变化规律 采用系列稀释法将木霉菌株孢子悬浮液稀释，将浓度调整到1×106个孢子·mL-1。选取长势一致的番茄叶片，均匀喷洒配好的木霉孢子悬浮液。将叶片放入25 ℃恒温箱中培养，对照为喷洒无菌水处理。喷雾后1 h取第1次样，后每48 h取样1次，共取样7次。每次取样回收叶片。采用稀释涂布平板法计数，在木霉半选择性培养基上28 ℃培养3 d，显微镜观察木霉菌在番茄叶片上的定殖情况，测定木霉菌落数。

1.2.2 不同杀菌剂对木霉菌生长的影响 分别将50%多菌灵、75%百菌清、75%代森锰锌、50%腐霉利、70%甲基硫菌灵采用二次稀释法分别稀释到1 500，1 000，1 000，1 500，1 500 倍液待用。

随机区组试验。选取生长一致的番茄植株，处理1（保护性试验），喷洒浓度为108个孢子·mL-1的木霉菌孢子悬液，3 d后喷杀菌剂，清水对照，重复3次，处理后6 d和30 d，各检测1次孢子量。处理2（治疗性试验），喷洒不同杀菌剂，3 d后，喷洒浓度为108个孢子·mL-1的木霉菌孢子悬液，清水对照，重复3次，处理后6 d和30 d，各检测1次孢子量。

检测采用震荡法和半选择性培养基计数法。每处理取10片叶，剪成2 cm×2 cm的叶片放入三角瓶中，加入10 mL无菌水和少许洗衣粉，放在振荡器中振荡20 min，100 r·min-1，取9 mL振荡液加入灭菌的TSM培养基，培养6 d和3 0 d，检测孢子量。

2 结果与分析

2.1 番茄叶片上木霉的生长变化规律

试验结果表明，番茄叶片上木霉的孢子数量有明显的变化（表2）。前4 d，采集的样本经培养，孢子的数量持续减少，后又增加，第8天采集的样本经培养，孢子的数量达到最大值，后又持续减少。木霉菌孢子数量的这种变化趋势可能与菌本身对环境的适应性和番茄叶片的生活力有关。

2.2 不同药剂对木霉TCYF4在番茄叶片表面定殖效率的影响

不同药剂对木霉TCYF4定殖能力的影响测定结果见表3、表4。不同的药剂对木霉在叶片上的定殖能力存在着很大差异，保护剂效果比治疗剂效果好。

保护性试验表明，施用多菌灵、代森锰锌、腐霉利、百菌清6 d，均对木霉HCYF4有一定的刺激作用，甲基硫菌灵处理的影响最大，代森锰锌处理的影响最小;施用30 d后，代森锰锌处理的木霉孢子依然保持一定的数量，百菌清处理对木霉孢子数量的影响最大。比较6 d和30 d定殖情况后，说明木霉TCYF4菌株适合在代森锰锌喷洒过的叶片上定殖存活，不适合在百菌清喷洒过的叶片上定殖存活，其它药剂均对木霉HCYF4有一定的抑制作用。

治疗性试验表明，多菌灵、甲基硫菌灵、腐霉利药剂对木霉TCYF4均有较强的抑制作用;百菌清前期有部分促进作用，后期却表现出较强的抑制作用;代森锰锌的抑制作用最弱。

3 结 论

木霉在番茄叶片上生长能持续15 d左右，叶片表面定殖的木霉孢子的数量有明显的变化，有两个高峰期，分别在第1 天和第8 天出现，两个明显的减退期，分别在第4 天和15 d出现。这可能与木霉孢子前期对寄主的侵染能力，寄生以后对叶片环境的适应能力，以及后期寄主营养条件情况有关。人工接种木霉后，木霉孢子浓度大，覆盖叶片表面，前期因大量孢子没有与寄主建立寄生关系，导致数量减少;之后随着寄生关系的建立，孢子迅速在叶面生长，占领气孔周围，大量繁殖，数量达到最大;最后因寄主营养条件的恶化，菌丝逐渐死亡。

分别用多菌灵、代森锰锌、腐霉利、百菌清、甲基硫菌灵对木霉TCYF4的定殖能力进行测定。结果显示，不同的药剂对木霉在叶片上的定殖能力存在着很大差异，保护剂效果比治疗剂效果好;多菌灵、代森锰锌、腐霉利、百菌清对木霉的生长有一定的刺激作用，甲基硫菌灵的处理对木霉的影响最大;代森锰锌处理的叶片，木霉孢子数目最多，说明木霉TCYF4菌株适合在代森锰锌喷洒过的叶片上定殖存活，不适合在甲基硫菌灵喷洒过的叶片上定殖存活。

参考文献：

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