中药大青叶、黄柏、龙胆草对小鼠皮肤炎症反应的影响

李中辉魏跃钢

中药大青叶、黄柏、龙胆草对小鼠皮肤炎症反应的影响

李中辉1∗魏跃钢2

目的: 明确大青叶、黄柏、龙胆草对小鼠变应性接触性皮炎组织的影响。方法: 利用1% FITC(丙酮∶DBP 1∶1)诱发的小鼠变应性接触性皮炎动物模型，将小鼠按给药不同分为空白对照组、生理盐水组、地塞米松组、大青叶组、黄柏组、龙胆草组，通过测量耳厚度差和观察耳朵组织病理改变。结果: 大青叶组、黄柏组、龙胆草组、地塞米松组小鼠耳厚度差均明显低于生理盐水组，且它们的耳朵皮肤的炎症反应抑制明显。结论: 大青叶、黄柏、龙胆草在抑制急性接触性皮炎的炎症反应方面具有与糖皮质激素相似的效果。

大青叶； 黄柏； 龙胆草； 变应性接触性皮炎

皮炎湿疹类皮肤病是皮肤科常见的超敏反应性疾病，属于IV型变态反应。中医治疗皮炎湿疹类皮肤病积累了丰富经验。笔者通过对近10年临床文献资料关于治疗急性湿疹和接触性皮炎常见中药的研究，(排除他人研究过的)筛选出了常用的大青叶、黄柏、龙胆草3种中药，并进行了其对小鼠接触性皮炎的实验研究，观察治疗急性皮炎湿疹类皮肤病的单味中药对小鼠IV型变态反应的影响。

1 材料与方法

1.1 材料

1.1.1 实验动物 苏州大学附属第一医院实验动物中心提供的雌性Balb/C小鼠35只，体重18～22 g，10～12周。

1.1.2 试剂 5－异硫氰酸荧光素(FITC)为上海紫一试剂厂生产。丙酮∶邻苯二甲酸二丁酯(DBP)为1∶1。地塞米松片为天津药业集团新郑股份有限公司生产。中药均购于苏州市天灵药业有限公司。

1.1.3 器材 煎药机为天津三延精密机械有限公司生产。光学显微镜为郑州朋来仪器有限公司生产。分析天平为海奕宇电子科技公司生产。千分尺(精确度0.01 mm)。

1.2 实验方法

1.2.1 动物分组 30只健康Balb/C小鼠随机分为6组，每组5只。分为空白对照组，生理盐水组，地塞米松组，大青叶组，黄柏组，龙胆草组。

1.2.2 药物干预 空白对照组小鼠不激发，不致敏。其它各组于实验前1 d背部剃毛，第l d和第2 d在背部脱毛部位用1%FITC(丙酮∶DBP 1∶1)连续致敏2次涂抹，第7 d在小鼠的左耳0.5%FITC(丙酮∶DBP 1∶1)激发。第3 d开始用灌饲器分别灌饲生理盐水、地塞米松及中药，每次灌饲体积为每10 g体重0.2 mL，连续用药6天(第3、4、5、6、7、8天)，激发期灌药时间为激发前2 h及激发后6 h。小鼠的药物剂量按每公斤体重为《中华人民共和国药典》的临床用量规定的20倍进行换算:大青叶0.5 g/m L、黄柏0.4 g/ m L、龙胆草0.2 g/m L、地塞米松0.2 mg/m L。

1.2.3 观察指标 ①右耳厚度差(S1):激发前及处死前测量鼠耳中部厚度，计算激发前及处死前右耳厚度差(mm)；②处死前左右耳厚度差(S2)；③在光学显微镜下观察小鼠皮肤组织病理变化。

1.2.4 统计学方法 所测数据以 ¯x±s表示，采用SPSS 16.0统计软件包行方差分析。为减少误差，所有数据的测量、计数和计算均两个人完成。

2 结果

2.1 各组对小鼠耳厚度的影响 与生理盐水组相比，大青叶组、黄柏组、龙胆草组、地塞米松组各组小鼠的左耳厚度差(S1)、同一小鼠左右耳厚度差(S2)明显降低(P＜0.01)，且黄柏组亦有明显差异(P＜0.05)，见表1。

表1 各组小鼠左耳厚度差(S1)、左右耳厚度差(S2)

2.2 各组对小鼠耳部皮肤的病理改变

2.2.1 各组对小鼠表皮的影响 ①表皮颗粒层和棘层计数:以细胞的层数计数。②表皮细胞间是否水肿的标准:以参照空白组的表皮细胞排列致密为阴性(－)；表皮细胞间能见成线状的网状结构为阳性(＋)；表皮细胞间的线状的网状结构清楚、明亮为中阳性(＋＋)；表皮细胞间线状的网状结构增粗、分离为强阳性(＋＋＋)。细胞内是否水肿的标准是以空白组的表皮细胞内胞核深染、清楚，胞浆均匀为(－)；表皮细胞内能看到模糊的空泡为阳性(＋)；表皮细胞内能见光亮的空泡，空泡的体积小于整个细胞体积的1/2且核有偏移为中(＋＋)；表皮细胞内光亮空泡的体积大于整个细胞体积的1/2且核偏于一侧细胞壁为强阳性(＋＋＋)。③结果:与生理盐水组相比，大青叶组、黄柏组、龙胆草组、地塞米松组可使表皮棘层均变薄，细胞间及细胞内水肿明显减轻，见表2。

