高血压肾功能损害患者血清中转化生长因子β1含量检测及其临床价值分析

王 恭 云 辉 曾学平

高血压肾功能损害患者血清中转化生长因子β1含量检测及其临床价值分析

王 恭①云 辉①曾学平②

目的：研究高血压肾功能损害患者血清中转化生长因子β1(TGF-β1)含量检测及其临床价值。方法：筛选150例原发性高血压患者，根据病情将其分为3组：①原发性高血压未合并靶器官功能损害的患者为对照组(50例)；②原发性高血压合并肾功能损害Ⅰ期的患者为肾功能Ⅰ期组(50例)；③原发性高血压合并肾功能损害Ⅱ期的患者为肾功能Ⅱ期组(50例)。比较3组受试者的血清TGF-β1含量以及肾功能指标。结果：3组受试者的血肌酐(Scr)和血尿素氮(Urea)水平相比，无统计学差异；肾功能Ⅰ期组、Ⅱ期组患者的内生肌酐清除率(Ccr)低于对照组；TGF-β1水平高于对照组，差异有统计学意义(F=23.523，P＜0.05)；TGF-β1水平与Ccr呈负相关关系。结论：当肾功能损害为Ⅰ期、Ⅱ期时，TGF-β1水平发生明显改变，且与菊粉清除率(Cin)水平具有良好的相关性，是反应肾功能的理想指标。

高血压；肾功能损害；转化生长因子β1；内生肌酐清除率

[First-author’s address] Department of Out-Patient, No.187 Hospital of PLA, Haikou 571159, China.

原发性高血压常常合并靶器官功能损害，而肾脏是最常见的受累靶器官，故在临床实践中，治疗方案的制定有赖于疾病的早期发现和诊断[1]。血肌酐和血尿素氮是临床上用于检测肾功能的常用指标，但只有当肾功能损害＞50%时，以上两项指标才会发生变化，这无疑延误了疾病的诊断和治疗[2]。内生肌酐清除率(creatinine clearance rate，Ccr)是反应肾功能的金标准，能够早期发现肾功能的损害，但检测步骤繁琐、需要使用外源性的标志物，难以被患者接受。因此探寻检测更为便捷、反应肾功能更为灵敏的指标具有现实的临床意义。转化生长因子β1(transforming growth factor-β1，TGF-β1)是具有广泛生物学功能的细胞因子，在肾脏功能损害的病理生理过程中发挥了重要作用[3]。本研究分析探讨高血压肾功能损害患者血清中TGF-β1含量及其临床价值。

1 资料与方法

1.1 一般资料

选取2010年8月至2013年9月在解放军第187医院心内科和肾内科门诊就诊的150例原发性高血压患者，根据病情将其分为3组：①原发性高血压未合并靶器官功能损害的患者为对照组(50例)，其中男性32例，女性18例，年龄(57.9±7.2)岁；②原发性高血压合并肾功能损害Ⅰ期的患者为肾功能Ⅰ期组(50例)，其中男性30例，女性20例，年龄(59.4±6.9)岁；③原发性高血压合并肾功能损害Ⅱ期的患者为肾功能Ⅱ期组(50例)，其中男性34例，女性16例，年龄(57.3±7.8)岁。3组受试者在年龄、性别、血压水平以及口服降压药情况相比无差异，具有可比性。

1.2 纳入与排除标准

(1)纳入标准：①明确的原发性高血压诊断；②检测Ccr，对照组患者Ccr为80～120 ml/min，肾功能损害Ⅰ期组Ccr为60～80 ml/min，肾功能损害Ⅱ期组Ccr为40～60 ml/min；③取得患者及家属知情同意，愿意参加所有受试项目的检测。

