泌尿生殖道分离支原体及其耐药性

刘素玲，侯铁英

(广东省人民医院 广东省医学科学院，广东 广州　510080)



泌尿生殖道分离支原体及其耐药性

刘素玲，侯铁英

(广东省人民医院 广东省医学科学院，广东 广州510080)

[摘要]目的了解某地区泌尿生殖道分离支原体及其药敏情况，为临床合理治疗提供依据。方法对2008—2014年该院57 904例门诊患者泌尿生殖道标本进行解脲脲原体(Uu)和人型支原体(Mh)培养、鉴定及药敏试验。结果57 904例泌尿生殖道感染患者,21 614例(37.33%)培养阳性,女性支原体分离率为42.14%(18 917/44 889)，男性为20.72%(2 697/13 015)；支原体培养阳性人群主要集中在21～40岁。Uu、Mh 混合感染患者中，以Uu≥104CFU/mL、Mh<104CFU/mL的感染组合占相对优势(69.35%)。药敏结果显示支原体对多西环素、交沙霉素、四环素的耐药率较低(<10%)；Mh培养阳性者对多西环素、红霉素、克拉霉素、罗红霉素的耐药率均高于仅Uu培养阳性者，差异有统计学意义(均P<0.05)。结论门诊患者中支原体感染/携带率女性高于男性， Uu和Mh的药敏谱不一致，交沙霉素和多西环素可作为治疗支原体感染非淋菌性尿道(宫颈)炎的首选药物。

[关键词]泌尿生殖系统； 感染； 支原体； 抗药性，微生物

[Chin Infect Control，2015，14(12)：821-823,833]

解脲脲原体(Ureaplasmaurealyticum，Uu)和人型支原体(Mycoplasmahominis，Mh)是引起非淋菌性尿道(宫颈)炎(non-gonococcal urethritis，NGU)的主要病原体。近年来，随着临床抗菌药物的广泛使用，显性或隐性的生殖道感染发生率增加，且出现上行感染病例，如腹腔、心脏术后支原体感染[1]，且由于检测手段的局限性，临床的盲目治疗，导致耐药性增加。本研究对本院2008—2014年57 904 份门诊患者泌尿生殖道标本分离的支原体及其药敏结果进行统计，为临床治疗提供理论依据。

1对象与方法

1.1研究对象2008—2014 年本院门诊就诊的57 904例患者,采集标本57 904份(重复就诊患者取第1次结果)，其中男性13 015例，女性44 889例。

1.2标本采集在抗菌药物治疗前采集样本。标本采集严格按照《全国临床检验操作规程》第3版进行。男性：取尿道分泌物，应距前次排尿3 h 后取样，尽量采集尿道的上皮细胞；女性：扩阴器扩阴后，去除子宫颈口多余黏液，取宫颈分泌物，应避免局部用药。

1.3试剂支原体ID2试剂盒为法国生物梅里埃公司支原体IST和江门凯琳支原体药敏组合，抗菌药物包括多西环素、红霉素、环丙沙星、交沙霉素、克拉霉素、罗红霉素、强力霉素、司帕沙星、四环素、氧氟沙星。

1.4标本处理采集的标本立即接种于肉汤(试剂R1)中，室温条件下(18～25℃)必须在2 h内接种于鉴定和药敏板条，操作均按试剂盒说明书进行。

1.5结果观察排除细菌和真菌污染。肉汤浑浊标本均进行沉渣涂片检查，若发现细菌和真菌生长，均重新送检。

1.6质量控制每周进行支原体液体培养基与固体培养基A7比对试验，在质控范围之内，如有失控立即申购新批号试剂重新进行质量控制。

1.7统计方法应用SPSS 16.0软件进行统计学分析，组间率比较采用χ2检验。P≤0.05为差异有统计学意义。

2结果

2.1支原体分离率57 904例泌尿生殖道感染患者,21 614例(37.33%)阳性,女性支原体分离率为42.14%(18 917/44 889)，男性为20.72%(2 697/13 015)；其中以Uu分离率最高，女性Uu分离率为41.37%(18 572例)，高于男性的20.36%(2 650例)，差异均有统计学意义(χ2=1 918.62，P<0.05)。不同性别感染者支原体培养结果见表1。

