新型维生素E类似物对南美白对虾生长性能、成分及生物学活性的影响

2016-01-10刘博奇李其昌陈善真王志花陈克宏

饲料工业 2016年20期

■ 刘博奇李其昌杨洁陈善真王志花陈克宏

（1.广东海大集团股份有限公司，广东广州 511400；2.广东海大畜牧兽医研究院，广东广州 511400）

维生素E（Vitamin E，VE），又名生育酚，广泛存在于食用油、水果、蔬菜及粮食中，是一类有8种不同形式的脂溶性维生素，在饲料工业中有其特殊作用，其用量逐年上升[1-2]。VE作为饲料添加剂，既能促进机体抗氧化作用，又是畜禽生长所必须的生物催化剂，在畜禽免疫、疾病防治、肉质改善及繁殖等方面起到重要的作用，是当前畜禽及水产饲料中不可缺少的维生素之一[3-8]。

广东是我国畜牧业及水产业大省，尤其水产养殖产量多年来居全国首位。对饲料的极大需求和对肉制品质量要求的不断提高，导致了市场对VE作为饲料添加剂的需要大大提高[9-10]，为此，我们与乌克兰科学院共同合成一种分子量较低的VE类似物（VEa），活性官能团与VE完全相同，只是烃基侧链由29个碳缩短为19碳，降低了成本。本试验研究了VEa对南美白对虾生长性能、虾体营养成分及生物活性的影响，并与常规VE比较分析，对其量效进行了评估。

1 材料与方法

1.1 试剂、饲料及试验用虾

本试验所用化学试剂均为SIGMA产品，检测TSOD、ACP、AKP、MDA试剂盒购自南京建成泰浩生物科技有限公司，试验饲料为广东海大集团金禾饲料厂制作生产；试验选用的南美白对虾购自湛江当地虾苗场，平均体长为(4.0±0.2)cm、体重为(0.62±0.03)g。

1.2 添加VEa饲料分组及养殖方法

试验饲料分为8组，饲料中分别添加不同剂量的VEa，并以基础饲料为负对照，基础饲料+VE200 IU/kg（常规添加量）为正对照，具体参表1。试验南美白对虾采用循环水养殖系统，随机分8组养在24个水族箱内，3个水族箱/组，30尾/箱。试验开始前以基础饲料饲养，每天饱食投喂3次。1周后分别用试验组饲料投喂，每天定时（早7:00、中午13:30、下午17:00）饱食投喂，每次投喂1 h左右，然后移去剩余饲料。试验共进行8周，每日早晚两次检查记录虾生长情况，若有死亡及时捞出并称重记数，每周测一次水质参数。

1.3 样品采集与分析

试验结束前24 h停止投喂饲料，记录生长情况，于每个水族箱中随机选取6尾对虾进行称重、测量体长，计算增重率、摄食量、饲料系数、存活率、肥满度；对南美白对虾进行抽血制备血浆样品；活体解剖取完整的肝胰腺称重后立即保存于-20℃，待测生物学活性指标；随之计算肝胰指数，然后去掉头和外壳，肌肉100℃烘干，粉碎制作虾体成分检测样本。

对虾水分含量采用96℃真空干燥法测定；粗蛋白含量采用凯氏定氮法测定；粗脂肪含量采用索氏抽提法测定；粗灰分含量采用550℃高温灼烧法测定；化学元素铜、铁、锰、锌等采用原子吸收分光光度法测定，砷、铅、镉、铬采用电感耦合等离子体质谱法测定；血浆及肝胰腺中相关酶活性检测使用南京建成生物工程研究所生产的试剂盒进行测定，具体方法参照说明书。

表1 饲料及试验动物分组

1.4 数据计算与统计分析

增重率（weight gain rate，WGR，%）=100×[试验结束虾均重(g)-试验开始虾均重(g)]/试验开始虾均重(g)；

摄食量（feed intake，FI，g）=投饵料总量/（试验开始虾尾数+试验结束虾尾数）/2；

平均饲料系数（feed conversion ratio，FCR）=摄食量(g)/[试验结束虾均重(g)-试验开始虾均重(g)]；

存活率（survival rate，SR，%）=100×试验结束虾尾数/试验开始虾尾数；

肥满度（condition factor，CF，g/cm3）=虾体重(g)/虾体长3(cm3)；

肝胰指数（hepatosomatic index，HSI，%）=100×肝胰腺重(g)/虾体重(g)。

所有数据用SPSS 19.0统计软件处理，采用“平均值±标准差”表示；对负对照、VE正对照和不同剂量VEa饲喂过的南美白对虾各检测指标进行单因素方差分析，当差异显著（P＜0.05）时采用Duncan's法进行多重比较。

2 结果

2.1 生长性能指标测定结果(见表2)

表2 添加新型VEa对南美白对虾生长性能的影响

由表2可知，与VE200(+)正对照组比较，添加VEa的VEa160、VEa200组，其平均饲料系数略降低，而成活率升高，但不显著（P＞0.05）；而过量添加VEa的VEa300组的饲料系数最高，而成活率最低，但差异都不明显（P＞0.05）。6个VEa组肝胰指数均低于正对照组，各组对虾的肥满度均无显著差异（P＞0.05）。综上所述，用VEa160 IU/kg可以取代常规VE200 IU/kg作为南美白对虾饲料添加剂，不但用量减少了20%，而且饲料系数降低了2.3%，对虾成活率增加了1.1%。

2.2 虾体组成成分测定结果(见表3和表4)

