乌梅丸熏洗联合肛周皮下游离术对肛门瘙痒症患者PAR-2靶点的研究

黄文武



乌梅丸熏洗联合肛周皮下游离术对肛门瘙痒症患者PAR-2靶点的研究

黄文武

（井冈山大学附属医院肛肠科，江西，吉安 343000）

目的 通过研究治疗组（乌梅丸熏洗联合肛周皮下游离术）针对肛门瘙痒症皮损PAR-2（蛋白酶活化受体-2）的表达量，从而客观评价本方案的治疗效果。方法 选择2013年1月至2014年10月肛门瘙痒症术后患者，随机分为治疗组20例、对照组20例、空白组10例。取术后三组第1、3、7 d的肛周皮损皮肤，采用实时荧光定量RT-PCR检测PAR-2编码基因的表达量，并进行统计分析。结果 治疗组术后第1、3、7 d较对照组及空白组的表达量明显下降，且有显著性差异（< 0.05）。结论 乌梅丸联合肛周皮下游离术对肛门瘙痒症有良好的治疗效果。

PAR-2；肛门瘙痒症；乌梅丸熏洗；肛周皮下游离术

肛门瘙痒症是局限性神经机能障碍性皮肤病，具有病程长、反复发作的特点；它能引起强烈地搔抓欲望，严重影响患者睡眠，从而主观搔抓欲望更强，形成恶性循环，严重的搔抓引起继发性皮肤损害，如痒疹、湿疹和苔藓样改变[1]。因此，对肛门瘙痒症的研究刻不容缓。本研究旨在从现代分子生物学方面来探讨此疾病的机理，最新研究明确表明，肛门瘙痒症患者皮损组织中PAR-2表达对本病致炎、致痒具有重要作用[2]。通过观察肛门瘙痒症患者经乌梅丸熏洗联合肛周皮下游离术治疗后第1、3、7 d肛周皮损中PAR-2的表达，客观评价本治疗方案对肛门瘙痒症患者致敏皮肤PAR-2表达的影响，为此提供客观依据，以期为临床治疗肛门瘙痒症提供切实可行、便于推广、安全有效的临床治疗方法。

1 研究方法

1.1 收集样本

(1)病例来源：患者主要来源于井冈山大学附属医院2013年1月至2014年10月收治的肛门瘙痒症患者的住院病人，共收集50例。参照《安德鲁斯临床皮肤病学》诊断标准。(2)观察方法：随机分组方法：将全部入选患者按就诊顺序编号，采用SPSS软件进行随机化分配，依次装入随机信件分配治疗，并作登记。在分组时保证将各组患者年龄、性别、病程等的均衡性，并注意各中心试验组间的均衡性。

1.2 技术方法

肛门瘙痒症符合纳入标准患者进行分组，随机分为治疗组20例、对照组20例、空白组10例，所有纳入患者均行肛周皮下游离手术。 (1)治疗组：于术后第1 d开始使用乌梅丸（药物组成：乌梅30 g，细辛15 g，干姜10 g，黄连10 g，当归10 g，制附片10 g，蜀椒30 g，桂枝10 g，人参5 g，黄柏20 g），上述中药由井冈山大学附属医院中药房提供，每天1剂，水煎两次，每次用清水2000 mL浸泡半小时，煎1 h，煎后量约1000 mL，2煎兑匀，存入保温瓶中，分早晚两次用（每次大便后加坐浴1次），水温控制在39~43℃，每次熏蒸5 min后坐浴10~15 min[4]。(2)对照组：手术后第1d用1/5000高锰酸钾液熏洗，配比成1/5000浓度高锰酸钾1000 mL溶液，进行坐浴，早晚两次（每次大便后加坐浴1次）每次熏蒸5 min后坐浴10~15 min。(3)空白组：肛周皮下游离术后不予任何药物治疗；治疗组与对照组术后均连用7 d后停药。(4)肛周皮下游离术：常规碘伏消毒铺巾，以2%利多卡因20 mL加0.9%NS20 mL分别在12、3、6、9点呈扇形肛周皮下菱形浸润，麻醉生效后，于肛门前后距肛缘1.5 cm各做一纵行切口，用手术剪从前、后方切口进入，紧靠皮下围绕肛周做锐性游离，离断皮下神经末梢[3]。

