不同测试仪器及冷藏时间对血乳酸测定值影响的比较

不同测试仪器及冷藏时间对血乳酸测定值影响的比较

陈瑶,石智晔,郭子渊,魏良忠

(安徽省体育科学技术研究所,安徽 合肥 230001)

摘要：目的：①分析德国Senslab公司的Lactata-scout便携式乳酸盐分析仪与德国EKF诊断公司生产的EKF-C-Line GP型台式乳酸盐分析仪的测试结果，判断两种仪器能否相互替代使用；②对比不同冷藏时间血样的乳酸值与采血即刻的测试结果，寻找进行乳酸测试的血样冷藏保存期限。方法：①同时使用便携式与台式乳酸盐分析仪测量受试者运动后的血乳酸，分析两组测量结果的相关性及一致性；②将冷藏后的血样每隔1天使用台式乳酸盐分析仪测量其乳酸值，直至冷藏14天，将这些结果与采血当天的测试结果进行比较。结果：①便携式与台式乳酸盐分析仪的测量结果相互比较，配对t检验得出两种测试方法平均差值为-0.114 mmol/L，P>0.05，相关系数r=0.912,两者存在显著性相关及很好的一致性；②每组冷藏血样每隔1天测试的乳酸结果与采血当天的测试值无显著性差异(P>0.05)，结果呈现逐渐上升的趋势，此外，P值也逐渐减小，在冷藏14天后的P值为0.16。结论：①便携式与台式乳酸盐分析仪在测量结果上存在很好的一致性，在实际中能够互相替代使用。②血样冷藏14天后对血样的乳酸值影响在统计学的允许范围内。

关键词：EKF-C-Line GP型台式乳酸盐分析仪；Lactata-scout便携式乳酸盐分析仪；血乳酸值；冷藏时间

文章编号：1004-3624(2015)05-0121-04

中图分类号:G804.7

文献标识码：A

Abstract:Objective: ①The results of blood lactate levels, tested by Lactata-scout's portable lactate analyzer (Germany Senslab) and EKF-C-Line GP-based desktop lactate analyzer (German EKF) were compared to determine whether the two instruments could be used instead of each other; ②The blood lactate levels were immediately tested and were compared with the test results of different storage time, to find out how long it could be refrigerated. Methods: ①Using portable and desktop lactate analyzer to measure the blood lactate of athletes after exercise, looked for the correlation and consistency of the two measurements; ②The frozen blood samples were measured after every other day until refrigerated 14 days, then these results were compared. Results: ①It showed a good link to the results which were tested by portable and desktop lactate analyzer, the correlation coefficient r=0.912, paired t-test results mean difference between the two test of refrigerated was -0.114 mmol/L; ②Each group results which were tested in 14 days storage comparing to blood lactate which was tested the day, was no significant difference, and it becomed higher along with the storage time, and P was 0.16 on the 14th day. Conclusions: ①Portable and desktop presence of lactate analyzers were good consistency, in practice, be able to replace one another. ②The blood samples could be storaged at least 14 days and had not significant influence on the results of blood lactate.

Effects of Different Instruments and Storage Time on Blood Lactate

CHEN Yao,SHI Zhi-ye,GUO Zi-yuan,WEI Liang-zhong

(Anhui Institute of Physical Science and Technology, Hefei 230001, China)

Key words:EKF-C-Line GP-based desktop lactate analyzer; lactata-scout's portable lactate analyzer; blood lactate levels; storage time

0前言

乳酸是糖无氧酵解的产物，运动时其浓度的变化主要受运动负荷、年龄、运动方式、肌糖原贮备等因素的影响；可以作为运动实践中掌握运动强度的依据或评价运动员无氧代谢的重要指标之一；还广泛应用于运动员选材、运动员训练水平的评定、训练计划的制定、训练效果的监测等方面。在体育科学研究中，血乳酸是一个比较成熟，十分常用的指标[1]。

不同方法测试血乳酸对其结果会有影响，采用YSI 23L酶法与改良Baker-Summer-son化学法测定血乳酸,结果显示两种方法的测试结果具有很高的相关性[1]。不同仪器对乳酸测试值影响的研究中使用Lactate -scout 型便携式乳酸盐分析仪与YSI1500 型乳酸盐分析仪，结果显示两者也具有很高的相关性[2]。此外，亦有研究针对不同仪器、不同血样标本测试比较生化指标问题进行报道。在室温情况下，血液样本的储存时间会对其血常规测试的结果存在影响也被报道[3]。封文平[4]等研究不同保存方式和保存时间对血乳酸测定值影响，得出结论“血样在冷冻4周，冷藏5天后利用YSI1500台式乳酸盐分析仪测试其乳酸结果与采血当天相比无显著性差异，两类结果可以通用”。

