某猪场4种猪病毒性疫病抗体水平检测及分析

韦冠东，汤德元，曾智勇，王洪光，李 达

（贵州大学动物科学学院，贵州 贵阳 550025）

某猪场4种猪病毒性疫病抗体水平检测及分析

韦冠东，汤德元*，曾智勇，王洪光，李 达

（贵州大学动物科学学院，贵州 贵阳 550025）

为了解贵州省某规模化猪场4种猪常见病毒性疫病的抗体水平及感染情况，实验采用ELISA抗体检测法，对该猪场送检的370份血清进行了CSFV、PRRSV、PCV2和PRV 4种抗体水平检测。实验结果表明：该猪场种猪CSFV、PRRSV、PCV2和PRV 抗体阳性率分别为100%、94.74%、100%、5.26%，保育猪CSFV、PRRSV、PCV2和PRV 抗体阳性率分别为94.44%、83.33%、16.7%、5.56%；其中种猪CSF、PRRS、PCV2、PR已接种疫苗；保育猪CSF、PRRS、PR已接种疫苗，未接种PCV2疫苗，上述数据说明该猪场种猪CSF、PCV2、PRRS、PR免疫效果较好；保育猪CSF、PRRS、PR免疫效果较好，PCV2有野毒感染现象。该猪场种猪应在保育猪阶段做好PCV2的预防接种工作，同时做好猪场的疫病净化措施。

猪场；病毒性疫病；ELISA；检测

近年来，贵州省养猪业的规模化、集约化进程发展迅速，猪场猪的流动和引种工作较过去更加频繁，而规模化猪场母猪发生繁殖障碍性疾病的现象日益突出，给养猪业带来了严重的经济损失。据相关报道，猪繁殖障碍性疾病严重影响养猪业的经济效益，在规模化猪场中的发病率达15%～35%，已成为猪场中最重要的疾病之一[1]。猪繁殖障碍性疾病主要由营养、管理等非传染因素和病毒、细菌、寄生虫等传染因素独立或相互作用而引起。其中病毒性疫病因素，如猪瘟病毒(CSFV)、猪繁殖与呼吸综合征病毒(PRRSV)、猪圆环病毒II型(PCV2)、猪伪狂犬病毒(PRV)等是引起母猪繁殖障碍性疾病的主要原因[2-3]。本试验对贵州省某规模化猪场送检的370份血清样本，应用间接ELISA方法对上述4种病毒性疫病进行了抗体检测：结果表明该猪场种猪CSF、PCV2、PRRS和PR免疫效果较好；保育猪CSF、PRRS、PR免疫效果较好，PCV2有野毒感染现象。上述数据说明该猪场保育猪应做好PCV2的预防接种工作，同时做好猪场的疫病净化措施。

表1 猪群4种疫病抗体水平的检测

1 材料与方法

1.1 材料

1.1.1 血清样品

2015年3月贵州省某规模化猪场送检的370份血清样本，其中种猪190份，保育猪180份。

1.1.2 主要试剂

猪瘟病毒ELISA诊断试剂盒(批号：150202)、猪繁殖与呼吸综合征病毒ELISA诊断试剂盒(批号：140302)、猪圆环病毒II型ELISA诊断试剂盒(批号：140302)、猪伪狂犬病毒gE蛋白ELISA诊断试剂盒(批号：150101)，均购自武汉科前动物制品有限责任公司。

表2 种猪4种疫病抗体水平的检测

表3 保育猪4种疫病抗体水平的检测

1.2 检测方法

离心分离血清前将血液样本放置于37 ℃恒温箱中作用1～1.5 h后，转移至4 ℃冰箱过夜，在室温下3 000 r/ min离心5 min，收集血清于EP管中，标记后按照4种猪病毒病ELISA试剂盒操作步骤进行抗体水平检测并进行分析。

2 结果与分析

2.1 ELISA检测抗体水平总结果

CSF、 PRRS、 PCV2和PR 4种病毒性疫病抗体水平检测结果见表1。

从表1中可以看出，CSFV、PRSSV、PCV2和PRV的抗体阳性率分别为97.30%（360/370）、89.19（330/370）、59.73%（221/370）、5.41%（20/370）。由于该猪场种猪和保育猪都接种了CSF、PRSS疫苗，因此该猪场这2种疫病的抗体合格率达到了《2014年国家动物疫病强制免疫计划》存栏猪抗体合格率≥70%的要求，且免疫效果均较为理想；由于该规模化猪场给种猪、保育猪接种gE基因缺失的PRV疫苗，经猪伪狂犬病病毒gE蛋白ELISA抗体检测试剂盒检测，阳性率为5.41%。该数据说明野毒感染率为5.41%，免疫效果较理想；该猪场保育猪未接种PCV2，致使PCV2的抗体阳性率为59.73%，表明该猪场很可能受到PCV2的野毒感染。

