肺腺癌中锌指E-盒结合同源异型盒蛋白-1、-2和增殖细胞核抗原表达及意义

久　太　冯喜英　安文静　刘洪千　(青海大学附属医院呼吸科，青海　西宁　810001)



肺腺癌中锌指E-盒结合同源异型盒蛋白-1、-2和增殖细胞核抗原表达及意义

久太冯喜英安文静刘洪千(青海大学附属医院呼吸科，青海西宁810001)

〔摘要〕目的检测肺腺癌中锌指E-盒结合同源异形盒蛋白(ZEB)-1、ZEB-2和增殖细胞核抗原(PCNA)标记的增殖指数的关系。方法59例肺腺癌患者临床资料及术后蜡块组织作为观察组，同期肺肿物切除后距肿物边缘＞3 cm肿瘤周围正常肺组织59例作为对照组，应用免疫组化方法检测两组中ZEB-1、-2和PCNA的表达。结果两组中ZEB-1、-2和PCNA的阳性率差别显著，观察组中ZEB-1、-2和PCNA表达的阳性率与肿瘤的最大径、肿瘤的胸膜累犯密切相关，PCNA表达的阳性率与淋巴结转移及是否伴有坏死密切相关。观察组中ZEB-1和PCNA的表达呈正相关。结论

肺腺癌术后组织中ZEB-1、-2和PCNA高表达，不仅对肿瘤的形成有重要意义，还可以促进肿瘤的进展，尤其是PCNA高表达可能对肿瘤进展有多种生物学意义。

〔关键词〕肺腺癌;锌指E-盒结合同源异型盒蛋白(ZEB)-1; ZEB-2;增殖细胞核抗原(PCNA);免疫组化

第一作者:久太(1971-)，男，副主任医师，主要从事呼吸系统疾病研究。

肺腺癌目前已超过鳞状细胞癌成为肺癌最常见的组织学亚型，更常见于不吸烟的患者，尤其是女性。肺癌常表达为周围型结节，很少位于中央，也很少形成空洞〔1〕。病变形成过程中，常伴有明显的基因和蛋白表达失调。锌指E-盒结合同源异形盒蛋白(ZEB)-1、-2是非受体细胞核转录因子中的重要成员，异常表达时对肿瘤的形成及进展都有一定促进作用〔2，3〕。增殖细胞核抗原(PCNA)是细胞增殖中重要的标记蛋白，在一定程度上可以客观地反映细胞增殖状态〔4〕。本研究分析ZEB-1、-2在肺腺癌中的表达特征及与PCNA的相关性。

1　资料与方法

1. 1一般资料2012年1月至2014年12月行肺腺癌根治手术的患者59例作为观察组，留取完整临床资料和术后蜡块组织。均经病理医师确诊，并符合国际肺癌研究协会(IASLC)/美国胸科协会(ATS)/欧洲呼吸学会(ERS)国际多学科分类中的标准。男31例，女28例;年龄45～79岁，平均62. 1岁。同期肺肿物切除后距肿物边缘＞3 cm肿瘤周围正常肺组织59例作为对照组，其中男30例，女29例;年龄46～77岁，平均61. 7岁。两组常规资料无明显差别。

1. 2 ZEB-1、-2和PCNA表达的检测ZEB-1、-2和PCNA蛋白的检测应用免疫组化SP法，DAB染色，严格按说明书操作，并由病理科主管技师完成，做好质量控制，减少误差。

1. 3 ZEB-1、-2和PCNA结果的判断标准ZEB-1、-2和PCNA均以细胞核呈现棕黄色为阳性细胞，计数10个上皮细胞集中的区域(×400倍)，计算阳性率，取平均值作为最终结果。以＜25%为阴性，≥25%为阳性。

1. 4统计学方法采用SAS6. 12软件进行χ2检验和线性相关性分析。

2　结果

2. 1两组中ZEB-1、-2和PCNA阳性率的比较观察组中ZEB-1、-2和PCNA阳性率明显高于对照组(P＜0. 000 1)。见表1。

表1　两组中ZEB-1、-2和PCNA阳性表达的比较〔n(%)，n=59〕

2. 2 ZEB-1、-2和PCNA在观察组不同临床特征中的表达观察组中ZEB-1、-2和PCNA表达的阳性率与肿瘤的最大径、肿瘤的胸膜累犯密切相关，PCNA表达的阳性率与淋巴结转移及是否伴有坏死密切相关。见表2。

表2　 ZEB-1、-2和PCNA阳性表达在观察组不同临床特征中的表达比较〔n(%)〕

2. 3观察组中ZEB-1、-2和PCNA的相关性分析观察组中ZEB-1和PCNA的表达呈正相关(r= 0. 51，P= 0. 035 9)，ZEB-2 和PCNA的表达无明显相关性(r=0. 39，P=0. 058 7)。