在进行体育科研工作过程中常常遇到以下情况：运动队在外地短期集训或外出比赛期间，我们会用便携式乳酸盐分析仪即刻测试；而且有时采取的血样不能即刻进行测试，而是冷藏处理，回到实验室用台式血乳酸仪进行测试(一般最长期限15天左右)。因此，便携式和台式乳酸盐分析仪两种不同的测试方法得出的结果是否可以通用？以及血样采集后冷藏保存是否对测试结果造成影响以及可冷藏保存的时间是多久？这些疑问是在实际应用乳酸过程中需要解决的问题之一；本研究旨在比较两种不同仪器对同一血样的乳酸测试值，及分析台式乳酸盐分析仪测试冷藏不同时间的血液乳酸值，以得到科学合理的结论。

1对象与方法

1.1研究对象

研究对象为参加安徽省运动员选招的优秀运动员68名，其中男性34名，女性34名，受试者基本情况见表1，身体均无异常。

表1　受试者基本情况

1.2研究方法

取受试者在进行最大摄氧量测试后2min的耳血，即刻进行便携式乳酸盐分析仪的测试，并在同一滴耳血中取20ul放入台式乳酸盐分析仪的配套样品管(含溶血剂)中，充分混匀并且分装，即刻上机检测得出的数据即为采血当天的测试结果；剩余样本置于冰箱4～6度冷藏，每隔1天进行一次测试，测试时先取出样本放置恢复室温，充分混匀后于台式乳酸盐分析仪上进行测试，每次测试前先定标、质控，质控值均在可控范围内。

测试仪器：①便携式乳酸盐分析仪为德国Senslab公司的Lactata-scout,其实验原理是根据氧化酶-电极法检测人体血乳酸水平，所需血量0.5ul，测试时间15s，测试范围0.5~25.0mmol/L。②台式乳酸盐分析仪为德国EKF诊断公司生产的EKF-C-Line GP型，其实验原理是采用固化酶-电极法，需全血量20ul，测试时间60s，测试范围0.5~40mmol/L。

1.3数据统计

结果使用统计软件SPSS17.0，所得数据用±SD表示。对便携式及台式乳酸盐分析仪两种仪器测试结果进行配对t检验和线性回归分析；对冷藏至14天每隔1天测试乳酸值的分别与采血当天的测试结果进行单方分析。

2结果

2.1EKF-C-Line GP台式乳酸盐分析仪与 Lactate-scou便携式分析仪的乳酸值

由表2可以看出配对t检验结果显示：两种测试方法所测结果的平均差值(便携式-台式)为-0.114mol/L，差值的95%置信区间为-0.402～0.174，差值的标准差为1.045，P>0.05。由图1可以看出，以EKF-C-Line GP台式乳酸盐分析仪测试值为标准，将EKF-C-Line GP台式乳酸盐分析仪与 Lactate-scou便携式分析仪测试值进行线性回归分析得出回归方程为：Y(便携式)=1.054X(台式)-0.589；相关系数r=0.912 (n=53，P<0.01)。

表2　EKF-C-Line GP台式乳酸盐分析仪

图1　EKF-C-Line GP台式与Lactate-scou便携式

2.2冷藏不同时间血液乳酸值的比较

由表3可以看出, 冷藏后每隔1天测试乳酸值的各组结果分别与采血当天的测试结果，均无显著性差异(P>0.05)，数值呈现逐渐上升的趋势，此外，P值也逐渐减小，在冷藏14天后的P值为0.16。冷藏14天后乳酸值与采血当天测试结果的差异为9.68%，冷藏2天后与采血当天测试结果的差异为2.60%。

3讨论

3.1不同仪器测试乳酸结果的比较

首先，对便携式与台式乳酸盐分析仪的乳酸值进行配对样本t检验得出：它们的平均差值(便携式-台式)为 -0.114 mmol/L， P>0.05(表2)；在此基础上，为了进一步了解两者之间的确切关系，对其进行线性回归分析，得出结果：得出相关系数 r=0.912(n=53，P<0.01)，回归方程为：Y(便携式)=1.054X(台式)-0.589(图1)。这些结果提示，便携式与台式乳酸盐分析仪的乳酸值具有理想的线性关系，在实际应用中可以互相替代使用；并且可以通过回归方程进行对彼此的预算。

表3　不同保存时间后血乳酸值与采血当天测试结果的方差分析

注：0、2、4、6、8、10、12、14表示采血当天开始计算的冷藏天数，0为采血当天

在类似的研究中，全明辉等[5]比较了YSI1500和 Lactate-scout的测试结果，实验中配对数据的95%一致性界限为(-0.1 mmol/L，-14.6 mmol/L)，平均差值为-7.3 mmol/L，说明其差值较大，两种方法不能直接相互替代。McLean等[6]得到与本文相似的结论， McLean用Lactate Pro(日本京都公司)与YSI1500作一致性检验，两测试值的平均差值(Lactate Pro-YSI 1500)为0.5 mmol/L，差值的范围从0至2.7 mmol/L；结果显示两台仪器的乳酸值具有很好的一致性。造成这些研究不一致结果的原因可能是仪器生产商家不同，系统对乳酸具体测试原理与细节的安排设计造成的。本文的结果只能说明我们使用的台式和便携式乳酸测试仪器在实际应用过程中可以相互替代；而其他的测试仪器是否可以互相替代需要进一步验证。

