血清nesfatin-1 与非酒精性脂肪性肝病的相关性研究

郭 伟，高明松，彭 聪，谭 燚，李 伟

武汉市第一医院内分泌科，湖北 武汉430022

nesfatin-1 作为近年新发现的一种摄食调节肽，与能量代谢关系密切，与肥胖有着重要的联系。非酒精性脂肪性肝病(nonalcoholic fatty liver disease，NAFLD)是我国仅次于慢性病毒性肝炎的第二大肝病［1］，肥胖是NAFLD 的独立危险因素［2］，约75%肥胖患者患有NAFLD［3］。胰岛素抵抗是肥胖、NAFLD、2 型糖尿病的共同病理生理基础［4-6］。有研究表明，nesfatin-1 可能通过影响摄食行为及摄食相关激素参与了肥胖糖尿病患者的病理生理过程［7］，但是nesfatin-1 与NAFLD 的相关性研究未见报道。本研究旨在探讨nesfatin-1 与NAFLD 的相关性，为临床防治NAFLD 提供新的思路。

1 资料与方法

1.1 一般资料 选取2011 年5 月-2013 年5 月在武汉市第一医院就诊的NAFLD 患者60 例。男39 例，女21 例，年龄40 ～75 岁，平均年龄(57.6 ±8.9)岁，其中合并血脂异常18 例，冠心病2 例。冠心病患者心电图为轻度ST-T 改变，心功能Ⅰ级。选取60 名健康体检者作为对照组，男38 例，女22 例，年龄40 ～75 岁，平均年龄(58.2 ±8.4)岁，排除高血压、糖尿病、高脂血症、肝肾功能异常者，2 周内无服药史。两组性别、年龄比较，差异均无统计学意义(P ＞0.05)，具有可比性。所有患者均为初诊，未接受任何治疗措施，包括饮食、运动及调脂药物治疗。

1.2 纳入及排除标准 纳入标准:均符合2010 年中华医学会肝脏病学分会《非酒精性脂肪性肝病诊疗指南(修订版)》的临床诊断标准［8］。排除标准:除外病毒性肝炎、药物性肝病、全胃肠外营养、肝豆状核变性、自身免疫性肝病等可导致脂肪肝的特定疾病、炎症性肠病、甲状腺功能减退症、库欣综合征、β 脂蛋白缺乏血症及一些与胰岛素抵抗(insulin resistance，IR)相关的综合征(脂质萎缩性糖尿病、Mauriac 综合征)等可导致脂肪肝的特殊情况;过量酒精摄入者(饮酒量折合乙醇量:男性＞140 g/周，女性＞70 g/周);心、肝、肾等主要器官及系统严重受损或功能障碍患者;合并糖代谢紊乱(包括糖尿病、空腹血糖受损)、高血压、循环、呼吸、血液系统等内科基础疾病患者;妊娠期、哺乳期妇女;精神病患者。

1.3 方法 测量所有受试者的身高、体质量、腰围、臀围等，计算体质量指数(BMI)、腰臀比(WHR);所有受试者均隔夜空腹12 h，清晨静脉采血5 ml，用于测空腹血糖(fasting blood glucose，FBG)、甘油三酯(triglycerides，TG)、胆固醇(cholesterol，TC)、低密度脂蛋白(low density lipoprotein，LDL)、高密度脂蛋白(high density lipoprotein，HDL)、空腹胰岛素(fasting insulin，FIN)、nesfatin-1。FBG 测定采用氧化酶法(试剂盒购自上海科华生物工程股份有限公司)。TG、TC、LDL、HDL 采用酶比色法(TG、TC 试剂盒购自宁波瑞源生物科技有限公司，LDL、HDL 试剂盒购自积水医疗株式会社)。FBG、TG、TC、LDL、HDL 采用美国贝克曼公司的AU2700 生化分析仪进行检查。FIN 测定采用电化学发光法(试剂盒购自德国罗氏诊断有限公司)，采用美国罗氏公司C601 电化学发光分析仪进行检查。nesfatin-1 采用酶联免疫吸附法(ELISA 法)测定(试剂盒购自美国Phoenix Pharmaceuticals 公司)。IR 的评估采用稳态模型胰岛素抵抗指数(HOMA-IR)，HOMA-IR=FBG×FIN/22.5。