表2 各组小鼠表皮的组织病理表现

2.2.2 各组对小鼠真皮的影响 ①真皮是否水肿的标准:以空白组的真皮细胞排列紧密、有序为阴性(－)；真皮内能看到海绵形成的模糊的网状结构，细胞胞浆略淡，真皮宽度是空白组的1～1.5倍阳性(＋)；真皮内的海绵形成的网状结构明显，细胞胞浆淡，真皮宽度是空白组的1.5～2倍中阳性(＋＋)；真皮内的海绵形成的网状结构间隙明亮、增粗，细胞胞浆很淡，真皮宽度是空白组的2倍以上强阳性(＋＋＋)。②毛细血管是否扩张的标准:以空白组看不到毛细血管或毛细血管较细，其内1～2个红细胞为阴性(－)；毛细血管直径是空白组毛细血管的1.5倍以内，其内2～4个红细胞为阳性(＋)；毛细血管直径是空白组毛细血管的1.5～2倍，其内4～6个红细胞为中阳性(＋＋)；毛细血管直径是空白组毛细血管的2倍以上，其内红细胞6个以上为强阳性。③根据判断标准可以看出:大青叶组、黄柏组、龙胆草组、地塞米松组的真皮水肿明显降低；大青叶组、龙胆草组、地塞米松组真皮内毛细血管扩张均降低，黄柏不能降低毛细血管扩张，见表3。

表3 各组小鼠组织病理真皮的表现

3 讨论

皮炎湿疹是皮肤科的常见炎症性疾病。许多医师通过动物实验对皮炎湿疹进行研究。黄礴等1研究了单味药白鲜皮、生地黄、荆芥、当归、金银花和白芷6味中药对小鼠变应性接触性皮炎的研究，白鲜皮、金银花、当归对小鼠ACD具有抑制作用，而荆芥、生地黄、白芷对小鼠ACD不具有抑制作用。林熙然等2把常见的30味中药按养血凉血清热利湿、清热祛风利湿、凉血清热祛风利湿和祛风利湿分成4类组成复方对小鼠实验性皮炎的作用。

急性皮炎湿疹由于人体禀赋不耐，湿、热、风等邪性客于肌肤，与气血相搏而发病。其临床表现:皮损色红，肿胀，其上为红斑、丘疹甚至糜烂渗出。根据中医辨证:色红多有热或血热，肿胀多有风邪或湿邪，糜烂渗出多为湿毒，瘙痒多为风邪所致。湿、热、风之邪是接触性皮炎、急性皮炎及湿疹的主要致病因素。据文献记载，3大青叶为十字花科植物菘蓝的干燥叶片，性苦寒，归心胃两经。具有清热解毒，凉血消斑的功效。大青叶在治疗急性皮炎湿疹中发挥其清热解毒、凉血之功，能使红肿消退，减少小鼠耳部肿胀和炎症细胞浸润。黄柏为芸香科植物黄皮树的干燥树皮。味苦性寒，归肾、膀胱、大肠经。具有清热燥湿，泻火除蒸，解毒疗疮的功效。黄柏的清热燥湿之功较强，善治下焦湿疮。黄柏也可外用治疗皮炎湿疹。龙胆草为龙胆科植物的干燥根及根茎。味苦性寒，归肝、胆经。具有清热燥湿，泻肝胆火功效。龙胆草善治肝经湿热，是龙胆泻肝汤的君药，而很多医家运用龙胆泻肝汤治疗皮炎湿疹都取得了很好的疗效。本实验表明，大青叶、黄柏、龙胆草可有效抑制小鼠的IV型变态反应，中药在抑制急性接触性皮炎的炎症反应的某些方面可以达到和糖皮质激素一样的作用。如在此基础上，对此3种中药在化学成份上进一步研究，对开发新型抗过敏药方面有一定意义，

1黄礴，吴铁，樊翌明.6种中药抑制二硝基氟苯所致小鼠接触性皮炎的实验研究.现代中西医结合杂志，2007，16(13): 1756－1757.

2林熙然，涂彩霞，杨春梅，等.抗IV型变态反应中药治疗湿疹的研究.中西医结合杂志，2000，20(4):258－260.

3高学敏.中药学.北京:中国中医药出版社，2007.56－60.

(收稿:2014－04－08 修回:2014－06－03)

Effects of folium isatid is，phellodend ron，gentian on skin inflammation of mousemodels

LIZhong-hui，WEIYue-gang.The 3rd People’s Hospital of Xiangcheng District in Suzhou，215134

Objective:To determine the effects of folium isatidis，phellodendron，gentian on skin inflammation ofmouse allergic contact dermatitismodels.Methods:Themodels of contact dermatitiswere induced by FITC 1%(acetone∶DBP 1∶1).The effects of different drugs，including folium isatidis，phellodendron，gentian，saline and dexamethasone onmurine ear swelling and histopathological changeswere assessed.Saline was used as control.Results:Compared with saline group，the ears swelling and inflammation was markedly suppressed in the folium isatidis group，phellodendron，gentian group and dexamethasone group(P＜0.05). Conclusion:Folium isatidis，phellodendron，gentian and dexamethasone have equivalent effect in restraining the inflammation reaction.

folium isatidis；phellodendron；gentian；allergic contact dermatitis

1南京中医药大学在职研究生，南京，210029∗现工作单位:苏州市相城区第三人民医院皮肤科，苏州，215134 2江苏省中医院皮肤科，南京，210029