(2)排除标准：①继发性高血压患者；②合并明显心功能损害以及肾功能损害Ⅲ期、Ⅳ期患者；③未能坚持参加所有受试项目检测。

1.3 检测方法

1.3.1 TGF-β1检测

采集3组患者外周静脉血5 ml，离心后采用酶联免疫吸附法检测TGF-β1含量。检测步骤：①反应板每孔各加入标准品或待测样品100 ul，充分混匀后在37℃水浴箱中静置120 min；②用洗涤液将反应板充分洗涤4～6次，并在滤纸上印干；③每孔中加入第一抗体工作液100 ul。将反应板充分混匀后置37 ℃ 60 min，洗涤4～6次；④每孔加酶标抗体工作液100 ul，将反应板置37 ℃ 30 min，洗涤4～6次；⑤每孔加入底物工作液100 ul，置37 ℃暗处反应15 min，每孔加入100 ul终止液混匀；⑥于30 min内用酶标仪在450 nm处测吸光值。比较3组受试者的血清TGF-β1含量以及肾功能指标。

1.3.2 肾功能检测

采集3组患者外周静脉血5 ml，离心后采用电化学发光仪检测肌酐和尿素氮水平；测定菊粉清除率(inulin clearance rate，Cin)来反应肾小球的滤过功能。

检测步骤：早晨给予留置导尿，取10 ml尿液和4 ml静脉血作为空白对照；将5 g菊粉溶于150 ml生理盐水中，15 min内静脉推注完成，然后用含5 g菊粉的生理盐水400 ml维持滴注，30 min后夹闭导尿管，20 min后取静脉血4 ml，测定血液中菊粉含量；排空膀胱，测定尿量和尿菊粉含量(公式1)：

Cin=尿菊粉含量÷(血浆菊粉含量×稀释倍数)×尿量(ml/min) (1)

1.4 统计学方法

采用SPSS 18.0软件对计量资料进行方差分析、计数资料进行卡方检验；相关性分析采用以TGF-β1为自变量、Ccr为应变量的单因素回归分析。检验标准以P＜0.05为差异有统计学意义。

2 结果

2.1 3组受试者资料比较

(1)对照组：收缩压为(142.4±16.2)mm Hg，舒张压为(92.5±12.4)mm Hg；口服一种降压药19例，口服两种降压药20例，口服三种降压药11例。

(2)肾功能Ⅰ期组：收缩压为(144.8±15.9)mm Hg，舒张压为(93.4±15.9)mm Hg；口服一种降压药17例，口服两种降压药21例，口服3种降压药12例。

(3)肾功能Ⅱ期组：收缩压为(145.4±16.0)mm Hg、舒张压为(93.3±11.2)mm Hg；口服一种降压药15例，口服两种降压药22例，口服3种降压药13例。

2.2 血液学指标

3组受试者的血肌酐、血尿素氮水平的差异无统计学意义(F=0.894，F=0.587；P＞0.05)；3组受试者Ccr的差异有统计学意义(F=13.874，P＜0.05)；经过LSD法两两比较表明，肾功能Ⅰ期组、Ⅱ期组患者的Cin低于对照组(见表1)。

2.3 TGF-β1水平

对照组患者TGF-β1水平为(24.7±4.4)ng/ml、肾功能Ⅰ期组患者TGF-β1水平为(42.8±7.3)ng/ ml、肾功能Ⅱ期组患者TGF-β1水平为(75.5±10.3) ng/ml。经方差分析可知，3组受试者内生Ccr的差异有统计学意义(F=23.523，P＜0.05)；经过LSD法两两比较可知，肾功能Ⅰ期组、Ⅱ期组患者的TGF-β1水平高于对照组，其差异显著。

2.4 TGF-β1与Cin的相关性

以TGF-β1为自变量、Ccr为应变量进行单因素回归分析可知，TGF-β1水平与Ccr呈负相关关系，回归方程为Y=-1.2716X+144.26，决定系数r2=0.8344，t=16.984，P＜0.05。

