血清DNMT1、DNMT3a、DNMT3b和HDAC1蛋白在肺癌患者中的表达及意义

肖海励　王　静魏海霞　(郑州大学附属郑州中心医院呼吸内科，河南　郑州　450000)



血清DNMT1、DNMT3a、DNMT3b和HDAC1蛋白在肺癌患者中的表达及意义

肖海励王静1魏海霞(郑州大学附属郑州中心医院呼吸内科，河南郑州450000)

〔摘要〕目的探讨血清甲基化转移酶(DNMT)1、DNMT3a、DNMT3b和组蛋白脱乙酰酶(HDAC1)蛋白在肺癌患者中的表达及意义。方法选取2013年2月至2014年10月于该院呼吸内科收治的肺癌患者104例，按其组织学分型分别为鳞癌35例，腺癌39例，其他类型30例，正常对照组选择100例健康志愿者。所有入选者均于清晨休息状态下采集空腹外周静脉血3 ml，采用酶联免疫法测定血清中DNMT1、DNMT3a、DNMT3b和HDAC1的表达。结果实验组患者DNMT1、DNMT3a、DNMT3b和HDAC1的蛋白表达水平均高于对照组(P＜0. 05);各肺癌分型中，患者的DNMT1、DNMT3a、DNMT3b和HDAC1的蛋白表达水平差异小(P＞0. 05);通过Logistic回归分析显示其与肺癌的发生发展关系密切。结论肺癌患者血清DNMT1、DNMT3a、DNMT3b和HDAC1蛋白表达升高，并随着肺癌的发生发展升高，对临床有指导意义，值得临床推广。

〔关键词〕甲基化转移酶;组蛋白脱乙酰酶;肺癌

1郑州大学第一附属医院呼吸内科

第一作者:肖海励(1977-)，男，硕士，主治医师，主要从事呼吸系统疾病及肺癌的研究。

肺癌亦称支气管癌，常见有鳞形细胞癌和腺癌两种〔1，2〕。因至今尚不明确。研究发现，甲基化转移酶(DNMT)1、DNMT3a、DNMT3b和组蛋白脱乙酰酶(HDAC1)的活性异常导致了肿瘤的发生，但其在肺癌发展过程中相关的利害因素研究较少。为了选择合理的治疗方案治疗肺癌，改善其预后。肺癌患者血清DNMT1、DNMT3a、DNMT3b和HDAC1蛋白浓度变化对肺癌的意义。

1　资料与方法

1. 1一般资料选取2013年2月至2014年10月于我院呼吸内科收治的肺癌患者104例，实验组按其组织学分型分别为鳞癌35例，男19例，女16例，年龄(60. 3±10. 7)岁;腺癌39例，男22例，女17例，年龄(57. 8±8. 21)岁;其他类型30例，男17例，女13例，年龄(62. 29±11. 24)岁;正常对照组选择100例健康志愿者，男53例，女47例，年龄(57. 14±9. 33)岁。两组患者的性别组成、年龄、职业等一般资料差异无统计学意义(P＞0. 05)。

1. 2纳入标准肺癌患者入选条件满足《内科学》拟定的肺癌诊断标准，经病理或细胞学证实的初治肺癌，患者均未接受放、化疗和免疫治疗。患者自愿参与本实验，并签署知情同意书。1. 3排除标准排除急慢性感染、肝脏疾病、肾动脉狭窄、心力衰竭、糖尿病、低血容量、多器官功能衰竭及接受过放、化疗的患者。排除不愿意接受调查者和交流有障碍者。

1. 4观察指标及检测方法采集所有入选者均于清晨休息状态下空腹外周静脉血3 ml，分离血清于EP管中，－80℃冰箱冻存。试剂盒北京鼎国生物研究有限公司DNMT1、DNMT3a、DNMT3b和HDAC1试剂盒的说明采用酶联免疫法测定血清中DNMT1、DNMT3a、DNMT3b和HDAC1的表达。

1. 5统计学方法应用SPSS19. 0软件进行t检验、χ2检验及Logistic回归分析。

2　结果

2. 1两组DNMT1、DNMT3a、DNMT3b和HDAC1的蛋白表达水平实验组患者DNMT1〔(24. 89±4. 91)μg/L〕、DNMT3a 〔(598. 14±89. 73)μg/L〕、DNMT3b〔(257. 82±63. 56)μg/L〕和HDAC1〔(451. 12±102. 26)μg/L〕的蛋白表达水平均高于对照组〔(51. 19±6. 43)μg/L，(411. 16±102. 21)μg/L，(128. 34± 37. 74)μg/L，(275. 38±87. 74)μg/L〕(P＜0. 05)。

2. 2各临床分型的肺癌患者DNMT1、DNMT3a、DNMT3b和HDAC1的蛋白表达水平鳞癌患者、腺癌患者以及其他类型的肺癌患者血清DNMT1、DNMT3a、DNMT3b和HDAC1的蛋白表达水平差异小，无统计学意义(P＞0. 05)。见表1。

表1　各临床分型的肺癌患者DNMT1、DNMT3a、DNMT3b和HDAC1的蛋白表达水平(x±s，μg/L)