3　讨论

肺腺癌是指具有腺样分化或有黏液产生的肿瘤，表现为腺泡状、乳头状、细支气管肺泡状，常形成实性巢状结构。肿瘤细胞异型性明显，可伴有明显的浸润性生长。肿瘤形成过程中增殖常活跃，使细胞的异型性和染色质浓集。与预后差相关的参数包括组织学分级高和血管侵犯，核分裂增加、淋巴细胞浸润相对少和广泛的肿瘤坏死也被认为评价预后的指标。ZEB-1、-2是胚胎发育中必需的转录因子〔5，6〕。近来关于ZEB-1、ZEB-2在肿瘤中的研究较多，被认为是与肿瘤生长、增殖及迁移相关的蛋白〔7，8〕。刘亚敏等〔9〕通过对乳腺癌术后组织中ZEB-1的表达进行检测，发现正常乳腺、乳腺增生及导管内癌中ZEB-1均为阴性，而浸润性乳腺癌组织中的ZEB-1表达的阳性率明显增加，认为ZEB-1是与乳腺癌增殖、浸润及淋巴结转移有关的蛋白，其可能对判断患者的预后有一定价值。汪泉〔10〕通过对宫颈鳞状细胞癌中ZEB-2的表达进行检测，发现肿瘤中ZEB-2表达的阳性率明显高于癌旁黏膜组织，且ZEB-2的表达与国际妇产科协会(FIGO)分期、淋巴结转移有明显的相关性。PCNA是近年来发现的与细胞增殖活性有关的指标，作为DNA聚合的辅助蛋白，是DNA复制所必需的，在核内表达量增加预示着细胞进入S期或G1晚期〔11〕。也有研究〔12〕认为PCNA是反映细胞增殖分数和所处周期的客观指标，可以作为判定肿瘤恶性程度及预后。

本实验结果提示ZEB-1、-2和PCNA高表达是促进肿瘤形成的重要因素。ZEB-1、-2和PCNA高表达可以促进肿瘤的生长及对胸膜的侵犯。肿瘤的生长是依靠细胞的增殖，细胞增殖活跃时肿瘤生长快，PCNA表达高的肿瘤生长快，同时ZEB-1、-2表达也升高，提示ZEB-1、-2也是促进肿瘤生长的重要蛋白。本文结果提示PCNA的高表达可以在一定程度上促进肿瘤的淋巴道播散，同时可以使肿瘤在生长过程中出现细胞凝固性坏死，使肿瘤的进展加速。ZEB-1表达升高时可以促进PCNA的高表达，使肿瘤细胞的繁殖加速，这也间接反映了ZEB-1对细胞增殖有明显的调节作用〔13〕。虽然学者们〔9，10〕发现ZEB-1、-2与淋巴结转移有明显相关性，但是本实验显示ZEB-1、-2均与淋巴结转移无明显相关性，这种差异表达可能与器官差异性有关，也可能与样本选择等因素有关。本实验未发现ZEB-2和PCNA的直接关联性，但是结果也显示出了二者可能具有协同作用的趋势，这可能与样本量有关，后续研究可以继续观察ZEB-2和PCNA增殖的关系，以更进一步明确二者的协同作用和相关性。

4参考文献

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7 Schmalhofer O，Brabletz S，Brabletz T. E-cadherin，β-catenin，and ZEB1 in malignant progression of cancer〔J〕．Cancer Metast Rev，2009; 28(1-2): 151-66.

8 Singh AB，Sharma A，Smith JJ，et al．Claudin-1 up-regulates the repressor ZEB-1 to inhibit E-cadherin expression in colon cancer cells〔J〕．Gastroenterology，2011; 141(6): 2140-53.

9刘亚敏，李金枝，张媛媛，等.乳腺癌组织中转录因子ZEB-1的表达及意义〔J〕．临床与实验病理学杂志，2013; 29(6): 594-6.

10汪泉. ZEB-2、E-cad在鳞状宫颈癌细胞的表达与疾病分期的关系〔J〕．上海医药，2014; 35(21): 49-51.

11胡伟国，王春友，刘涛，等. SHH、EGFR和PCNA蛋白在胰腺癌组织中的表达及其意义〔J〕．癌症，2007; 26(9): 947-9.

12李俊，江孝清，周绪红. P73和PCNA的表达与喉鳞状细胞癌的预后〔J〕．临床耳鼻咽喉科杂志，2005; 19(24): 1121-3.

13 Soini Y，Tuhkanen H，Sironen R，et al．Transcription factors zeb1，twist and snai1 in breast carcinoma〔J〕．BMC Cancer，2011; 11(1): 73-4.

〔2014-07-19修回〕

(编辑苑云杰)

〔文章编号〕1005-9202(2015)20-5829-03;

doi:10. 3969/j. issn. 1005-9202. 2015. 20. 070

〔文献标识码〕A

〔中图分类号〕R734