明目地黄丸对糖尿病大鼠视网膜氧化损伤的保护作用

2015-12-15南阳医学高等专科学校临床医学系河南南阳473000

中国老年学杂志 2015年20期

李　斐　(南阳医学高等专科学校临床医学系，河南　南阳　473000)

李斐(南阳医学高等专科学校临床医学系，河南南阳473000)

〔摘要〕目的探讨明目地黄丸对糖尿病大鼠视网膜氧化损伤的保护作用。方法选择雄性SD大鼠，给予大鼠腹腔注射链脲佐菌素(STZ)制备糖尿病大鼠模型，分为模型组、低剂量组、中剂量组、高剂量组，每组12只。同时选择同批次大鼠12只，作为对照组。模型组和对照组不给药，给予同体积双蒸水灌胃。高、中、低剂量组分别在糖尿病大鼠喂养12 w后给予明目地黄丸灌胃。测定各组大鼠在给药前、给药后的体质量、血糖和糖化血红蛋白(HbA1c)。实验结束后，取大鼠视网膜，测定视网膜超氧化物歧化酶(SOD)活性、谷胱甘肽过氧化物酶(GSH-Px)活性、丙二醛(MDA)含量。结果模型组治疗前、治疗后的体质量、血糖、HbA1c分别与对照组比较，差异有统计学意义(P＜0. 01)。模型组SOD活性、GSH-Px酶活性、MDA含量与对照组比较，差异有统计学意义(P＜0. 01);高、中、低剂量组SOD活性、GSH-Px酶活性、MDA含量分别与模型组比较，差异有统计学意义(P＜0. 05)。结论明目地黄丸对糖尿病大鼠视网膜起到保护作用，可能与其氧化损伤有关。

〔关键词〕糖尿病;视网膜;明目地黄丸;氧化损伤

糖尿病视网膜病变是糖尿病病程中的常见并发症，随着糖尿病的发病升高，糖尿病视网膜病变患者也随着增多。寻找治疗糖尿病视网膜病变药物是目前研究的热点之一。明目地黄丸是中药制剂，主要成分是熟地黄、山茱萸、牡丹皮、山药、茯苓、泽泻、枸杞子、菊花、当归、白芍、蒺藜、石决明。本文采用链脲佐菌素(STZ)制成糖尿病大鼠模型，观察明目地黄丸对糖尿病大鼠视网膜的保护作用及其机制。

1　材料和方法

1. 1实验动物选择雄性SD大鼠，平均体重为(210±16)g，均购自华中科技大学同济医学院动物实验中心，均采用标准大鼠饲料喂养，饲养间温度湿度适宜。

1. 2主要仪器和试剂STZ来自Sigma公司;明目地黄丸由河南省宛西制药股份有限公司生产;超氧化物歧化酶(SOD)、丙二醛(MDA)、谷胱甘肽过氧化物酶(GSH-Px)等试剂盒购自南京建成生物工程研究所;血糖仪购自罗氏公司。

1. 3糖尿病大鼠视网膜病变模型建立和分组、给药大鼠适应饲养5 d后实施禁食禁食12 h，以60 mg/kg剂量给予大鼠腹腔注射STZ，72 h后，采集大鼠尾静脉血，测定大鼠血糖情况，大鼠静脉血血糖超过16. 7 mmol/L作为糖尿病大鼠模型，而后喂养大鼠12 w，建立糖尿病大鼠视网膜病变模型。糖尿病大鼠喂养12 w后，分为四组:模型组、低剂量组、中剂量组、高剂量组，每组12只。同时选择同批次大鼠12只，作为对照组。模型组和对照组不给药，给予同体积双蒸水灌胃。高、中、低剂量组分别在糖尿病大鼠喂养12 w后给予明目地黄丸灌胃，每天剂量分别1 400 mg/kg、700 mg/kg、350 mg/kg，明目地黄丸在双蒸水中溶解，制成混悬液灌胃。