实验中有趣的现象是，在一定范围内，EKF-C-Line GP台式的测试结果普遍要高于Lactate-scou便携式的测试值；在乳酸浓度<6 mmol/L时，两种方法的结果差值较小；当浓度为6～10 mmol/L时，EKF-C-Line GP台式的测试结果略高于Lactate-scou便携式；当浓度>10 mmol/L时，变成Lactate-scou便携式的测试结果略高于EKF-C-Line GP台式。这一现象是否表明，在不同的乳酸范围内，不同乳酸测试仪器的精确、敏感性不一？在窦兰君、黄光秀等[7,8]的研究中发现，在一定的范围内Lactate Pro便携式的测试值要高于YSI 1500台式的，但差值并不大而且不是所有的Lactate Pro测试结果都较高。Medbo等[9]发现当血乳酸浓度<6mmol/L时测试系统误差要比>6mmol/L时要少。同时当浓度>10mmol/L时，Lactate Pro测试结果比YSI1500高出12%。因此，为了追求科学的乳酸测试数据，将进一步寻找两台仪器测试乳酸值可以相互替代的数值范围。

3.2不同冷藏时间对血乳酸测定结果的影响

冷藏后每隔1天测试的各组乳酸值与采血当天的测试结果相比，均无显著性差异；而且数值呈现逐渐上升的趋势，此外，P值也逐渐减小，在冷藏14天后的P值为0.16(表3)。虽然本研究未能找到出现显著性差异的分界点(冷藏天数)，但是可以预测在冷藏14天后短期内可能会出现P<0.05的情况；出于样本太小(7个P值)，而且也不能找到类似处理方式的文献研究的数据，因为不能够通过回归分析手段预测P<0.05的冷藏天数。

探讨不同保存方式和保存时间对血乳酸测定值影响有过类似研究，封文平[4]等得出结论血样在冷冻4周，冷藏5天后利用YSI1500台式乳酸盐分析仪测试其乳酸结果与采血当天相比无显著性差异，两类结果可以通用。但有关一份血样冷藏保存14天后，使用EKF-C-Line GP台式乳酸盐分析仪测试后的结果变化迄今未见报道。本文的研究设定在冷藏14天，进一步扩大了封文平[4]等指出的用于乳酸测试血样的冷藏时间。

血液在离体状态下依然可以进行物质代谢，即使在冷藏状态下；而且在密闭容器中的血液，不能像在体时那样进行循环，造成乳酸的堆积，表3的乳酸值呈现逐渐递增的趋势与之吻合。此外，血样是否因为挥发造成整体体积缩小，从而导致乳酸数值相对增大也是可能的原因。

4结论

4.1Lactate-scou便携式乳酸盐分析仪与EKF-C-Line GP台式乳酸盐分析仪在测量结果上存在很好的一致性，在实际中能够互相替代使用。

4.2血样冷藏14天后对乳酸值的影响在统计学的允许范围内，其测试结果随时间的推移呈现逐渐上升的趋势。

参考文献

[1] 冯连世,李开刚.运动员机能评定常用生理生化指标测试方法及应用[M].北京：人民体育出版社,2002:99-109.

[2]张云龙,程宇镳,王文莹,等.新型便携式和台式乳酸盐分析仪与YSI1500 型乳酸盐分析仪在运动测试中的比较实验[J].中国运动医学杂志,2005,24(5):610-611.

[3] Gene L.Gulati,PhD;Lawrence J.Hyland,MD;William Kocher,MD;Rolland Schwarting, MD. Changes in Automated Complete Blood Cell Count and Differential Leukocyte Count Results Induced by Storage of Blood at Room Temperature.Archives of Pathology & Laboratory Medicine,2002,126(3):336-342.

[4] 封文平，冯连世，李开刚，尚文元. 不同保存方式和保存时间对血乳酸测定值影响的对比分析[J].中国运动医学杂志,2003,22(6):584-585.

[5]全明辉，张秋海，陈彩珍，董莉.便携式与经典式血乳酸盐测试仪的标准值比较[J].中国组织工程研究与临床康复，2010,14(33)：6167-6170.

[6] McLean SR,Norris SR,Smith DJ.Comparison of the Lactate Pro and the YSI 1500 Sport Blood Lactate Analyzers.International Journal of Applied Sports Sciences.2004，16(2):22-30.

[7] 窦兰君,李文选,汪济民.血液乳酸超微量改良法的改进及其应用[J].解放军预防医学杂志,1994,12(2):118-122.

[8] 黄光秀.酶法和电极法测定血桨中葡萄糖、尿素及乳酸的实验对比[J].广东医学,2002,23(11):1198-1199.

[9] Medbo JI, Mamen A, Holt Olsen,et al.Examination of four different instruments for measuring blood lactate concentration.Scandinavian Journal of Clinical and Laboratory Investigation.2000，60:367-379.