2.2支原体培养阳性人群年龄分布支原体培养阳性人群主要集中在20～40岁。见表2。

表1不同性别感染者支原体培养结果

Table 1Culture results ofMycoplasmaisolated from infected patients of different genders

支原体女性(n=44889)例数构成比(%)男性(n=13015)例数构成比(%)Uu-Mh+3450.77470.36Uu+Mh+25385.653102.38Uu+Mh-1603435.72234017.98Uu-Mh-2597257.861031879.28

+：表示培养阳性；-：表示培养阴性

表2支原体培养阳性人群年龄分布(%)

Table 2Age distribution of patients withMycoplasmapositive culture(%)

年龄(岁)Uu+Mh-女性(n=16034)男性(n=2340)Uu-Mh+女性(n=345)男性(n=47)Uu+Mh+女性(n=2538)男性(n=310)15~2.141.280.872.133.351.2921~48.6744.0636.5236.1742.5140.6531~32.5742.3932.4636.1731.6839.6841~13.4010.1321.4521.2816.4315.16>503.222.148.704.266.033.23合计100.00100.00100.00100.00100.00100.00

2.3支原体菌落计数结果16 034例女性Uu感染患者中，70.99%菌落计数≥104CFU/mL；2 340例男性Uu感染患者中，72.86%者菌落计数≥104CFU/mL。345例女性Mh感染患者中，8.41%者菌落计数≥104CFU/mL；47例男性Mh感染患者中，4.26%者菌落计数≥104CFU/mL。Uu、Mh 混合感染患者中，以Uu≥104、Mh<104的感染组合占相对优势(69.35%)。见表3～4。

表3不同性别Mh、Uu感染者菌落计数结果(例，%)

Table 3Colony counts of Mh and Uu from infected patients of different genders (No. of cases, %)

菌落计数(CFU/mL)女性Mh+Uu+男性Mh+Uu+<104316(91.59)4652(29.01)45(95.74)635(27.14)≥10429(8.41)11382(70.99)2(4.26)1705(72.86)合计345(100.00)16034(100.00)47(100.00)2340(100.00)

2.4药敏试验结果Uu-Mh+组、Uu+Mh+组(Mh培养阳性)对阿奇霉素、红霉素、克拉霉素、罗红霉素、氧氟沙星的耐药率均高于Uu+Mh-组(仅Uu培养阳性)，差异有统计学意义(均P<0.05)。Uu+Mh-组男性患者对罗红霉素的耐药率高于女性患者，而女性患者对司帕沙星、氧氟沙星的耐药率高于男性患者(均P<0.05)；Uu+Mh+组女性患者对司帕沙星的耐药率高于男性患者(P<0.05)。除环丙沙星(耐药性>60%)和氧氟沙星(耐药率>20%)外, Uu对其余药物的耐药性均相对较低；除交沙霉素、多西环素、四环素耐药性较低外，Mh对其余药物的耐药性均较高。见表5。

表4不同性别支原体混合感染菌落计数结果(例，%)

Table 4Colony counts ofMycoplasmafrom mixedMycoplasma-infected patients of different genders (No.of cases，%)

菌落计数(CFU/mL)女性男性合计Uu、Mh<104469(18.48)20(6.45)489(17.17)Uu、Mh≥104326(12.84)44(14.19)370(12.99)Uu<104、Mh≥10414(0.55)0(0.00)14(0.49)Uu≥104、Mh<1041729(68.12)246(79.35)1975(69.35)合计2538(100.00)310(100.00)2848(100.00)

表5不同感染类型支原体耐药率比较(%)

Table 5Comparison in drug resistance rates ofMycoplasmacausing different infection (%)

抗菌药物Uu+Mh-女性(n=16034)男性(n=2340)Uu-Mh+女性(n=345)男性(n=47)Uu+Mh+女性(n=2538)男性(n=310)阿奇霉素1.651.4595.9491.4988.8190.65红霉素 6.425.1395.9491.4989.0588.39环丙沙星69.7567.0150.4348.9489.2488.39司帕沙星10.165.6822.6117.0239.0529.35氧氟沙星25.3021.2043.1936.1763.8359.03交沙霉素0.150.090.000.003.313.23克拉霉素0.951.2096.2389.3688.2290.32罗红霉素0.901.3294.4991.4986.4987.10多西环素3.183.630.000.004.696.13四环素 3.463.557.830.009.659.03