1.3 指标检测

(1)取材及病理学观察：标本采集及制备方法：肛门瘙痒症患者术后第1、3、7 d肛周皮损皮肤，每天同一时段以4 mm环钻在上述时相切取患者肛周皮损的皮肤，放入事先准备好的专用epp管中，并做好编号以示区别，迅速放入液氮罐内，以防创面组织中DNA变性，待测PAR-2表达量。(2)PAR-2含量和检测：采用实时荧光定量RT-PCR检测PAR-2编码基因的表达，取术后第1、3、7 d的肛周皮损皮肤，根据RT-PCR试剂盒、总RNA提取试剂盒说明提取组织中mRNA，然后进行实时荧光定量RT-PCR扩增PAR-2。

1.4 统计分析

(1)应用Microsoft Excel建立数据库，用SPSS13.0进行数据统计分析。(2)比较三组指标，定性资料进行χ2检验，定量资料进行检验，得出结论，< 0.05为差异有统计学意义。

(2)效果标准：治疗组术后第1、3、7 d患者皮损部位中PAR-2染色的平均吸光度较对照组及空白组第1、3、7 d PAR-2染色的平均吸光度显著降低，差异有统计学意义（< 0.01），提示肛周皮下游离联合乌梅丸熏洗能明显抑制肛门瘙痒症患者皮损部位PAR-2表达。

2 结果

显示治疗组术后第1、3 d皮损部位的PAR-2表达量明显低于对照组及空白组< 0.05(有显著性差异)；治疗组术后第7 d和对照组及空白组的术后第7 d比较：= 0.000 < 0.01(有非常显著性差异)。结果见表1。

表1 三组肛周皮损皮肤中PAR-2表达(± s )

Table 1 The expression of PAR-2 in wound surface tissue after anal fistula operation

表1 三组肛周皮损皮肤中PAR-2表达(± s )

组别 例数(50)不同时相PAR-2▲ P值 平均表达值（± S） 治疗组 20例 对照组 20例 空白组 10例 术后第1 d术后第3 d术后第7 d 术后第1 d术后第3 d术后第7 d 术后第1 d术后第3 d术后第7 d4267.90 ± 213.3 0.0363989.00 ± 226.6 0.0133652.40 ± 196.8 0.000 4555.50 ± 121.34386.30 ± 212.8 4365.82 ± 189.3 4742.40 ± 119.94423.60 ± 158.1 4238.20 ± 224.6

注：▲PAR-2（目的基因 Ct 值—βactionCt值）。

3 分析与讨论

3.1 乌梅丸的治疗机理

肛门瘙痒症的发病机制很多，目前研究更多地认为组胺是本病的主要致痒因子，组胺存在于肥大细胞与嗜碱性细胞中；PAR-2是肥大细胞分泌的类胰蛋白酶作用的一种G蛋白耦联受体，参与皮肤炎症及超敏反应的重要分子[5]；祖国医学认为风寒湿热之邪客于肌肤之间，或肝经湿热下注，虫毒骚扰。本方案采取肛周皮下游离术联合乌梅丸熏洗治疗肛周瘙痒症，中药熏洗可通过温差及药物的渗透直接作用于局部组织，通过经络散布全身，气血通畅，局部血液循环增加和增加白细胞吞噬功能，促进局部炎症渗出物吸收[6]；现代研究中药熏洗主要透过表皮角质层和通过皮肤附属器（毛囊、皮脂腺和汗腺）的吸收，又能刺激皮肤的神经末梢感受器，促进体液和内分泌的调节，同时肛门部皮肤的屏障功能较弱，且肛门静脉血管丛丰富，故肛门局部用药较易渗透和吸收，可以直接进入血液循环及淋巴循环，加速新陈代谢，迅速发挥药效，同时也避免了肝脏的首过效应及胃肠道的毒副反应[7]。