2. 3相关性分析以血清中DNMT1、DNMT3a、DNMT3b、HDAC1作为因变量，结果表明DNMT1、DNMT3a、DNMT3b、HDAC1与肺癌发生发展呈密切正相关(r = 0. 231 4、0. 142 5、0. 215 2、0. 182 6，均P＜0. 01)。

3　讨论

肺癌是常见的恶性肿瘤。其中鳞形细胞癌约占肺癌的50%，一般发展速度比较缓慢，病程较长，对放射和化学疗法较敏感〔3〕。多数腺癌起源于较小的支气管，发病率比鳞癌低，发病年龄较小，为周围型肺癌，早期一般没有明显的临床症状〔4〕。由于自然环境、医疗费用、工作环境、对疾病的认识不够等原因，许多患者患病后不能及时就医，失去了早期诊断、早期治疗的最佳时期。近50年来肺癌的发病率显著增高〔5〕。根据2010年的卫生统计年鉴显示，2005年肺癌死亡率占我国恶性肿瘤死亡率榜首〔6〕。肺癌病人大多数是男性，男女比例约为4～8∶1，患者年龄大多在40岁以上。鳞癌的5年生存率为15. 3%，腺癌为11. 6%〔7〕。DNMT为DNA甲基化关键酶〔8〕。目前发现的DNMT家族，已经发现了3种有活性的DNMT，即DNMT1、DNMT3a和DNMT3b，其在DNA甲基化及其维持过程中发挥了重要作用〔9〕，几乎可在所有的正常组织中呈共同表达〔10〕。肿瘤患者体内的DNMT1、DNMT3a和DNMT3b蛋白表达均显著增高，并且DNMT1蛋白的高表达提示患者预后不良〔11〕。HDAC1 是1996年由美国哈佛大学发现的第一个组蛋白去乙酰化的酶，具有抑制基因转录的作用〔12〕。DNMT1抑制常氧条件下肿瘤细胞的生长〔13〕，在细胞的分化和周期进展过程中也发挥了重要作用，与DNA结合后会使染色质呈阻抑结构，抑制基因的转录，导致肿瘤发生。

本研究结果证明肺癌患者血清中的DNMT1、DNMT3a、DNMT3b和HDAC1呈高表达，而在其各分型中无差异，并且随着肺癌的发生发展升高，对临床有指导意义，值得临床推广。

4参考文献

1 Chung YG，Ratnam S，Chaillet JR，et al．Abnormal regulation of DNA methyltransferase expression in cloned mouse embryos〔J〕．Boil Report，2003; 69(1): 146-53.

2 Issa JP. Epigenetic variation and human disease〔J〕．J Nutr，2002; 132(8): 2388-92.

3 Scarano MI，Strazzullo M，Matarazzo MR，et al．DNA methylation 40 years later: its role in human health and disease〔J〕．J Cell Physiol，2005; 204(1): 21-35.

4周清华.肺癌基础研究与临床治疗进展〔M〕．北京:科学出版社，1999: 240-2.

5李春海.加强肿瘤生物学标志的研究和评价〔J〕．中华检验医学杂志，2000; 23(1): 6-8.

6刘启明. DNA甲基化转移酶1在非小细胞肺癌中的表达及临床意义〔J〕．实用临床医药杂志，2011; 15(23): 11-4．

7 Robertson KD. DNA methylation and human disease〔J〕．Nat Rev Genet，2005; 6(8): 597-61.

8 Ishihama K，Yamakawa M，Semba S，et al．Expression of HDAC1 and CBP/p300 in human colorectal carcinomas〔J〕．J Clin Pathol，2007; 60(11): 1205-10.

9 Sier CF，Kubben FJ，Ganesh S，et al．Tissue lesels of matrix metalloproteinase MMP-2 and MMP-9 are related to the overall survival of patients with gastric carcinoma〔J〕．Br J Cancer，1996; 74(3): 413-7.

10孙云晖，陈丽，阎红娥，等. HDAC1和DNMT1在非小细胞肺癌中的表达及临床意义〔J〕．黑龙江医药科学，2010; 33(6): 77-8．

11 Xiong Y，Dowdy SC，Xue A，et al．Opposine alterations DNA methyltransferase gene expression in endometrioid and serous endometrial cancer〔J〕．Gynecol Oncol，2005; 96(3): 601-9．

12 Watanabe N，Hizuta A，Tanaka N，et al．Localization of T cell receptor(TCR)-gemma delta+T cells into human colorectal cancer: flow cytometric analysis of TCR-gamma delta expression in tumor-infiltrating lymphocytes〔J〕．Clin Exp Immunol，1995; 102(1): 167-73.

13 Robertson KD. DNA methylation and human disease〔J〕．Nat Rev Genet，2005; 6(8): 597-61.

〔2015-05-11修回〕

(编辑袁左鸣/滕欣航)

通讯作者:王静(1958-)，女，博士，博士生导师，主任医师，主要从事呼吸内科疾病研究。

〔文章编号〕1005-9202(2015)20-5825-02;

doi:10. 3969/j. issn. 1005-9202. 2015. 20. 068

〔文献标识码〕A

〔中图分类号〕R734. 2