醒脑静注射液对脑出血患者血浆MMP—9及TIMP—1的影响

蒋令修　梁宇　陈文武　薛孟周

[摘要] 目的 探讨醒脑静注射液对脑出血患者血浆中MMP-9及TIMP-1水平的影响。 方法 选择2014年2月～2015年5月急性脑出血患者60例为研究对象，随机分为研究组和对照组各30例。研究组在常规治疗基础上给予醒脑静注射液治疗，对照组给予常规治疗。比较两组患者血浆MMP-9及TIMP-1水平，分析患者MMP-9与TIMP-1水平的相关性及其与脑水肿情况的相关性。 结果 两组患者在发病5 d时，MMP-9及TIMP-1水平均显著升高，14 d时下降。研究组在发病5 d及14 d时，MMP-9水平显著低于对照组，而TIMP-1水平显著高于对照组，差异有统计学意义（P<0.01）。24 h内，两组脑水肿体积与MMP-9呈正相关（r=0.682，P=0.761），与TIMP-1水平呈显著负相关（r=-0.489，P=-0.619）；14 d时，脑水肿体积与MMP-9呈正相关（r=0.516，P=0.835）。 结论 醒脑静能够显著降低脑出血患者MMP-1升高的程度，提高TIMP-1升高程度，改善患者脑水肿情况。

[关键词] 醒脑静；脑出血；基质金属蛋白酶-9；基质金属蛋白酶组织抑制剂

[中图分类号] R743.3 [文献标识码] A [文章编号] 1673-9701（2015）35-0005-03

[Abstract] Objective To explore the effects of Xingnaojing injection on plasma MMP-9 and TIMP-1 levels for patients with cerebral hemorrhage. Methods A total of 60 patients with acute cerebral hemorrhage from February 2014 to May 2015 were selected as research subjects and randomly divided into the research group and the control group， with 30 patients in each group. The research group was given Xingnaojing injection on the basis of regular treatment， and the control group was given regular treatment. The plasma MMP-9 and TIMP-1 levels of the two groups of patients were compared， and the correlation between MMP-9 and TIMP-1 levels in the patients and their correlation with cerebral edema were analyzed. Results On the fifth day of onset of the disease in the two groups of patients， MMP-9 and TIMP-1 levels were significantly increased， and the levels were reduced on the 14th day. On the fifth day and 14th day of onset of the disease in the research group， MMP-9 level was significantly lower than that in the control group， and TIMP-1 level was significantly higher than that in the control group. The differences were statistically significant（P<0.01）. In 24 h， the volume of cerebral edema in the two groups was positively correlated to MMP-9 （r=0.682， P=0.761）， and was significantly negatively correlated to TIMP-1（r=-0.489， P=-0.619）； on the 14th day， the volume of cerebral edema was positively correlated to MMP-9 （r=0.516， P=0.835）. Conclusion Xingnaojing is able to significantly reduce the increasing degree of MMP-1 in the patients with cerebral hemorrhage， enhance the increasing degree of TIMP-1， and improve patients' cerebral edema.

[Key words] Xingnaojing； Cerebral hemorrhage； Matrix metalloproteinase （MMP-9）； Tissue inhibitor of metalloproteinase （TIMP）

脑出血后，患者发生复杂的病理生理改变，导致继发性神经功能损害，不仅与血肿占位压迫有关，还与血肿占位后，周围脑组织水肿有关。MMP-9能够降解基底膜，导致血管源性水肿[1，2]。TIMP-1是MMP-9的特异性抑制剂[3]。动物研究显示，MMP-9与TIMP-1失衡在脑出血后脑组织水肿的发病中发挥重要的作用[4]。醒脑静是中成药，具有凉血活血、清热解毒的效果，临床上可用于急性脑出血急性期的治疗[5]。本研究分析醒脑静对急性脑出血患者血浆MMP-9与TIMP-1水平的影响，现报道如下。

1 资料与方法

1.1 一般资料

选择2014年2月～2015年5月在我院治疗的急性脑出血患者60例为研究对象。纳入标准：发病至入院时间内≤24 h，经CT、MRI证实，符合脑出血诊断标准。排除标准：继发性脑出血，多个病灶，伴有意识障碍，合并中枢神经系统感染，脑梗死，合并严重其他系统疾病者。剔除标准：住院期间死亡或者住院时间不足14 d，中途转外科手术治疗或者转院治疗者。将60例患者随机分为研究组和对照组各30例，研究组男19例，女11例，平均年龄（59.4±11.7）岁；对照组男17例，女13例，平均年龄（60.1±12.1）岁。两组患者一般资料比较差异无统计学意义（P>0.05）。本研究经过医院医学伦理会同意。

1.2 方法

对照组保持安静，头抬高20°～30°，减少不必要的搬动，对烦躁、抽搐、头痛等患者给予镇静等治疗。给予脱水降颅压（甘露醇，125 mL/次，每天2～4次，江苏恒瑞医药股份有限公司，国药准字H32025228），控制血压（血管紧张素转换酶抑制剂类，贝那普利，（20～40） mg/d，每天1次，北京诺华制药有限公司，国药准字H20030514）对症支持治疗等常规治疗。研究组在此基础上给予醒脑静治疗。醒脑静注射液（河南天地药业，国药准字Z41020664）2 mL+0.9%生理盐水250 mL，每天2次，静脉点滴，于入院当天就给药，连续14 d。

1.3检测指标

分别于发病24 h内、发病5 d、发病14 d检测血浆MMP-9及TIMP-1水平。在相应的检测点，采集晨起空腹静脉血4 mL，3000 r/min离心10 min，取上清用于检测。MMP-9及TIMP-1均采用ELISA方法检测，严格按照操作说明书进行。

