进行T-SPOT.TB试验在诊断肺结核方面的价值

程 利

肺结核是临床上呼吸内科的常见病。此病患者的主要临床表现为低热、盗汗、消瘦、乏力、咳痰和咳血等，可严重影响其生活质量。因此，对肺结核患者进行快速、准确的诊断具有非常重要的临床价值[1]。相关的临床实践证实，用T-SPOT.TB试验诊断肺结核可取得很好的效果[2]。为了进一步证实此诊断方法的有效性，笔者对2014年6月至2015年8月期间在我院经结核分枝杆菌分离培养试验证实患有肺结核的32例患者的临床资料进行回顾性研究。现将研究结果报告如下：

1 资料与方法

1.1 一般资料

本次研究的对象为2014年6月至2015年8月期间在我院经结核分枝杆菌分离培养试验证实患有肺结核的32例患者和同期在我院进行常规体检的16例健康人。我们将32例肺结核患者作为肺结核组，将16例健康人作为健康组。在肺结核组32例患者中，有女性17例，男性15例。他们的年龄在14岁至74岁之间，平均年龄为（47.25±4.17）岁。在健康组16例健康人中，有女性7例，男性9例。他们的年龄在15岁至77岁之间，平均年龄为（48.18±5.72）岁。

1.2 试验方法

为这两组人均进行T-SPOT.TB试验和PPD试验。进行T-SPOT.TB试验的方法是：（1）使用由上海复星科技有限公司生产的T-SPOT.TB 试剂盒对受检者进行T-SPOT.TB试验。（2）经受检者的肘正中静脉采集其静脉血6ml。（3）使用适量的肝素对受检者的血样进行抗凝处理。（4）对血样中的PBMC（外周血单个核细胞)进行分离处理。（5）将 AIM-V培养液（干细胞无血清培养液） 加入到血样中，使用五分类计数仪对血样中的PBMC进行计数，然后将血样中PBMC的浓度稀释至 2.5 × 105 个 /ml。（6）将 50 µl的抗原 B（CFP-10）、50 µl的结核杆菌特异性抗原 A（ESAT-6）、50 µl的植物血凝素（PHA）和50 µl的AIM-V培养液分别加入到抗体微孔板的抗原 B 检测孔、抗原A检测孔、PHA 对照孔及阴性对照孔中，然后在每个微孔中加入100 µl的血样。（7）将抗体微孔板置于37摄氏度、二氧化碳浓度为5.0%的培养箱中进行培养，进行培养的时间为15～20个小时。（8）使用PBS溶液对抗体微孔板进行洗涤，然后在每个微孔中加入50µl的显色溶液，然后将抗体微孔板静置5～10min。（9）使用蒸馏水对抗体微孔板进行洗涤，然后对各个微孔中的斑点进行计数。进行PPD 试验的方法是：（1）使用由北京祥瑞生物有限公司生产的卡介菌纯蛋白衍生物试剂对受检者进行PPD 试验。（2）在受检者左前臂的尺侧注射0.1 ml的卡介菌纯蛋白衍生物试剂。（3）在注射完成72小时后，对受检者注射部位硬结的直径进行测量。

1.3 试验结果的判定标准

1.3.1 T-SPOT.TB试验结果的判定标准[3]受检者进行T-SPOT.TB试验的结果符合以下两种情况之一即可判定为阳性。（1）阴性对照孔中的显色点数少于6个，且检测孔中的显色点数与阴性对照孔中的显色点数之差大于或等于6个。（2）阴性对照孔中的显色点数多于或等于6个，但检测孔中的显色点数大于阴性对照孔中显色点数的二倍。

1.3.2 PPD 试验结果的判定标准[4]（1）阴性：受检者注射部位硬结的[(纵向直径+横向直径)/2]的值小于5.0 mm。（2）受检者注射部位硬结的[(纵向直径+横向直径)/2]的值大于或等于5.0 mm。

1.4 敏感度和特异度的计算方法[5]