由表3和表4可知，与正对照VE200(+)组比较，①VEa40和VEa250组对虾的水分含量分别高出18.8%和51.2%，但其他各组无显著差异；②各组对虾的粗蛋白、粗脂肪和粗脂肪含量无显著差异(P＞0.05)；③VEa各组对虾的铬元素含量普遍偏低（低34%～73%）、而VEa160组铁含量提高了41.6%，效果显著(P＜0.05）、VEa80组锰的含量高出35%（P＜0.05），各组对虾体内其它化学元素含量不显著。

表3 添加VEa对南美白对虾的干物质基础成分的影响(%)

表4 添加VEa对南美白对虾体内矿物质成分的影响(mg/kg)

2.3 血浆及肝胰腺中酶生物活性检测结果（见表5)

由表5可知，与VE200(+)组正对照比较，添加VEa80 IU/kg（VE组剂量的40%）使虾血浆的酸性磷酸酶（ACP）活性显著增高（P＜0.05），相反VEa250、VEa300组（VE组剂量的125%、150%）使血浆ACP活性显著降低（P＜0.05）；VEa300组使虾血浆碱性磷酸酶（AKP，巨噬细胞溶酶体的标志酶，也是参与动物体内免疫活动重要水解酶)活性明显降低（P＜0.05），其它各组无明显差异；各组对虾肝胰腺ACP差异不明显；VEa160组及VEa200组使虾肝胰腺的总超氧化物歧化酶（T-SOD）活性增加显著，分别为13.4%、24.2%（P＜0.05），而VEa300组使T-SOD活性显著降低21.1%（P＜0.05）；各组对虾肝胰腺的过氧化脂质降解产物（MDA）差异不明显（P＞0.05）。综上所述，添加剂量VEa160 IU/kg取代VE200 IU/kg即可明显增加酶活性。

表5 添加VEa对南美白对虾体内免疫、酶活性及抗氧化指标的影响

3 讨论

维生素E作为一种重要的营养素，对于维持水生动物正常的生长发育、繁殖和健康等具有重要的作用。然而，水生动物自身不能合成VE，必须由外界供给。目前已有研究表明，水产饲料中适当添加VE能促进水生动物生长、提高饲料效率及蛋白质利用率，亦能提升非特异免疫活性及抗氧化能力[11-12]。本试验使用新型VEa来替代虾饲料中传统的VE，研究了VEa作为添加剂对南美白对虾生长性能、虾体成分及抗氧化能力的影响。

3.1 新型VEa对南美白对虾生长性能的影响

试验结果显示：当饲料中添加含量为160 IU/kg的VEa，与VE200正对照组相比较，其平均饲料系数降低2.3%；而存活率升高(为100%)，虽不显著（P＞0.05），但有积极作用；而VEa300组（过量大约一倍）的饲料系数最高，而存活率为87.78%（P＞0.05）。6个VEa组的虾肝胰指数及虾的肥满度均与正对照组无显著差异。由此可知，用VEa160 IU/kg可以取代常规VE200 IU/kg作为南美白对虾饲料添加剂，不但用量减少了20%，而且饲料系数稍有下降，对虾成活率有所上升，其各项生长性能指标无明显差异。而等量或过量添加VEa对对虾生长无益处。

3.2 新型VEa对南美白对虾体成分的影响

虾摄食饲料后即对营养物质进行消化吸收，将其转化为自身组成成分。本试验结果显示：与VE200(+)组比较，6个VEa组的粗蛋白质及粗脂肪含量无显著差异，但VEa各组的铬元素含量均偏低（低34%～73%），其作用机理有待研究；VEa160组铁含量高出42%，VEa80组锰含量高出35%，其作用机理尚待研究；各组对虾体内其它化学元素的影响不明显。

3.3 新型VEa对南美白对虾免疫、生物学活性及抗氧化能力的影响

酸性磷酸酶和碱性磷酸酶是巨噬细胞溶酶体的标志酶，是参与动物体内免疫活动重要的水解酶，在体内直接参与磷酸基团的转移与代谢[13-14]。本试验结果显示：与VE200(+)正对照组比较，VEa80组的虾血浆中ACP活性显著增加（P＜0.05）、AKP活性有所增加（P＞0.05）、各组对虾肝脏中ACP活性无明显影响。

自由基为机体新陈代谢产物，正常情况下其与机体营养状况保持动态平衡，若该平衡破坏则体内自由基过多，即会引起体内脂质过氧化损伤。体内清除自由基的抗氧化酶T-SOD是一种金属酶，能有效地清除超氧阴离子自由基，保护细胞免受攻击，其含量反映出机体的抗氧化状态。与之相反，血清脂质过氧化代谢终产MDA的高低，间接反映了机体细胞受自由基攻击的严重程度，其值越高，细胞氧化损伤越严重。与VE200(+)组相比较，VEa160组及VEa200组对虾肝胰腺的总超氧化物歧化酶T-SOD活性增加了13.4%、24.2%，差异显著(P＜0.05)，而加大VEa剂量到300 IU/kg，其T-SOD活性显著降低21.1%(P＜0.05)、相应的VEa160及VEa200组对虾肝胰腺过氧化脂质降解产物含量减少，但差异不明显（P＞0.05）。综上所述，添加低剂量VEa80 IU/kg取代VE200 IU/kg，降低用量60%，就可明显增加对虾生物的酶活性，而高剂量添加（VEa250、VEa300组）反而使免疫及生物酶活性降低。