1.4 水肿量测量及计算方法

于发病24 h内、14 d行头颅CT检查。血肿体积：长×宽×层数×层厚×π/6。长为血肿面积最大的最长径，宽为同一层面与长径相垂直的径长，层面数是所有含血肿层面数，层厚1 cm。脑水肿体积与血肿体积计算方法相似。选择含有血肿的最大水肿面积层面，测量长、宽，计算总病灶体积。脑水肿体积为总病灶体积与脑血肿体积之差。

1.5 统计学方法

采用SPSS15.0统计学方法进行分析。计数资料采用χ2检验，计量资料以均数±标准差（x±s）表示，采用方差分析及t检验。相关性分析采用Pearson相关分析。P<0.05为差异有统计学意义。

2 结果

2.1两组不同时间点MMP-9及TIMP水平比较

研究组在发病5 d时，MMP-9水平显著低于对照组，而TIMP-1水平显著高于对照组，差异有统计学意义（P<0.01）；发病14 d时，研究组MMP-9水平显著低于对照组，而TIMP-1水平显著高于对照组，差异有统计学意义（P<0.01）。

2.2 脑出血患者不同时间点MMP-9与TIMP-1的相关性

24 h内，研究组患者MMP-9与TIMP-1水平呈显著负相关（r=-0.393）；在5 d时，MMP-9与TIMP-1呈显著正相关（r=0.594）；在14 d时，两者之间无相关性。对照组24 h内，患者MMP-9与TIMP-1水平呈显著负相关（r=-0.693）；在5 d时，MMP-9与TIMP-1呈显著正相关（r=0.894）；在14 d时，两者之间无相关性。

2.3两组脑出血患者不同时间点脑水肿情况

2.4脑出血患者不同时间点脑水肿与MMP-9与TIMP-1水平的相关性

研究组，24 h内，脑水肿体积与MMP-9呈正相关（r=0.682），与TIMP-1水平呈显著负相关的关系（r=-0.489）；14 d时，脑水肿体积与MMP-9呈正相关（r=0.516），与TIMP-1水平无相关性。对照组，24 h内，脑水肿体积与MMP-9呈正相关（r=0.761），与TIMP-1水平呈负相关（r=-0.619）；14 d时，脑水肿体积与MMP-9呈正相关（r=0.835），与TIMP-1水平无相关性。

3讨论

MMP-9以酶原的形式从胞内分泌到胞外，MMP-9在体内经一系列蛋白酶级联反应而激活。金属蛋白酶组织抑制因子（TIMPs）是MMPs家族的组织抑制剂，广泛分布于组织和体液中，共价结合MMPs而发挥抑制作用[6-8]。TIMP-1作为MMP-9的抑制剂，与MMP-9的酶原或活化后酶催化区的羧基末端特异性结合形成复合物，特异性抑制MMP-9的活性[9，10]。脑出血后，血肿对周围组织造成压迫，脑细胞代谢的毒性产物导致一系列炎症反应以及脑水肿，是导致患者病情加重的重要原因。动物试验结果显示，在急性脑出血大鼠模型中，血肿周围的炎性细胞主要为中性粒细胞，可见大量细胞因子释放，细胞因子与MMP-9具有相互作用[11，12]。炎性因子能够上调MMP-9的表达，MMP-9破坏血管基底膜，降解细胞外基质，增加血管通透性，纤维蛋白等进入脑组织，加重脑水肿及炎性细胞浸润[13]。本研究中也显示，脑出血患者脑组织血肿情况与MMP-9呈显著正相关。

TIMP-1是MMP-9特异性抑制酶。脑出血患者MMPs与TIMPs之间的平衡被打破，导致细胞基质被降解，血管通透性增加，血脑屏障被破坏，导致脑组织水肿[14，15]。在本研究中，发病后5 d，患者TIMP-1水平均有显著升高，而MMP-9水平也有升高，但使用醒脑静患者，TIMP-1升高更明显，而MMP-9升高不如对照组明显。提示醒脑静对MMP-9的升高具有抑制作用，而对TIMP-1的升高具有促进作用，从而更大幅度地抑制MMP-9的作用，减少脑组织水肿情况。结果也证实，在出血后14 d，研究组患者脑组织水肿体积较对照组小。相关性分析结果显示，MMP-9水平与患者脑组织水肿情况具有显著正相关的关系。提示MMP-9参与了脑出血后继发脑组织水肿。两组患者在24 h内，MMP-9与TIMP-1呈显著负相关的关系，而随着时间延长，在发病后5 d时，两者呈正相关的关系，发病后14 d时，两者没有显著相关性。脑出血患者在发病后24 h内，MMP-9就显著升高，在发病后5 d达到高峰，随后14 d时有所下降，而研究组则下降更明显，低于24 h内水平。TIMP-1在24 h内也显著上升，但是与MMP-9呈负相关的关系，可能与MMP-9破坏血脑屏障，导致脑组织水肿有关。有学者认为在脑出血后24 h内，TIMP-1水平与MMP-9水平呈负相关，可能与MMP-9水平升高对其有抑制作用有关，另外，其他炎性因子增加、Hb裂解及凝血酶等也会抑制IMP-1释放。在发病后5 d，两者呈正相关，TIMP-1更多地释放以发挥对抗MMP-9的作用。而醒脑静组TIMP-1升高的水平更显著，说明对患者脑水肿具有保护作用。

综上所述，脑出血患者MMP-9及TIMP-1水平升高，与患者脑水肿相关。而醒脑静能够抑制MMP-9水平的升高，促进TIMP-1的分泌，减轻脑水肿程度。

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（收稿日期：2015-09-30）