2015年全国省级兽医系统实验室检测能力比对结果分析

董昕欣，刘 伟，邴国霞，张劭俣，李文京，

王传彬1，张 倩1，吴佳俊1，李雁冰2，郭建宏3

（1.中国动物疫病预防控制中心，北京 朝阳 100125；2.中国农业科学院哈尔滨兽医研究所，

黑龙江 哈尔滨 150001；3.中国农业科学院兰州兽医研究所，甘肃 兰州 730046）

2015年全国省级兽医系统实验室检测能力比对结果分析

董昕欣1，刘 伟1，邴国霞1，张劭俣1，李文京1，

王传彬1，张 倩1，吴佳俊1，李雁冰2，郭建宏3

（1.中国动物疫病预防控制中心，北京 朝阳 100125；2.中国农业科学院哈尔滨兽医研究所，

黑龙江 哈尔滨 150001；3.中国农业科学院兰州兽医研究所，甘肃 兰州 730046）

兽医实验室作为动物疫病防控的重要技术支撑机构，不管是兽医科学研究、兽医药品研制、还是动物疫病检测诊断，都离不开实验室的工作。而实验室检测能力和水平则是实验室的核心，是动物疫病防控提供技术支撑的固基之本，源之所在。实验室间能力比对作为一项评价实验室工作能力的方法一直在全世界范围内广泛应用，我国的卫生系统、质检系统也将此方法作为评价、管理、提高实验室检测水平的手段[1]。2010年以前，兽医系统一直没有系统的实验室检测能力比对方法，各级兽医系统实验室只能参加外系统、外部门的能力对比来评价本实验室的工作能力。2010年农业部印发《兽医系统实验室考核工作实施方案》[2]，明确要求每年组织一次实验室比对试验，为评价各级兽医实验室检测水平、提升各级兽医实验室工作能力提供了新的手段。

按农业部要求，中国动物疫病预防控制中心组织实施了2015年省级兽医系统实验室能力比对，全国32个省级兽医实验室全部参加，在规定时间内完成了比对样品制备、分发、检测和结果回收。比对结果客观反映了实验室的检测能力和技术水平，对该结果进行分析讨论有利于进一步做好兽医系统实验室管理工作。

1 比对计划

本次比对依据农业部办公厅和中国动物疫病预防控制中心有关2015年兽医系统实验室检测能力比对的文件[3-4]要求，共设置4个比对项目，分别是H7N9亚型禽流感病毒（H7N9-AIV）检测、口蹄疫抗体（FMD Ab）检测、猪伪狂犬病gE抗体（PR gE-Ab）检测、J亚型禽白血病抗体（J-AL Ab）检测。全国共有32个省级兽医实验室（含新疆生产建设兵团）参加此次比对。

2 比对方法

2.1 试验方法与标准 针对4个检测能力比对项目，采用国家兽医参考实验室或专业实验室推荐的方法和试剂，其中部分试剂由参加比对的省级实验室自行准备，见表1。

表1 比对试验的方法、标准和主要试剂

2.2 比对样品制备

2.2.1 制备方式 各个国家兽医参考实验室和专业实验室分别完成相应样品的制备、标定、分装和编号，并将样品和标定值送交中国动物疫病预防控制中心统一保存，作为盲样下发使用。

2.2.2 H7N9-AIV样品 尿囊液提取物样品6份，参考值分别为强阳性、弱阳性、强阳性、阴性、阴性、阴性。

2.2.3 FMD Ab样品 免疫牛血清样品6份，参考值分别为720、720、180、180、＜8、＜8。

2.2.4 PR gE-Ab样品 猪血清样品6份，参考值分别为强阳性、强阳性、弱阳性、弱阳性、阴性、阴性。

2.2.5 J-AL Ab样品 鸡血清样品6份，参考值分

别为弱阳性、弱阳性、强阳性、强阳性、阴性、阴性。

2.3 比对样品传递 比对样品为具有生物学活性的血清、尿囊液，为保持其良好的生物学活性，样品存放在-20℃以下冰柜中。分发时将样品和试剂放入装有冰袋的保温箱中保存，由参加比对的省级实验室派专人在规定的时间内统一领取，并在12 h之内送达参加比对的实验室。

