大豆中硒的示波极谱法测定

徐燕++邱诗春

摘要：以重庆三峡农业科学院106份大豆为材料，采用催化极谱法测定大豆中硒的含量，对测试条件进行筛选试验并对样品中硒的测定结果进行分析。结果表明，催化极谱法测定大豆中硒含量标准差小、重复性好、操作简便，是一种较好的硒含量测定方法。

关键词：大豆；硒；催化极谱法；重要性

中图分类号：S565.101；O657.14；O613.52文献标志码：A文章编号：1002-1302（2015）11-0406-02

收稿日期：2014-10-29

基金项目：重庆市攻关项目（编号：cstc2012gg-yyjs0063）。

作者简介：徐燕（1965—），男，重庆人，高级农艺师，从事作物品质分析工作。Tel：（023）58803826；E-mail：756840135@qq.com。大豆富含人体所必需的18种氨基酸，营养极为丰富，其制品广受人们喜爱。硒是人和动物体内无法合成的生命活动必需的微量元素。早有研究证明，食物中缺硒与克山病、大骨节病有关，是导致冠心病、动脉粥样硬化等病的发病因素之一[1]，因此关于硒的营养研究愈来愈引起人们的重视，而富硒大豆的品种选育刻不容缓。

目前测定食品中硒的方法有石墨炉原子吸收法、原子荧光光谱法、中子活性分析法、电化学法等[2-3]。但上述方法仪器设备比较贵，主要试剂进口且有一定的毒性，所需温度等条件苛刻，普通实验室无法开展该项工作。因此，笔者采用催化极谱法进行大豆硒测定试验，该方法具有灵敏度高、重复性好、操作费用低的特点，试验结果对基层农业科研单位富硒大豆品种的选育具有指导意义。

1材料与方法

试验于2013年在重庆三峡农业科学院生物技术中心进行。

1.1材料

重庆三峡农业科学院杂粮作物研究室提供106份大豆材料。

1.2仪器与设备

1.2.1仪器JP-4000型示波极谱法，山东电讯七厂。

1.2.21% KIO4溶液称取1 g KIO4，用纯水溶解后，加入 2 mL 浓氨水，转入100 mL容量瓶中定容。

1.2.3NH4Cl-NH4OH-EDTA混合液[4]称取100 g NH4Cl、10 g EDTA于800 mL烧杯中，加入200 mL浓氨水和适量水溶解，并定容至500 mL。

1.2.4Se标准溶液[5]称取二氧化硒（SeO2） 0.140 5 g，溶于少量水后，移入1 000 mL容量瓶中，用水稀释至刻度，混匀，即得100 μg/mL硒标准溶液，最后稀释至0.1 μg/mL硒标准使用溶液。

1.3试验方法

1.3.1样品的消化称取约1.0 g样品，加入15 mL浓硝酸+3 mL高氯酸，低温消化至清亮（不能干），转移定容至 50 mL。

1.3.2样品硒含量的测定吸取已消化好的试液10.00 mL置于25 mL容量瓶中，加入0.40 mL HClO4，20% Na2SO3 2 mL，充分摇匀，放置15 min后，依次加入NH4Cl-NH4OH-EDTA混合液5 mL和2% KIO4 4 mL，定容并摇匀，再倒入电解杯中测定。在示波极谱仪上选择测试条件：敲击时延时T=0.2 s，灵敏度13，用导数法从-0.05 V扫描至-1.1 V，峰电位约为-0.86 mV。

1.3.3HClO4用量试验设置0.010、0.020、0.030 μg硒含量按HClO4用量0.2～1.2 mL对样品硒含量影响进行试验。

1.3.4Na2SO3用量试验设置0.010、0.030 μg硒含量按Na2SO3用量1～6 mL对样品硒含量影响进行试验。

1.3.5KIO4用量试验按KIO4用量1～6 mL对样品硒含量影响进行试验。

1.3.6重复性试验取5份1.0 g大豆样品，按上述方法进行处理测定硒含量，并进行统计分析。

1.3.7加标回收率试验分别精确称取大豆1.000 0 g 3份，分别加入0.1 μg/mL硒标准溶液0.5、1.0、2.0 mL，与样品相同的条件下进行处理测定，对每个加标水平进行3次平行测定。

2结果与分析

2.1HClO4用量的影响

从图1可见，HClO4 0.4 mL用量电流峰高（H）明显高于0.2 mL 用量，但超过0.4 mL后电流峰高变化不明显，因此确定HClO4用量为0.4 mL。

2.2Na2SO3用量的影响

由图2可见，20% Na2SO3用量在2～6 mL内，电流峰高比较稳定，所以，在试验中加入2 mL 20% Na2SO3。

2.3KIO4用量的影响

由图3可见，催化电流峰高随KIO4用量增加而升高。但当2% KIO4用量超过5 mL时，硒量与催化电流峰高的线性关系差，所以，2% KIO4用量确定为4 mL。

2.4工作曲线及方法灵敏度

分别吸取0.1 μg/mL硒标准溶液0.00、0.10、0.20、040、0.60、0.80、1.00 mL，按样品测定步骤测定电流峰高，并绘制电流峰高-硒浓度标准工作曲线（图4）。其回归方程为y=1194.6x+7.238 1，r2=0.991 9，表明硒浓度在0.001～0.01 μg/mL 之间时线性较好。

2.5重复性试验

采用0.314、0.309、0.312、0.308、0.310 μg/g Se 进行重复性试验，结果显示RSD=0.78%，表明极谱法测定大豆中硒含量相对标准差较小，重现性好，精密度高，数据准确。

2.6回收率

由表1可知，该方法的加标回收率为98.0%～102.5%，平均回收率为100.8%，表明极谱法适用于大豆中硒含量的测定。

3结论

笔者采用极谱法研究测定硒含量的测定条件，结果表明，HClO4用量0.40 mL、Na2SO3用量2 mL、KIO4用量4 mL，Se含量在 0.001～0.010 μg/mL范围内。极谱法测定大豆中硒含量相对标准差小，重复性好，平均回收率为100.8%，适合大豆中硒浓度的定量测定。

参考文献：

[1]环境与地方病组. 克山病与自然环境和硒营养背景[J]. 营养学报，1982，4（3）：175-182.

[2]殷茂荣，魏滨，徐文杰. 氢化物-原子吸收法测定食品中硒[J]. 预防医学文献信息，2001，7（4）：408-425.

[3]何炼. 原子荧光光谱法直接测定铜矿中的硒[J]. 岩矿测试，2004，23（3）：235-237.

[4]苏循荣，林淳，杨孙楷. 红树属植物体中硒的示波极谱法测定[J]. 海洋科学，1988（1）：24-25.

[5]杨剑虹，王成林，代亨林. 土壤农化分析与环境监测[M]. 北京：中国大地出版社，2008：365.杜永华，敖光辉，魏琴，等. 油樟叶总黄酮和总多糖的抑菌活性[J]. 江苏农业科学，2015，43（11：408-410.