3讨论

支原体感染是生殖道感染的主要病原体，调查分析显示，女性Uu+Mh-组、Uu-Mh+组及Uu+Mh+组检出率分别为35.72%、0.77%、5.65%，均高于男性患者(分别为17.98%、0.36%、2.38%)。

此外，Uu、Mh 混合感染患者中，以Uu≥104CFU/mL、Mh<104CFU/mL的感染组合占相对优势(69.35%)，可能与本地区支原体感染主要类型为Uu感染为主有关。Abele-Hom 等[2]报道显示，健康人群活跃期支原体分离率男性为25%～53%，女性为40%～80%。本组结果显示，支原体检出率为37.33%，其中女性支原体检出率(42.14%)高于男性(20.72%)(P<0.05)，与报道[3-4]基本一致。有些患者泌尿生殖道长期携带支原体，并无临床症状，可能与支原体不同血清型有关，具体情况有待进一步研究。

本研究结果显示， Uu单独感染，喹诺酮类抗生素的耐药率较高，特别是环丙沙星耐药率达60%以上，大环内酯类抗生素和四环素类较低；Mh单独感染，四环素类抗生素耐药率最低；Uu和Mh混合感染者，除四环素类抗生素耐药率较低外，喹诺酮类(除司帕沙星)、大环内酯类抗生素(除交沙霉素)的耐药率均很高。阿奇霉素可作为Uu感染的治疗用药，但是不能用于Mh感染或混合感染的治疗用药，对于Mh感染和Mh、Uu混合感染的耐药率均>80%；交沙霉素和多西环素可作为Uu和Mh支原体感染的治疗用药，耐药率均<7%。由于近年来，环丙沙星和氧氟沙星在临床使用较多，Uu和Mh对其均产生了耐药性，其耐药率维持在高耐药的稳定状态，环丙沙星耐药率>50%，而混合感染对于氧氟沙星的耐药率高达63.83%，均不适合作为支原体感染的治疗用药，耐药机制主要为喹诺酮类的耐药机制，即基因突变导致靶酶的氨基酸改变。喹诺酮类耐药决定区(QRDR)的gyrA、parC基因突变在细菌对喹诺酮类抗菌药物的耐药方面起重要作用，染色体DNA促旋酶和拓扑异构酶Ⅳ的突变导致全酶改变，阻止喹诺酮类抗菌药物进入作用区[5-6]，同时也与氧氟沙星可诱导Mh产生多重耐药及tetM基因等有关[7]。另外，对于作用于细胞壁的药物，如β-内酰胺酶抗生素对支原体治疗均无效，因其无细胞壁结构，故普遍耐药。因此，对于支原体感染的治疗，泌尿生殖道标本支原体培养和药敏检测非常重要，而临床经验用药可推荐四环素类药物多西环素，大环内酯类抗生素阿奇霉素可单独用于Uu的治疗，不能用于混合感染的治疗，而喹诺酮类则不推荐用于支原体感染的治疗。

支原体通常不能侵入黏膜下层，除非患者使用免疫抑制剂等情况，支原体可发生血行感染及其他部位感染[8]。近年来，随着侵入性操作增多、临床β-内酰胺类抗生素作用于细胞壁的抗生素增加，支原体异位感染的病例国外曾有报道，国内开始有个案报道(我院已经发现心脏术后血行和心脏瓣膜感染人型支原体1例，卵巢恶性肿瘤术后腹腔积液人型支原体感染1例，文章均待发表)，因此，人群中支原体感染和携带率如此高亦应引起临床重视，非泌尿生殖道标本在感染诊断困难时，应考虑是否存在支原体异位感染的可能。

[参 考 文 献]

[1]Le Guern R, Loiez C, Loobuyck V, et al. A new case ofMycoplasmahominismediastinitis and sternal osteitis after cardiac surgery[J]. Int J Infect Dis, 2015, 31:53-55.