1.4 统计学处理 采用SPSS 16.0 统计软件进行处理。计量资料以s 表示，非正态分布数据取自然对数后进行统计分析。计数资料比较采用χ2检验。相关性采用Pearson 相关分析和多元线性逐步回归分析。P ＜0.05 为差异有统计学意义。

2 结果

2.1 两组一般资料及生化指标比较 对照组和NAFLD 组性别、年龄比较，差异无统计学意义(P ＞0.05)。NAFLD 组患者的BMI、WHR、LDL、TC、TG、FBG、FIN、HOMA-IR 均高于正常对照组(P ＜0.05)，而HDL、nesfatin-1 低于正常对照组(P ＜0. 05，见表1)。

2.2 两组nesfatin-1 水平协方差分析 采用协方差分析进一步了解NAFLD 组、对照组nesfatin-1 水平的差异是否独立于其他危险因素，校正年龄、BMI、WHR、TG、TC、FBG、HDL、LDL、FIN、HOMA-IR 后，两组间nesfatin-1 水平的差异仍具有统计学意义(P ＜0.01，见表2)。

表1 两组一般资料及生化指标比较(s)Tab 1 Comparison of general datas and biochemical indexes between two groups(s)

表1 两组一般资料及生化指标比较(s)Tab 1 Comparison of general datas and biochemical indexes between two groups(s)

NAFLD 组 对照组 P值47.3 ±2.74 48.53 ±5.06 0.100性别(男/女) 37/23 39/21 0.705 BMI 29.13 ±10.15 22.17 ±5.97 0.000 WHR 0.91 ±0.42 0.78 ±0.20 0.042 FBG 5.72 ±2.54 4.78 ±1.28 0.012 FIN 21.04 ±6.60 18.22 ±6.09 0.017 HOMA-IR 3.07 ±0.94 2.15 ±0.17 0.000 TG 2.93 ±0.89 2.08 ±0.81 0.000 TC 4.80 ±2.05 4.07 ±1.70 0.036 HDL 1.05 ±0.48 1.34 ±0.67 0.008 LDL 3.24 ±0.23 3.06 ±0.59 0.038年龄(岁)nesfatin-1 1.15 ±0.31 1.91 ±0.61 0.000

表2 两组nesfatin-1 水平协方差分析Tab 2 Covariance analysis of nesfatin-1 between two groups

2.3 nesfatin-1 与NAFLD 的多元逐步回归分析 采用多元逐步回归分析，以是否患脂肪肝为应变量，以年龄、BMI、WHR、TG、TC、FBG、HDL、LDL、HOMA-IR、nesfatin-1 为自变量建立回归模型，进行多元逐步回归分析，结果提示，nesfatin-1 水平下降是NAFLD 的独立危险因素(OR=1.426，P ＜0.01，见表3)。

表3 nesfatin-1 与NAFLD 的多元逐步回归分析Tab 3 Multiple stepwise regression analysis of nesfatin-1 and NAFLD

3 讨论

NAFLD 是肝细胞脂肪变性为主的临床病理综合征，其发病机制尚未完全明确。目前认为启动因素是IR、游离脂肪酸增加引起的糖脂代谢紊乱，在此基础上发生氧化应激和脂质过氧化反应，造成肝细胞损伤和炎症反应。治疗的重点在于阻止疾病的进展，祛除引起代谢综合征的危险因素，如肥胖、IR 及血脂紊乱等。而肥胖、IR 及血脂紊乱均与摄食及能量消耗密切相关。

nesfatin-1 是2006 年由Goebel-Stengel 等［9］首次发现，是一种由82 个氨基酸构成的神经多肽，可不依赖瘦素途径抑制实验动物的摄食，激活NTS 的POMC 和CART 神经元，广泛分布于外周脂肪组织、心肌、胃肠道、胰腺和睾丸等部位，对过度摄食、心血管功能、生殖功能、胃肠道功能及胰岛素分泌等方面的神经及内分泌调节起一定作用。国内外很多实验提示［10-11］，nesfatin-1 可能从中枢和外周水平，通过不同的信号机制经由Ca2+触发神经兴奋而抑食，并通过延缓胃排空模拟胃扩张刺激等途径间接调节摄食而改善肥胖。然而，其抑食的具体通路及各通路之间的联系尚不明确。因此，nesfatin-1 的研究对肥胖、糖尿病、NAFLD 等疾病的临床治疗有重要意义。

