江西野生白花凤仙花组培快繁技术研究

廖忠明，李丹丹，张付远，钟晓红，刘良源

(1.江西环境工程职业学院，江西赣州341000;2.江西省林业有害生物防治检疫局，江西南昌330077)

白花凤仙花(White Impatiens balsamina)原记载特产四川峨眉山，生于海拔1 000 m以下沟边或小溪边潮湿草地。凤仙花科仅有水角属(Hydrocera BI)和凤仙花属(Impatiens L)2个属，全世界有900余种。主要分布于亚洲热带和亚热带及非洲，少数种在欧洲，亚洲温带地区及北美洲也有分布。水角属为单种属，产于印度和东南亚，凤仙花属是本科中最大的属。我国2属均产，已知有220余种［1］。

2012年江西省科技支撑计划项目“野凤仙分子生物学研究与市场开发”(20112BBF60048)课题组在江西省宜春市铜鼓县大沩山实地考察时发现一种凤仙花属植物，并拍摄生境，采回标本，经查对确认为白花凤仙花［2］，该种在此以前尚未有报道，系江西新记录。其植株紧密，花朵大，颜色鲜艳，生长快且整齐，珍稀奇特，适合盆栽及绿化使用。由于种质资源较少，致使生产受到制约;同时常规的栽培方式易引起植物种质退化，繁殖系数降低及感染病毒、病害等问题。而组培快繁具有提高苗木质量，使品种纯化，繁殖系数高，繁殖速度快等优点。笔者通过对江西野生白花凤仙花组培快繁研究，以期为江西野生白花凤仙花种质资源保存和优质种苗的工厂化生产提供技术参考。

1 材料与方法

1.1 试验材料 将江西省宜春市铜鼓县大沩山野生白花凤仙花移植至江西环境工程职业学院温室内，待其长出新枝后，剪去带有顶芽和腋芽的茎段，去掉叶片，先用自来水冲洗40 min，再用洗洁精清洗表面浮尘。在无菌条件下用75%乙醇消毒10 s，无菌水冲洗2次，0.1%氯化汞消毒3～5 min，再用无菌水冲洗5次。将处理好的材料切成约2cm并带有1个芽的茎段接种到预先配制好的培养基上进行培养。

1.2 试验方法

1.2.1 不同基本培养基对江西野生白花凤仙花诱导和生根的影响。将灭菌好的带有顶芽和腋芽的白花凤仙花茎段接种到不同基本培养基内，基本培养基分别为MS、1/2MS、1/4MS，琼脂0.7%，白砂糖 2.5%，附加激素，pH 5.8 左右，121℃高温灭菌20 min。培养温度(25±2)℃，光照1 500～2 000 lx，光照时间 8 h/d。

1.2.2 不同浓度激素对江西野生白花凤仙花诱导分化的影响。将灭菌好的带有顶芽和腋芽的白花凤仙花茎段接种到诱导培养基内，培养基为 MS+6-BA 2.0～4.0 mg/L+NAA 0.3 ～0.8 mg/L，琼脂 0.7%，白砂糖 2.5%，pH 5.8 左右，121℃高温灭菌20 min。培养条件同“1.2.1”。通过改变6-BA和NAA的浓度，共为6个处理(每个处理接种3瓶，每瓶接种5个芽)，筛选最佳的诱导分化培养基配方。

1.2.3 不同浓度激素对江西野生白花凤仙花生根的影响。不定芽伸长至3～5 cm时，自基部切下，接种到生根培养基上，培养基为 MS+NAA 0.1 ～2.0 mg/L+IBA 0.2 ～0.6 mg/L，培养基均加入琼脂粉0.7%，pH6.0左右，共设8个处理，每处理接种15瓶，每瓶接种15株，培养条件同“1.2.1”，以筛选最佳的生根培养基。

1.3 统计标准 分化率=分化茎段数/接种段数×100%

增殖倍数=分化不定芽数量/接种数

生根率=生根苗数/接种段数×100%

2 结果与分析

2.1 不同培养基对江西野生白花凤仙花诱导分化和生根的影响 由表1可知，以MS培养基诱导效果最佳，1/2MS次之，1/4MS效果最差。芽繁殖倍率:MS培养基最高可达5.02倍，比1/4MS培养基高51.5%。苗的生长高度:MS培养基的苗生长量比1/2MS培养基提高了21.2%，比1/4MS培养基提高了13.0%。根的条数:3种培养基的影响结果差异不明显，因此，使用MS培养基时不宜减量。

2.2 不同浓度激素对江西野生白花凤仙花诱导分化的影响 由表2可知，培养15 d时，7种处理有些开始分化出不定芽，30 d后7个处理中以处理②6-BA 2.0 mg/L+NAA 0.4 mg/L为最佳，分化出的不定芽为丛生状，且多达81个小芽，生长粗壮，分化率达93%，增殖倍数4。其次是处理③6-BA 3.0 mg/L+NAA 0.5 mg/L，不定芽总数 89个，生长粗壮，分化率达100%，增殖倍数5.4，但芽较细弱。表明，芽的诱导和分化与6-BA、NAA浓度有密切关系，一定量的6-BA、NAA对不定芽的诱导和分化有促进作用。

表1 不同培养基对江西野生白花凤仙花诱导分化和生根的影响

表2 不同浓度激素对江西野生白花凤仙花诱导分化的影响

2.3 不同浓度激素对江西野生白花凤仙花生根的影响 由表3可知，培养20 d时，8种处理有些开始分化出不定芽并开始生根，60 d后8个处理中以处理⑦IBA 0.6 mg/L+NAA 1.0 mg/L的效果最佳，生根率最高，根数最多，根长最长，苗和根长势最好，其次是处理⑥IBA 0.6 mg/L+NAA 0.5 mg/L。表明，根的生长和苗的增殖与IBA、NAA浓度有密切关系，IBA、NAA的浓度比例对生根和苗的增殖影响较大。

表3 不同浓度激素对江西野生白花凤仙花生根的影响

3 结论与讨论

该研究结果表明，江西野生白花凤仙花诱导分化与生根的最佳基本培养基为MS培养基;诱导分化效果最佳培养基为 MS+6-BA 2.0 mg/L+NAA 0.4 mg/L，分化出的不定芽为丛生状，且达81个小芽，生长粗壮，分化率达93%，增殖倍数4;生根培养效果最佳培养基为MS+IBA 0.6 mg/L+NAA 1.0 mg/L，生根率最高，根数最多，根长最长，苗和根长势最好。目前对凤仙花的组培研究较少，而白花凤仙花尚未见报道。该试验材料于2012年在江西首次发现，该研究对于该野生资源的保护与利用具有一定的推动作用。

［1］中国科学院中国植物志编辑委员会.中国植物志:第47卷第二分册［M］.北京:科学出版社，2001.

［2］《江西植物志》编辑委员会.江西植物志:第二卷［M］.北京:中国科学技术出版社，2004.