紫锥菊复方对猪呼吸繁殖障碍综合征疫苗免疫效果的影响

马少朋，李婷婷，姚维平，高桂生，史秋梅* ，张艳英，高光平(．河北省辛集市畜牧局，河北辛集 0560;．河北省滦南县畜牧服务中心，河北滦南 06500;．河北省抚宁县畜牧水产局，河北抚宁 06600;．河北科技师范学院动物科技学院，河北省预防兽医学重点实验室，河北昌黎 066600)

现代医学研究发现紫锥菊多糖和黄芪多糖具有免疫调节作用，能够提高机体的特异性和非特异性免疫功能，它能提高淋巴细胞的转化率、提高机体对抗原的免疫应答能力［1－4］。根据2种多糖能增强小鼠和鸡等动物免疫功能的研究报道［5－8］，针对仔猪消化吸收能力差、抗病力低、易腹泻等特点，笔者制备了2种中药组成的方剂——紫锥菊复方，用不同剂量的紫锥菊复方饲喂仔猪后，检测仔猪外周血淋巴细胞的转化率以及猪呼吸繁殖障碍综合征疫苗的抗体水平，来探讨紫锥菊复方对仔猪的免疫功能的影响，以期为其今后临床应用提供理论依据。

1 材料与方法

1．1 中草药与试验试剂 紫锥菊、黄芪等均购自秦皇岛市百草堂大药房。上海快灵牌胶体金试纸条，用于猪繁殖呼吸障碍综合征抗体效价测定。

1．2 试验动物 80头杜×长×大三元杂交仔猪，由秦皇岛市某种猪场提供。

1．3 复方中药制剂的制备 清洗除去杂质，筛选出不合格的或混入的非中药成分，除去灰尘，湿润中药原料。药物浸泡3 h，水提3次(每次10倍量水，煎煮1 h)，经过滤过－浓缩－喷雾干燥－分装的流程制成颗粒状制剂(1 g生药提取中药制剂 0．24 g)。

1．4 试验动物分组及处理 选取临床检查健康的15日龄左右杜长大三元杂交仔猪80头，按照性别和体重随机分为4组(对照组、1．5%复方中药制剂组、1．0%复方中药制剂组和0．5%复方中药制剂组)，每组20头。

1．5 淋巴细胞转化试验 淋巴细胞转化试验采用形态学检查法，应用非特异性有丝分裂原植物血凝素(PHA)作为刺激物，具体操作参照何昭阳等［9］方法进行。

1．6 猪繁殖呼吸障碍综合征抗体水平的测定 健康仔猪在20日龄、50日龄免疫猪呼吸繁殖障碍综合征疫苗，分别在20、30、40、50、60、70、80 日龄每组随机选取10 头仔猪，于前腔静脉采集全血3 ml，3 000 r/min离心15 min，分离血清，－20℃冰箱中保存，使用胶体金试纸条按照检测试剂盒说明书进行抗体检测。

1．7 数据处理 利用SPSS 11．3GLM程序对试验数据进行统计分析。

2 结果与分析

2．1 对仔猪T淋巴细胞转化率的影响 由表1可知，在20、30日龄，4组断奶仔猪T淋巴细胞转化率差异均不显著(P＞0．05);在40、50日龄，与对照组相比，0．5%复方中药制剂组仔猪T淋巴细胞转化率分别提高20．48%和19．19%(P＜0．01)，1．0% 复方中药制剂组分别提高 13．34% 和 20．19%(P ＜ 0．01)，1．5% 复方中药制剂组分别提高 16．79% 和18．47%(P＜0．01);80日龄，与对照组相比1．5%复方中药 制剂组仔猪T淋巴细胞转化率提高13．36%(P＜0．01)。

表1 紫锥菊复方对仔猪T淋巴细胞转化率的影响

2．2 猪繁殖呼吸障碍综合征抗体效价 从表2可以看出，免疫合格猪所占比例在60日龄(二免)以后开始升高，达到合格水平(1∶16)，因此新生仔猪20日龄免疫1次后，应至少在45～50日龄加强免疫1次，二免后仔猪抗体水平均能达到合格以上，在免疫前后饲料中添加紫锥菊复方效果较好，以1%复方中药制剂组能促进其产生较好免疫力，70～90日龄以后，中和抗体效价与对照组比能提高2．0～2．1 log2。

该试验结果表明，猪繁殖呼吸障碍综合征疫苗接种后，1．5%复方中药制剂组添加紫锥菊复方混饮给药，可以显著提高疫苗免疫的中和抗体水平，与对照组差异显著(P＜0．05)。试验组抗体产生快，持续时间长，说明紫锥菊复方对猪繁殖呼吸障碍综合征抗体产生具有明显的促进作用，可有效地提高猪的体液免疫作用。

表2 紫锥菊复方对猪繁殖呼吸障碍综合征疫苗抗体效价的影响

3 讨论

T淋巴细胞在细胞免疫中起主要作用，当其受到PHA等刺激后，可转化为体积较大的淋巴母细胞，可释放多种细胞因子，参与细胞免疫反应。淋巴细胞转化试验结果表明，仔猪外周血淋巴细胞转化率，在试验开始时各组与对照组差异均不显著;40日龄，1．0%复方中药制剂和1．5%复方中药制剂组显著和极显著高于对照组，0．5%复方中药制剂组与对照组差异不显著;在50日龄，1．0%复方中药制剂组和1．5%复方中药制剂组显著高于对照组，0．5%复方中药制剂组与对照组差异不显著。这表明一定剂量的紫锥菊复方能提高仔猪淋巴细胞的转化率，增强仔猪的细胞免疫功能。对猪繁殖呼吸障碍综合征疫苗接种后抗体水平检测结果表明，在试验开始时各组仔猪抗体水平差异不显著，50和70日龄各试验组猪繁殖呼吸障碍综合征抗体水平均极显著高于对照组。在相同日龄条件下，各试验组抗体水平均随紫锥菊复方应用剂量的增加而呈上升趋势。由此可见，应用一定剂量的紫锥菊复方能够提高猪繁殖呼吸障碍综合征疫苗的抗体水平，表明紫锥菊复方对仔猪的体液免疫功能具有一定的促进作用。江和基等［10］饲料中添加玉屏风散提高仔猪免疫球蛋白含量和免疫细胞中CD4(T辅助细胞)和CD8(T抑制细胞)的比例，增加血清的补体、IL-2、γ-干扰素等成分，在一定程度上提高猪体内非特异性免疫水平，增强猪体的抵抗力，有利于断奶仔猪的生长发育。刘建成等［11］和马玉芳等［12］也证实了在仔猪、生长肥育猪的饲料中添加一定量的中药添加剂，具有改善猪的生长性能和提高机体免疫功能的作用。这表明在饲料中添加一定量的中草药添加剂对猪的生产性能和免疫功能有改善作用。

笔者通过对仔猪外周血淋巴细胞转化率、猪繁殖呼吸障碍综合征抗体水平等免疫指标的检测，初步探讨了紫锥菊复方对仔猪非特异性免疫功能、体液免疫功能的影响，为进一步研究紫锥菊复方对猪免疫功能的影响奠定了基础。

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