本研究中，NAFLD 组nesfatin-1 水平较对照组明显下降，nesfatin-1 水平下降是NAFLD 的独立危险因素，这和Basar 等［12］的研究结果一致。这一结果产生的具体机制目前尚不清楚，我们推测NAFLD 患者可能存在nesfatin-1 分泌不足、摄食过多及体质量增加，从而导致能量平衡紊乱。

本研究结果显示，血清nesfatin-1 水平与NAFLD有密切关系，为NAFLD 的发病机制及治疗研究提供了一个新的思路和靶点。但nesfatin-1 在NAFLD 发病过程中的具体机制，如nesfatin-1 在胰岛素信号通路中的作用及与其他脂肪细胞因子的相互影响等尚需更深入的研究。

［1］ Williams R. Global challenges in liver disease ［J］. Hepatology，2006，44(3):521-526.

［2］ Fabbrini E，Sullivnan S，Klein S. Obesity and nonalcoholic fatty liver disease:biocheimical，metabolic，and clinical implications ［J］.Hepatology，2010，51(2):679-689.

［3］ Li QX，Zhang Y，Zhu XL. Clinical feature of non-alcoholic fatty liver disease in non-obese essential hypertension and and risk factor［J］.Chin J Diffic and Compl Cas，2013，12 (2):101-103.李庆祥，张莹，朱小玲. 非肥胖型原发性高血压患者非酒精性脂肪性肝病的临床特点及危险因素分析［J］. 疑难病杂志，2013，12(2):101-103.

［4］ Li JY，Liu ZZ，Zheng LL. Discussion of the trigger mechanism on inflammatory reaction with nonalcoholic fatty liver disease［J］. Chin J Diffic and Compl Cas，2013，12(6):478-480.李婕一，刘真真，郑丽丽. 非酒精性脂肪性肝炎的炎性反应触发机制探讨［J］. 疑难病杂志，2013，12(6):478-480.

［5］ Mirza MS. Obesity，visceral fat，and NAFLD:Querying the role of adipokines in the progression of nonalcoholic fatty liver disease［J］. ISRN Gastroenterol，2011，28(8):592-599.

［6］ Yang W，Li Y，Feng M. Relationship between insulin resistance and serum resistin in the elderly type 2 diabetes with nonalcoholic fatty liver disease［J］. Chin J Diffic and Compl Cas，2013，12(4):308-309.杨伟，李耘，冯明. 老年2 型糖尿病伴非酒精性脂肪肝患者胰岛素抵抗与血清抵抗素关系［J］. 疑难病杂志，2013，12(4):308-309.

［7］ Xu LP，Cheng XB，Lu Y，et al. The association of serum nesfatin-1 in obesity and type 2 diabetes［J］. Chin J Diabetes，2012，20(5):329-331.许丽萍，成兴波，鲁燕，等. 血清Nesfatin-l 水平与肥胖和2 型糖尿病的相关性研究［J］. 中国糖尿病杂志，2012，20(5):329-331.

［8］ Fatty Liver and Alcoholic Liver Disease Study Group of Chinese Liver Disease Association. Diagnostic criteria of nonalcoholic fatty liver disease［J］. Chin J Hepatol，2010，18(3):163-166.中华医学会肝脏病学分会脂肪肝和酒精性肝病学组. 非酒精性脂肪性肝病诊断标准［J］.中华肝脏病杂志，2010，18(3):163-166.

［9］ Goebel-Stengel M，Wang L，Stengel A，et al. Localization of nesfatin-1 neurons in the mouse brain and functional implication［J］. Brain Res，2011，17(6):20-34.

［10］ Gantulga D，Maejima Y，Nakata M，et al. Glucose and insulin induce Ca2 + signaling in nesfatin-1 neurons in the hypothalamic paraventricular nucleus［J］. Biochem Biophys Res Commum，2012，20(4):811-815.

［11］ Stengel A，Goebel M，Wang L，et al. Central nesfatin-1 reduces dark-phase food intake and gastric emptying in rats:differential role of corticotrophin-releasing factors 2 receptor［J］. Endocrinology，2009，150(11):4911-4919.

［12］ Basar O，Akbal E，Köklü S，et al. A novel appetide，nesfatin-1 in patients with non-alcoholic fatty liver disease［J］. Scand J Clin Lab Invest，2012，72(6):479-483.