2.2 种猪群4种抗体水平检测结果

CSF、PRSS、PCV2和PR 4种病毒性疫病在种猪群的检测的抗体水平结果见表2。

由于该猪场种猪免疫接种CSF、PRSS、PCV2和PRVgE基因缺失疫苗，对猪场送检的免疫猪群血清抗体ELISA检测结果显示，种猪CSFV、PRSSV、PCV2的抗体阳性率为100%（190/190）、94.74%（180/190）、100%（190/190），免疫情况较理想，均达到了农业部《2014年国家动物疫病强制免疫计划》抗体合格率≥70%的规定。种猪接种免疫PRVgE基因缺失疫苗，猪伪狂犬病病毒gE蛋白ELISA抗体检测试剂盒检测PRV的阳性率为5.26%（10/190），免疫效果较理想。

2.3 保育猪群4种抗体水平检测结果

CSF、PRSSV、PCV2和PR 4种病毒性疫病在保育猪群检测的抗体水平结果见表3。

由于该猪场保育猪免疫接种过CSF、PRSS、PRVgE基 因 缺 失 疫苗，对猪场送检的免疫猪群血清抗体ELISA检测结果显示，保育猪CSF和PRSSV的抗体阳性率分别为94.44%（170/180）、83.3%（150/180），免疫情况较理想，均达到了农业部《2014年国家动物疫病强制免疫计划》抗体合格率≥70%的规定。保育猪接种免疫PRVgE基因缺失疫苗，猪伪狂犬病病毒gE蛋白ELISA抗体检测试剂盒检测PRV的阳性率为5.56%（10/180），免疫效果较理想。该猪场保育猪由于未接种免疫PCV2疫苗，抗体水平检测PCV2的阳性率为16.7%（30/180），可能为PCV2的野毒感染，应引起重视。

3 结论与讨论

检测结果表明，该猪场种猪CSF、PRSS、PCV2和PRV的防控因接种了疫苗，其抗体阳性率均达到国家免疫要求，免疫效果较理想；但猪伪狂犬病病毒gE蛋白ELISA抗体检测试剂盒检测结果表明有5.26%的种猪有野毒感染，建议该猪场淘汰有野毒感染的种猪，做好PR的净化工作。该猪场保育猪疫苗接种了CSF、PRSS和PR疫苗，其抗体阳性率均达到国家免疫要求，免疫效果较理想；但猪伪狂犬病病毒gE蛋白ELISA抗体检测试剂盒检测结果表明有5.56%的保育猪有野毒感染，建议该猪场淘汰有野毒感染的保育猪，做好PR的净化工作；未接种PCV2疫苗的保育猪抗体阳性检测率为16.7%，存在野毒感染，建议该猪场做好PCV2的防控工作，同时采取措施对猪群进行净化。

国内规模化猪场PCV2感染的血清学调查结果显示，国内猪场中普遍存在PCV2野毒感染。本次检测结果表明，该猪场中也存在PCV2野毒感染。PCV2主要干扰和破坏机体抗体的产生和维持，从而破坏猪的免疫系统，致使猪群抵抗力下降，易继发或并发其他疾病。目前认为接种疫苗是防制PCV2野毒感染的最好方法。大量的试验己证实，接种免疫PCV2疫苗的猪群发病率和死亡率明显降低，且饲料转化率、胴体品质等明显优于未接种PCV2疫苗的猪群。

鉴于该猪场的设施及环境，笔者建议该猪场应制定免疫前抗体水平的检测和免疫后抗体水平的监测，从而可通过病原检测或抗体监测淘汰亚临床感染或隐形感染猪群，以期净化猪场的相关疫病。由于血清学检测不能准确说明机体病原的感染现状，对于该猪场的疫病情况应结合流行病学、临诊症状、病原学及PCR等检测技术，以期提高检测的准确性，为猪场疫病的防控提供重要依据。此外，还应注重加强饲养管理，做好消毒，灭鼠等工作和建立完善的免疫程序，从而为有效控制和逐步净化猪繁殖障碍性疫病提供有力的保障。

[1] 李永志.影响猪繁殖障碍的因素及防治措施[J].中国畜禽种业，2009(11)：58-59.

[2] 蒋春燕，何海健，叶秀娟，等.集约化猪场主要疾病及防控对策[J].动物医学进展，2012，33(8)：101-104.

[3] 刘建，汤德元，罗险峰，等.规模化猪场主要病毒性疫病的诊断技术研究进展[J].中国动物保健，2012，14 (1)：18-24.

2015-04-30）

韦冠东（1990-），男，硕士研究生，主要从事动物传染病病原分子生物学的科研学习。

*通讯作者：汤德元（1964-），男，教授，博士，硕士生导师，主要从事动物传染病病原分子生物学和中西兽医结合的教学科研工作。E-mail: tdyuan@163.com