3.2 本治疗方案的优点与不足

本方案体现了中西医结合，标本兼治原则，既发挥中医治本原则，同时突出肛周皮下神经末梢离断治其标。本熏洗方选用张仲景经方乌梅丸，为治厥阴经的主方，以乌梅之酸敛肝熄风为主药，蜀椒、干姜、桂枝、附子、细辛之辛，黄连、黄柏之苦，人参、当归之甘，合而为一，同时方中蜀椒能温散止痛，燥湿杀虫，黄柏、黄连清热燥湿，杀虫止痒，能抑制皮肤PAR-2的表达，从而治愈肛门瘙痒症。我们的研究显示，治疗组明显优于对照组及空白组，肛周皮下游离术联合乌梅丸熏洗治疗肛周瘙痒症，能降低患者皮损内角质形成细胞PAR-2的表达[8]。从临床病例观察，该治疗方案使患者恢复快、疼痛小，临床操作易掌握，值得在临床中推广应用。但本次因研究样本量小、时间短，今后还需要大规模的临床研究以观察其长久的疗效。

[1] 谢志强,兰宇贞.外用他克莫司治疗男性肛门瘙痒症疗效及其神经源机制分析[J]. 中国中西医结合皮肤病杂志,2012,11(2): 85-87.

[2] 倪春雅,涂平,伍玲慎,等. 他克莫司对特应性皮炎皮损中蛋白酶活化受体2表达的影响[J].中华皮肤科杂志,2012,45(1):22-25.

[3] 贺佳蓓,杨向东.两种方法治疗肛门瘙痒症的疗效观察[J].光明中医,2012,27(12):2459-2460.

[4] 朱国平.肛周封闭配合中药熏洗坐浴治疗肛门瘙痒症[J].浙江中医药大学学报,2008,32(2):234-235.

[5] 吴文江,范小华,于林冲.肛门瘙痒症的临床研究进展[J].云南中医中药杂志,2013,34(6):60-62.

[6] 潘金娥,陈欢.亚甲蓝局部封闭联合中药熏洗治疗肛门瘙痒症的疗效观察[J]. 世界中医药,2013,8(8):893-895.

[7] 张军.皮损点状切除联合中药熏洗治疗肛门瘙痒症43例[J].中医研究,2013,26(9):29-30.

[8] 袁磊,金蕾,张艳.角质形成细胞PAR-2基因siRNA的筛选[J].组织工程与重建外科杂志,2012,8(2):69-72.

INTERVENTION EFFECT OF FUMIGATION AND WASHING WITH WUMEI PILL COMBINED WITH FREE PERIANAL SUBCUTANEOUS OPERATION ON EXPRESSIONS OF PROTEASE-ACTIVATED RECEPTOR-2 IN PERIANAL PRURITUS PATIENTS

HUANG Wen-wu

(Department of Anal and Rectal, The Affiliated Hospital of Jinggangshan University, Ji’an, Jiangxi 343000, China)

Objective：To investigate intervention effect of fumigation and washing with Wumei pill combined with free perianal subcutaneous operation on the expression of protease-activated receptor-2 (PAR-2). And the efficacy of this treatment was evaluated objectively. Methods：50 postoperative patients with perianal pruritus were selected from January 2013 to October 2014 and divided randomly into 3 groups as the experimental group (= 20), the control group (= 20) and the blank group (= 10). The expression of PAR-2 was detected with RT-PCR in all patients’ lesion skin collected on day 1, 3 and 7 after operation. All acquired data were analyzed by statistical software. Results：The expression of PAR-2 in experimental group was much lower than that in the control group and the blank group on day 1, 3 and 7 after operation with significant difference (< 0.05). Conclusion：Wumei pill combined with free perianal subcutaneous operation had a good efficacy in treating perianal pruritus.

PAR-2; perianal pruritus; fumigation and washing with Wumei pill; free perianal subcutaneous operation

1674-8085(2015)05-0100-03

R284.2

A

10.3969/j.issn.1674-8085.2015.05.019

2015-06-06；修改日期：2015-08-18

江西省卫生和计生委课题计划项目(2013A187)

黄文武(1969-)，男，江西安福人，主任医师，主要从事肛肠科临床研究工作(E-mail:13707960100@126.com).