浅析结核分枝杆菌对氟喹诺酮类药物的耐药性

吴怀戈

氟喹诺酮类药物是治疗结核病的常用药物。近年来，随着结核病发病率的不断升高，结核病患者对氟喹诺酮类药物的抗药性也随之增强，严重地影响其治疗效果。为了进一步探讨结核分枝杆菌对氟喹诺酮类药物的耐药性，笔者对2014年9月～2015年5月期间在我院接受治疗的结核病患者携带的178株结核分枝杆菌的检测资料进行回顾性研究，以便为临床合理用药提供参考。现将研究结果报告如下：

1 资料与方法

1.1 一般资料

本次研究的对象为2014年9月～2015年5月期间在我院接受治疗的结核病患者携带的178株结核分枝杆菌。这178株结核分枝杆菌经常规生化鉴定和分子生物学鉴定后，均被确定为结核分枝杆菌。

1.2 检测方法

使用液体培养基联合MTT技术对这178例结核分枝杆菌均进行耐药性检测。进行检测的项目为，氧氟沙星、莫西沙星和左氧氟沙星对这178株结核分枝杆菌的最低抑菌浓度（MIC）和BactecMGIT960药敏性。进行耐药性检测的方法为：①配制7H9-S液体培养基：Middleebrook7H9液体培养基，包括0.5%的甘油，0.1%的酪蛋白胨，葡萄糖，10%的油酸，牛血清白蛋白，过氧化氢酶添加剂。②配制试剂的方法：用0.1mol/L的NaOH溶解氧氟沙星、左氧氟沙星和莫西沙星，将其分装后放置在-70℃中备用。使用PH=6.8的磷酸缓冲液溶解MTT（噻唑蓝），将其配制成浓度为5mg/ml的溶液，用0.22μm的无菌滤过器对此溶液进行除菌后，避光放置在4℃中备用。③进行MIC检测的方法为：按照WHO推荐的比例法对这178株结核分枝杆菌进行药敏试验，接种量为10-104。将这三种氟喹诺酮类药物的药物浓度设定为：氧氟沙星的浓度为0.125～32μg/ml，左氧氟沙星的浓度为0.125～32μg/ml，莫西沙星的浓度为0.063～4μg/ml。④进行MGIT960药敏检测的方法为：按照柳正卫等人[1]的试验方法对这178株结核分枝杆菌对氧氟沙星、左氧氟沙星和莫西沙星的耐药性进行检测。将H37Rv作为每次试验的质控菌株。

2 结果

2.1 进行MGIT960药敏检测的结果

在这178株结核分枝杆菌中，对氧氟沙星敏感的菌株有119株，对该药耐药的菌株有59株（占33.1%），有82株菌株对一线抗结核药和两种二线抗结核药全敏，其中对氧氟沙星耐药的菌株有2株，其MIC值分别为2μg/ml和0.5μg/ml。在这82株菌株中，有80株对氧氟沙星、左氧氟沙星、莫西沙星均敏感，其中氧氟沙星对这些菌株的MIC值为2μg/ml，左氧氟沙星对这些菌株的MIC值为1μg/ml，莫西沙星对这些菌株的MIC值为0.25μg/ml。在这178株结核分枝杆菌中，有86株菌株对一线抗结核药物全敏，其中氧氟沙星对这些菌株的MIC值为4μg/ml，左氧氟沙星对这些菌株的MIC值为2μg/ml，莫西沙星对这些菌株的MIC值为0.5μg/ml。上述结果显示，这178株结核分枝杆菌对氧氟沙星的耐药性最高，对左氧氟沙星的耐药性次之，对莫西沙星的耐药性最低。

2.2 对三种氟喹诺酮类药物对耐多药结核分枝杆菌进行MIC检测的结果

在这178株结核分枝杆菌中，耐多药结核分枝杆菌有74株。这74株结核分枝杆菌对莫西沙星的的MIC值均≤1μg/ml。对这三种药物进行两两秩和检验的结果显示，其P值均小于0.05。详情见表1。

表1 这74株耐多药结核分枝杆菌在不同药物浓度下其MIC值的分布

2.3 对广泛耐药结核分枝杆菌进行MIC检测的结果

在这178株结核分枝杆菌中，广泛耐药的菌株有28株，占15.7%。对这28株广泛耐药的菌株对这三种氟喹诺酮类药进行MIC检测的结果为：氧氟沙星对这些菌株的MIC值≥8μg/ml的菌株有15株（占53.6%），左氧氟沙星对这些菌株的MIC值≥4μg/ml的菌株有18株（占64.3%）。对这两种药物进行比较秩和检验的P值均小于0.05。这说明，这28株菌株对氧氟沙星和左氧氟沙星均具有耐药性。

3 讨论

目前，在临床上结核分枝杆菌对常用的氟喹诺酮类药物中的氧氟沙星的耐药性最为严峻，对左氧氟沙星的耐药性次之[2]。在6种一线和二线抗结核病药物中，结核分枝杆菌对氧氟沙星的耐药性最高[3]。因此，在使用氟喹诺酮类药物对结核病患者进行治疗时，应充分重视其所携带的结核分枝杆菌对氧氟沙星和左氧氟沙星的耐药性，需根据其进行药敏检测的结果，为其合理用药。

[1] 柳正卫,何海波,缪梓萍等.984株结核分枝杆菌耐药情况分析.中国防疥杂志,2007,29(2):167-170.

[2] 吴小林.结核病药物研发的进展、挑战和展望[J].国外医药抗生素分册,2010,31(3):119-123.

[3] 中华人民共和国卫生部.全国结核病耐药性基线调查报告(2007-2008年).人民卫生出版社,2010:25-52.