（1）敏感度=真阳性例数/（真阳性例数+假阴性例数）（2）特异度=真阴性例数/（真阴性例数+假阳性例数）。

1.5 统计学处理

我们使用SPSS16.0软件包对本次实验的数据进行处理，计量资料以（X ±s）表示，采用t检验，计数资料用n(%)表示，采用x²检验，用P＜0.05表示差异具有统计学意义。

2 结果

2.1 用T-SPOT.TB试验、PPD试验诊断肺结核敏感度和特异度的比较

用T-SPOT.TB试验诊断肺结核的敏感度、特异度分别为96.55%和78.95%，用PPD试验诊断肺结核的敏感度、特异度分别为79.31%和52.63%。用T-SPOT.TB试验诊断肺结核的敏感度和特异度均明显高于用PPD试验进行诊断的敏感度和特异度，二者相比差异具有显著性（P＜0.05）。详细结果见表1。

2.2 用T-SPOT.TB试验和PPD试验诊断肺结核的

ROC曲线 使用ROC曲线分析法评价用T-SPOT.TB试验和PPD试验诊断肺结核的效果。进行ROC曲线分析的结果显示，用T-SPOT.TB试验诊断肺结核的效果明显优于用PPD试验进行诊断的效果。详细结果见图1。

表1 用T-SPOT.TB试验和PPD试验诊断肺结核敏感度和特异度的比较 ［n（%）］

3 讨论

肺结核是临床上呼吸内科的常见病。此病患者的主要临床表现为低热、盗汗、消瘦、乏力、咳痰和咳血等，可严重影响其生活质量。因此，对肺结核患者进行快速、准确的诊断具有非常重要的临床价值。近年来，随着医疗技术的不断发展，使用T-SPOT.TB试验诊断肺结核的方法逐渐得到了临床上的认可。为了进一步探讨进行T-SPOT.TB试验在诊断肺结核方面的临床价值，笔者将2014年6月至2015年8月期间在我院经结核分枝杆菌分离培养试验证实患有肺结核的32例患者作为肺结核组，再选取同期在我院进行常规体检的16例健康人作为健康组。为这两组人均进行T-SPOT.TB试验和PPD试验。试验结束后，比较用T-SPOT.TB试验和PPD试验诊断肺结核的敏感度和特异度。本次研究的结果显示，用T-SPOT.TB试验诊断肺结核的敏感度、特异度分别为96.55%和78.95%，用PPD试验诊断肺结核的敏感度、特异度分别为79.31%和52.63%。用T-SPOT.TB试验诊断肺结核的敏感度和特异度均明显高于用PPD试验进行诊断的敏感度和特异度。

综上所述，进行T-SPOT.TB试验在诊断肺结核方面具有非常重要的临床价值。此诊断方法值得在临床上推广应用。

[1] 顾国林,周芬,郭健,等. T-SPOT.TB 试验诊断菌阳及菌阴肺结核的价值[J].实用医学杂志,2015,31(9):1535-1536.

[2] 张立华,靳文香,贾红彦,等. T- SPOT 与结核菌素试验对结核病患者的临床诊断价值[J].中华临床医师杂志,2012,6(14):4107-4108.

[3] 荣兰香,马淑红,艾清,等.T. SPOT- TB 试验与 PPD 试验对结核病患者诊断价值相关性比较[J].中国实验诊断学,2013,17(8):1475-1476.

[4] 江道斌,温澍,齐曼古力·吾守尔,等.结核感染 T 淋巴细胞斑点试验在菌阴肺结核诊断中价值[J].中华实用诊断与治疗杂志,2013,27(10):1037.

[5] 张玉平,丁显平,张丽媛,等. T- SPOT. TB、 痰涂片和 TBDNA 检测在肺结核诊断中的比较研究[J].成都医学院学报,2013,8(1):49-51.