[2]Abele-Hom M，Wolff C，Dressel P，et al. Polymerase chain reaction versus culture for detection ofUreaplasmaurealyticumandMycoplasmahominisin the urogenital tract of adults and the respiratory tract of newborns[J]. Eur J Clin Microbiol Infect Dis，1996，15(7)：595-598.

[3]陈东科，陈丽，胡云建.泌尿生殖道支原体感染趋势及耐药性分析[J].中华检验医学杂志,2006, 29(2):170-172.

[4]丁志红，吕春兰，苏大林. 某中医医院连续3年女性生殖系统感染解脲脲原体的耐药性[J]. 中国感染控制杂志, 2014, 13(12): 736-738.

[5]张皎，袁定芬. 泌尿生殖道分离的324株支原体药敏结果分析[J].复旦学报，2009，36(5)：605-608.

[6]Bebear CM, Renaudin H, Charron A, et al. In vitro activity of trovafloxacin compared to those of five antimicrobials againstMycoplasmasincludingMycoplasmahominisandUreaplasmaurealyticumfluoroquinolone-resistant isolates that have been genetically characterized [J].Antimicrob Agents Chemother, 2000, 44(9): 2557-2560.

[7]张冉，吴移谋，向斌，等. 喹诺酮类药物诱导人型支原体耐药机理研究[J]. 中华检验医学杂志，2000，23(5)：273-275.

[8]Pinna GS, Skevaki CL, Kafetzis DA. The significance ofUreaplasmaurealyticumas a pathogenic agent in the paediatric population[J]. Curr Opin Infect Dis, 2006,19(3):283-289.

(本文编辑：左双燕)

·论著·

·论著·

Isolation and antimicrobial resistance ofMycoplasmafrom urogenital tract

LIUSu-ling,HOUTie-ying(GuangdongGeneralHospital,GuangdongAcademyofMedicalSciences,Guangzhou510080,China)

[Abstract]ObjectiveTo explore the isolation and antimicrobial susceptibility of Mycoplasma from urogenital tract, and provide the basis for rational clinical treatment.MethodsUrogenital tract specimens from 57 904 outpatients in a hospital between 2008 and 2014 were performed Ureaplasma urealyticum (Uu) and Mycoplasma hominis(Mh) culture, identification, and antimicrobial susceptibility testing.ResultsOf 57 904 patients with urogenital infection，21 614 (37.33%) had positive culture for Mycoplasma, isolation rate of Mycoplasma in female and male were 42.14% (18 917/44 889)and 20.72% (2 697/13 015)respectively; Mycoplasma was mainly isolated from population of 21-40 years old; Uu≥104CFU/mL and Mh<104CFU/mL mixed infection was common(69.35%). The resistance of Mycoplasma to doxycycline, josamycin, and tetracycline were all low(<10%); resistance rates of Mh to doxycycline, erythromycin, clarithromycin, and roxithromycin were all significantly higher than Uu (all P<0.05).ConclusionMycoplasma infection/carriage rate in female outpatients is significantly higher than male outpatients, antimicrobial profile of Uu is different from Mh, josamycin and doxycycline can be as the first choice for treatment of non-gonococcal urethritis (cervicitis) caused by Mycoplasma.

[Key words]urogenital system; infection; Mycoplasma; drug resistance, microbial

DOI:10.3969/j.issn.1671-9638.2015.12.012 10.3969/j.issn.1671-9638.2015.12.009

[通信作者]刘波E-mail:liusanbo@163.com 詹思延E-mail:siyan-zhan@bjmu.edu.cn

[作者简介]李惠芬(1964-)，女(汉族)，江苏省常州市人，副主任护师，主要从事医院感染管理研究。 刘翠梅(1973-)，女(汉族)，内蒙古呼伦贝尔市人，研究生，主要从事医院感染管理研究。

[基金项目]江苏高校优势学科建设工程资助项目(JX10231802)

[收稿日期]2015-06-24 2015-03-25

[中图分类号]R691.3

[文献标识码]A

[文章编号]1671-9638(2015)12-0821-04