3 讨论

高血压是临床最常见的慢性疾病，血压水平异常可导致肾脏血流动力学改变，肾脏入球小动脉痉挛、管腔狭窄、肾小球灌注不足，进而导致肾小球滤过功能受损，表现为血肌酐和血尿素氮水平升高[4]。临床上常用血肌酐和血尿素氮水平作为反应肾功能的指标，但对于判断早期肾功能损害具有较大的局限性。由于肾脏本身具有较强的代偿能力，当发生肾小球灌注不足时，可通过肾脏入球小动脉的收缩和舒张来调节血液灌注，使得肾脏的滤过功能维持在正常范围[5]。只有在肾功能损害＞50%时，血肌酐和血尿素氮水平才会发生明显改变，此时肾功能衰竭已发展至Ⅲ期、Ⅳ期，不利于疾病的早期发现和早期诊断[6]。本研究结果发现，肾功能Ⅰ期、Ⅱ期患者的血肌酐和血尿素氮水平与对照组相比无明显差异，表明这两项指标无法在肾功能损害的早期诊断疾病。

表1 3组受试者血液学指标比较

内生Ccr是判断肾功能情况的金标准，能够准确反应肾小球率过滤，临床上多通过Cin的测定来反应内生Ccr，但是Cin的测定需要给予外源性标志物，操作步骤繁琐，患者和家属多无法接受，因而不易推广使用[7-8]。在临床中，准确判断肾小球滤过功能、早期发现肾功能损害有利于针对高血压合并肾功能损害给予及时的治疗措施。因此，探寻更为便捷、准确、灵敏的肾功能检测指标具有现实的临床应用价值[9]。TGF-β1是一类具有极为广泛生物学作用的多肽类细胞因子，参与体内的细胞增殖、细胞外基质聚积、血管新生以及损伤后修复等各种病理生理学过程，在高血压患者发生肾功能损害的各个阶段中，TGF-β1均发挥了重要作用[10-12]。

国内外学者近年来的研究显示，TGF-β1在肾脏局部的主要作用为：①通过旁分泌、自分泌的方式作用于肾脏入球小动脉，经过一系列信号转导途径促进胶原蛋白、纤维蛋白及层粘连蛋白等的合成，进而造成肾小球内细胞外基质聚集，发生肾小球硬化和间质纤维化；②抑制纤溶系统的活性，进而加重细胞外基质聚集的情况，导致肾小球硬化和间质纤维化不断发展；③募集成纤维细胞和单核巨噬细胞，介导入球小动脉内膜的炎症反应，导致动脉痉挛、肾小球灌流量减少[13-14]。

本研究通过比较3组受试者的血清TGF-β1水平显示，肾功能Ⅰ期组、Ⅱ期组患者的TGF-β1水平高于对照组，表明TGF-β1水平在肾功能损害的早期已发生改变，预期可作为判断肾功能情况的理想指标。Ccr是反应肾功能的金标准，而Cin在检测时的步骤较为繁琐，因此判断肾功能的理想指标应该具有取材方便、检测步骤简单的特点，并且能够与Cin存在较好的相关关系[15]。通过单因素回归的方法分析TGF-β1与Ccr的相关性可知，TGF-β1水平与Ccr呈负相关关系，决定系数达到了0.8344，表明Ccr的变化有83.44%可以用TGF-β1的变化来解释。同时说明血清TGF-β1能够准确反应肾小球滤过情况，在临床实践中，可以通过血清TGF-β1水平的检测来反应肾功能。

综上所述，当肾功能损害Ⅰ期、Ⅱ期时，TGF-β1水平发生明显改变，且与Ccr水平具有良好的相关性，是反应肾功能的理想指标。

[1]宋宁,张显坤,孙艳玲,等.肾功能指标联合检测对老年原发性高血压患者早期肾损伤的诊断价值[J].山东医药,2012,52(5):60-61.

[2]陈永立,薛玲,邱忠君,等.血清TGF-β1及β2-MG水平对妊娠期高血压疾病早期肾损伤诊断的临床意义[J].中国妇幼保健,2012,27(13):1951-1952.

[3]曹丹,郝丽荣.糖尿病肾病与肾素-血管紧张素-醛固酮系统的关系[J].医学综述,2012,19(9):1386-1388.

[4]刘玉英,王立启,朱世,等.转化生长因子β1与高血压靶器官损害的关系[J].山东大学学报(医学版), 2007,45(5):495-498.