1. 4指标测定

1. 4. 1测定各种大鼠不同时间的体质量和血糖测定各组大鼠在给药前、给药后的体质量、血糖和糖化血红蛋白(HbA1c)情况，均为同一实验人员测定和记录结果。

1. 4. 2生化指标测定试验结束后取大鼠眼球，对其视网膜进行剥离，在磷酸盐(PBS)溶液中对所取组织进行研磨，直至成组织匀浆，加入PBS溶液适量后行离心，取上清液，测定其中的SOD活性、GSH-Px活性、MDA含量。

1. 5统计学处理采用SPSS14. 0进行分析及t检验。

2　结果

2. 1各组大鼠给药前后的体质量、血糖和HbA1c测定模型组治疗前、治疗后的体质量、血糖、HbA1c分别与对照组比较，差异有统计学意义(P＜0. 01)。见表1。

2. 2各组大鼠视网膜的SOD活性、GSH-Px活性、MDA含量测定结果模型组SOD活性、GSH-Px活性、MDA含量与对照组比较，差异有统计学意义(P＜0. 01);高、中、低剂量组SOD活性、GSH-Px活性、MDA含量分别与模型组比较，差异有统计学意义(P＜0. 05)。见表2。

表1　各组大鼠给药前后的体质量、血糖和HbA1c测定结果(x ±s，n=12)

3　讨论

在糖尿病视网膜病变的发病机制中，氧化应激损伤、凋亡等机制参与其中，是多种机制参与下的损伤过程。由于糖尿病时，机体处于高血糖状态，在多种损伤途径刺激下，可导致线粒体的呼吸链及还原型辅酶Ⅱ(NADPH)氧化酶活性改变，导致细胞的氧自由基生存增多，导致机体的氧化应激反应程度增加，从而导致视网膜细胞发生氧化损伤〔1～3〕，而视网膜的SOD活性降低，GSH-Px活性降低，而MDA含量增加〔4，5〕。本文研究说明氧化应激损伤参与了糖尿病视网膜病变。明目地黄丸是中药制剂，主要成分是熟地黄、山茱萸、牡丹皮、山药、茯苓、泽泻、枸杞子、菊花、当归、白芍、蒺藜、石决明。研究表明，明目地黄丸对白内障有一定治疗作用，其能够提高晶状体的抗氧化能力，减少脂质过氧化反应，从而起到抗氧化损伤作用〔6，7〕。本文结果说明明目地黄丸能够有效提高糖尿病大鼠视网膜的抗氧化损伤能力，能够有效降低氧化应激对视网膜细胞损伤，对糖尿病大鼠视网膜损伤起到保护作用。

4参考文献

1高玉，吴晋晖，柳林.链脲佐菌素诱发性糖尿病大鼠早期视网膜病变模型的建立〔J〕．第二军医大学学报，2010; 31(10): 1053-9.

2王志新，徐高磊，王延芬.氧化应激和抗氧化剂在糖尿病并发症发生发展中可能的作用〔J〕．医学研究杂志，2013; 4(2): 12-5.

3高宏杰，杨迎霞.中医药治疗糖尿病视网膜病变研究进展〔J〕．辽宁中医药大学学报，2012; 8(3): 251-4.

4许丽娟.明目地黄丸合并法可林滴眼液治疗早期老年白内障临床观察〔J〕．海南医学院学报，2012; 2(2): 243-4.

5肖培云，杨永寿，许嘉强.明目地黄丸中熊果酸含量测定方法比较〔J〕．大理学院学报，2010; 12(3): 4-6.

6张蕙，张荣春，倪诚.地黄类中成药临床应用辨析〔J〕．中华中医药杂志，2013; 7(2): 2178-81.

7赵和军.明目地黄丸合生脉散治疗肝肾阴亏型干眼症疗效观察〔J〕．新中医，2013; 7(4): 104-6.

〔2014-08-19修回〕

(编辑安冉冉/曹梦园)

基金项目:河南省教育厅自然科学研究计划项目(No．12B360019)

〔文章编号〕1005-9202(2015)20-5735-02;