2.4 评判标准

2.4.1 H7N9-AIV检测评判标准 强阳性和弱阳性样品的检测结果应为“阳性”；阴性样品的检测结果应为“阴性”。

2.4.2 FMD Ab检测评判标准 与参考值的偏差不超过一个滴度，判为结果准确。

2.4.3 PR gE-Ab检测评判标准 强阳性和弱阳性样品的检测结果应为“阳性”；阴性样品的检测结果应为“阴性”。

2.4.4 J-AL Ab检测评判标准 强阳性和弱阳性样品的检测结果应为“阳性”；阴性样品的检测结果应为“阴性”。

3 比对结果

3.1 总体结果 根据比对结果评判标准，32个参加省级实验室的所有项目的检测结果全部准确，具体见表2。

表2 32个实验室比对结果统计

3.2 H7N9-AIV检测比对结果 32个实验室对H7N9-AIV弱强阳性和阴性样品的检测结果全部正确，见表3。

表3 各实验室H7N9-AIV检测结果频次与参考值对照

3.3 FMD Ab检测比对结果 32个实验室的检测结果全部正确。对于参考值相同的双份重复样品的检测，大部分实验室（30/32）检测结果自身重复性较好，说明绝大部分实验室的随机误差较小；而第1号、第17号两个实验室对于参考值相同的两份样品检测值不一致，反映出这两个实验室在质控体系方面存在问题。具体结果见图1。

图1 各实验室FMD Ab检测值离散

3.4 PR gE-Ab检测比对结果 32个实验室对PR gE-Ab弱强阳性和阴性样品的检测结果全部正确。见表4。

表4 各实验室PR gE-Ab检测结果频次与参考值对照

3.5 J-AL Ab检测比对结果 32个实验室对JAL Ab弱强阳性和阴性样品的检测结果全部正确，见表5。

表5 各实验室J-ALAb检测结果频次与参考值对照

4 讨论

从比对结果来看，参加能力比对的32个省级兽医实验室4个比对项目的样品检测结果全部准确，准确率均为100%。这说明持续5年开展的检测能力比对工作起到了发现问题、促进质量体系改进的作用。

4.1 本次实验室检测能力比对中设置了平行样品，用以评估实验室检测体系的稳定性。结果显示，大部分实验室的检测结果平行性好，但在口蹄疫抗体检测比对结果中，有两个省级兽医实验室对参考值相同的两份样品检测结果不一致，甚至出现较大差异。这说明，检测过程存在较多的随机性误差，检测系统的稳定性较差。

4.2 本次设置的H7N9亚型禽流感病毒检测项目，要求采用荧光RT-PCR方法，但仍有1个省份未能用荧光RT-PCR方法完成检测，原因是实验室未配置荧光PCR仪。就目前省级实验室的工

作内容来看，荧光PCR仪应该是完成监测任务的基本仪器，荧光PCR技术也是省级兽医实验室应具备的基本能力，这说明该省份的实验室基础仪器设备配备不足。

4.3 本次比对项目的设计紧密结合了我国动物疫病防控的要求。《国家中长期动物疫病防治规划（2012-2020年）》[5]中明确要求：到2020年，全国种禽场达到禽白血病的净化标准；种畜场达到伪狂犬病的净化标准。目前各地开展净化工作的病种也主要是禽白血病和伪狂犬病，通过开展检测能力比对验证了各省禽白血病和伪狂犬病的检测能力，为净化工作的顺利实施奠定了良好的基础。今后比对项目的选择应继续以《国家中长期动物疫病防治规划（2012-2020年）》为依据，扩大兽医系统实验室检测能力比对项目范围，逐步覆盖所有优先防治的动物疫病病种。

4.4 部分省份在近几年比对工作均出现偏差，表明这些省份的实验室在检测技术能力方面存在问题，有针对性的培训能起到良好的矫正作用。以西藏为例，该省级兽医实验室在2011-2014年的能力比对中均出现了错误，因此在2014年、2015年连续两个年度安排检测技术专家前往西藏进行检测项目的针对性培训，该实验室在2014年的能力比对只有一个样品检测有偏差[6]，2015年4个比对项目全部准确。这说明对于连续出现偏差的实验室，需要引起足够的重视，应针对实验室操作或管理采取有效措施，增加实验室检测结果的稳定性。

[1]刘来福，张鹤晓，张利峰，等.家禽禽流感病毒AGID抗体定性检测及H5、H9亚型HI抗体定量检测能力验证结果分析[J].现代测量与实验室管理，2004（2）：29-32.

[2]农业部.农业部关于印发《兽医系统实验室考核管理办法》的通知[Z].农医发[2009]15号.北京：农业部，2009-08-11.

[3]农业部办公厅.农业部办公厅关于开展2015年兽医系统实验室检测能力比对工作的通知[Z].农办医[2015]7号.北京：农业部办公厅，2015-03-02.

[4]中国动物疫病预防控制中心.关于印发《2015年省级兽医系统实验室检测能力比对实施方案》的通知[Z].疫控（安）[2015]24号.北京:中国动物疫病预防控制中心，2014-03-06.

[5]国务院办公厅.国务院办公厅关于印发国家中长期动物疫病防治规划（2012-2020年）的通知[Z].国办发[2012]31号.北京：国务院办公厅，2012-05-20.

[6]董昕欣，刘伟，邴国霞，等.2014年全国省级兽医实验室检测能力比对结果分析[J].中国兽医杂志，2014，50（10）：101-102.

2015-09-28

农业部动物疫情监测与防治经费