[5]Argano C,Duro G,Corrao S,et al.Transforming growth factor beta1 T29C gene polymorphism and hypertension:relationship with cardiovascular and renal damage[J].Blood Press,2008,17(4):220-226.

[6]Upton PD,Morrell NW.The transforming growth factor-β-bone morphogenetic protein type signalling pathway in pulmonary vascular homeostasis and disease[J].Exp Physiol,2013,98(8):1262-1266.

[7]Şekerci ÇA,Işbilen B,Işman F,et al.Urinary NGF,TGF-β1,TIMP-2 and bladder wall thickness predict neurourological findings in children with myelodysplasia[J].J Urol,2014,191(1):199-205.

[8]Lekawanvijit S,Kompa AR,Zhang Y,et al. Myocardial infarction impairs renal function,induces renal interstitial fibrosis,and increases renal KIM-1 expression:implications for cardiorenal syndrome[J].Am J Physiol Heart Circ Physiol,2012,302(9):1884-1893.

[9]Meng XM,Huang XR,Xiao J,et al.Diverse roles of TGF-βreceptor II in renal fibrosis and inflammation in vivo and in vitro[J].J Pathol, 2012,227(2):175-188.

[10]叶春芳,王晓丽.糖尿病肾病合并高血压患者TGF-1及RAAS的变化[J].中国现代医学杂志,2010,20(1): 77-79.

[11]郭爱军,肖占森.高血压病患者血、尿β2微球蛋白、白蛋白浓度变化及其临床意义[J].中国医药导刊,2012,14(9)1583,1570.

[12]Ka SM,Yeh YC,Huang XR,et al.Kidneytargeting Smad7 gene transfer inhibits renal TGF-β/MAD homologue(SMAD)and nuclear factor kB(NF-kB)signalling pathways,and improves diabetic nephropathy in mice[J].Diabetol ogia,2012,55(2):509-519.

[13]Martin FL,McKie PM,Cataliotti A,et al. Experimental mild renal insufficiency mediates early cardiac apoptosis, fibrosis,and diastolic dysfunction:a kidney-heart connection[J]. Am J Physiol Regul Integr Comp Physiol, 2012,302(2):292-299.

[14]Ding Y,Choi ME.Regulation of autophagy by TGF-β:emerging role in kidney fibrosis[J]. Semin Nephrol,2014,34(1):62-71.

[15]刘鹏,高利霞,观美华,等.血清胱抑素C和C-反应蛋白对诊断痛风患者早期肾功能损伤的作用[J].中国医药导刊,2012,14(7):1234-1235.

The levels of TGF-β1 in hypertensive renal function impairment patients and its clinical value analysis

WANG Gong, YUN Hui, ZENG Xue-ping
China Medical Equipment, 2015,12(6):112-115.

Objective: To detect the levels of TGF-β1 in hypertensive renal function impairment patients and its clinical value. Methods: Primary hypertension patients with no target organs damage were enrolled in control group, primary hypertension patients with renal function stageⅠand stage Ⅱ were enrolled in renal function stage Ⅰ group and stage Ⅱ group. Serum TGF-β 1 levels and renal function indices of three groups were compared. Results: There were no significant difference of serum creatinine and blood urea nitrogen of three groups(F=23.523, P＜0.05); endogenous creatinine clearance rate of renal functionⅠand Ⅱgroups were lower than that of control group, TGF-β1 levels of renal functionⅠandⅡ groups were higher than of control group; TGF-β1 levels were negatively correlated with creatinine clearance rate. Conclusion: TGF-β 1 level is an ideal index to reflect renal function for its level significantly changes in renal damage stageⅠ, Ⅱ and has good correlation with Cin.

Hypertension; Renal function impairment; Transforming growth factor-β1; Endogenous creatinine clearance rate

王恭,男,(1968- ),本科学历，主治医师。解放军第187医院门诊部，从事心血管内科工作。

1672-8270(2015)06-0112-04

R544.14

A

10.3969/J.ISSN.1672-8270.2015.06.034

2014-12-10

①解放军第187医院门诊部 海南 海口 571159

②解放军第187医院输血科 海南 海口 571159