常见稀释粉对猪精液品质的影响试验

赵 媛 （贵州省六盘水市钟山区农业局 553000）

常见稀释粉对猪精液品质的影响试验

赵 媛 （贵州省六盘水市钟山区农业局 553000）

精液保存是人工授精的重要组成部分，为筛选出最适合运用于生产的精液稀释粉，选取了贵州市场最为广泛的比利时CXM、西班牙Bio、美国Vim3种精液稀释粉，进行稀释保存对比试验，检测3种精液稀释粉对精液稀释与保存的效果。结果表明， “CXM”稀释粉对精液稀释及活力保存方面显著优于其余两组 （P＜0.05），且精液保存48h后输精活力还能达到0.72，与其余两者稀释粉相比对精液稀释与保存的效果最佳，适宜在生产中运用。

猪；精液；成活率；精液稀释；人工授精；试验

随着人工授精技术的广泛推广，精液保存技术也越来越受到重视。精液保存是为了延长精子的贮存时间和维持其受精能力，便于长途运输，扩大精液的使用范围，提高种公猪的配种效能。这对于充分发挥良种公畜的遗传潜力，降低传染病的传播几率，加快畜群品种改良步伐具有重要意义[1]。目前精液的保存方法主要是通过稀释后置于15～25℃环境中进行常温保存[2]。由于稀释液所提供的弱酸性环境，使得精子的运动能力和代谢效率受到了一定的抑制，因此常温保存只能在一定时间范围内延长精子的存活时间和保持受精能力。精液保存时间、保存效果是人工授精应用成败的关键因素[3]，因此筛选出保存时间长、保存效果良好的稀释粉，对人工授精技术和母猪繁殖性能的发挥有重要的经济效益[4]。故判断出适合贵州猪场使用的精液稀释粉势在必行，本试验为此展开了研究。

1 材料与方法

1.1 精液与稀释粉

新鲜精液由贵州省六盘水市某种猪场提供。经调查，贵州市场上最常见的精液稀释粉有3种，均采购于农业部定点市场——贵阳市农业生产资料综合批发市场：比利时CXM（产品批 2010-F-016577）、 美国 Vim Semen（产品批号EXP20150103）、 西班牙 Bio Pig（产品批号 24/05/2014-4），各精液稀释粉均在保质期内。

1.2 主要仪器

显微镜、17℃恒温冰箱、恒温电热板、精密温度计、恒温水浴锅等。

1.3 精液的稀释

稀释粉按使用说明进行配比溶解，配制好的精液稀释液置于37.5℃恒温水浴锅内。按 《猪常温精液生产与保存技术规范 （GB/T 25172-2010）》进行稀释[5]，精液稀释后进行精子活力检查，活力不低于0.7时，进行分装。稀释液总量以体积V计，按公式1计算：

V1—采精量，单位ml；

C—精子密度，单位108个/ml；

S—每头份总精子数，单位108个；

V2—每头份剂量，单位ml。

稀释好的精液置于22～25℃下1～2h后，平放入17℃恒温箱内避光保存。保存的精液每隔4～8h摇动一次，防止底层的精子被压死。

1.4 精液稀释后的活力观察

本试验采用间隔12h观察制，稀释后进行首次观察记录，每次观察记录间隔时间为12h。活力检测时，用移液器取稀释好的精液中层精液20ul，置于37.5℃恒温电热板上，在400倍镜下进行检查。每次用移液器取精液3滴，并且每个样滴观察1个视野，视野内的观察选择较为清晰的中层观察。

1.5 数据记录

每次观察结果登记于Microsoft Office Excel 2007，利用Spss 18.0软件进行数据分析，通过对各组间数据差异显著性分析对各组精液稀释粉稀释、保存效果进行评判。

2 结果与分析

2.1 原精液活力检测

经检测，本试验用原精液密度为2.1×108个/ml，活率为0.92，可以进行下一步试验。

2.2 精液稀释保存效果检测

精液经3种精液稀释液稀释后，立即进行检测，检测所得第一次活力观察计时为0h，每间隔12h对保存效果观察一次，每次观察3个样滴，登记于表中，详细记录观察时间、观察到的每组活力，并计算出每组数据的平均值，最终通过Spss 18.0软件进行数据分析，结果见附表。

附表 3种稀释粉不同时间段对精液活力保存效果观察结果

附表显示，各组精液稀释后活力均有所下降，CXM组对保护精液活力不受打击能力显著优于Bio组和Vim组 （P＜0.05），Bio组对保护精液活力不受打击能力与Vim组相比，差异不显著 （P＞0.05）。稀释精液保存至输精最低要求活力0.7时，CXM组保存48h后活力显著优于Bio组和Vim组（P＜0.05），活力可达0.72，Bio组与Vim组保存不到12h时活力已降至0.7以下，差异显著 （P＜0.05）。

3 讨论

精液在稀释时，活力有所下降[6]，其应激因素有来自渗透压、温度、稀释剂的打击，也有稀释速度的打击等[7]。比较3种稀释粉在稀释时对保护精液活力不受打击能力从弱到强为CXM组＜Bio组＜Vim组。

精液稀释液在保存精液时，CXM组保存48h后活力显著优于Bio组和Vim组 （P＜0.05），活力可达0.72，说明CXM对精液活力保存能力在3种猪精液专用稀释粉中最佳。Bio组与Vim组保存不到12h时活力已降至0.7以下，差异显著（P＜0.05）。它们保存稀释精液活力至输精最低要求时的保存时间从强到弱为CXM＞Bio＞Vim。通过附表可看出，精液稀释后活力随保存时间延长而下降，这与陈清森等[8]报道相同。

4 结论

本试验对比了贵州市场上常见3种猪专用精液稀释粉对精液的稀释保存效果，所对比的精液稀释粉在稀释保存时均对原精液有一定的打击，且根据其打击性大小，可以按它们打击性从弱到强排列为CXM精液稀释粉＜Bio精液稀释粉＜Vim精液稀释粉；3中猪专用精液稀释粉在对精液稀释保存的能力从强到弱排列为CXM精液稀释粉＞Bio精液稀释粉＞Vim精液稀释粉；综合分析，CXM稀释粉对精液稀释及活力保存方面显著优于其余两组 （P＜0.05），且48h内输精活力还能达到0.72，与其余两者稀释粉相比对精液稀释与保存的效果最佳，适宜在生产中运用。

[1]鲜红，郑鸿培，等.猪精液常温保存研究进展[J].黑龙江动物繁殖，2004（1）：42-43.

[2]高飞，岳奎忠，杨增明，等.猪精液液态保存的研究进展[J].中国畜牧杂志，2004，40（6）：46-49.

[3]孙德林，等.猪人工授精与产业化工程[M].北京：中国农业科学技术出版社，2005.

[4]吴同山，胡艳娟，张守全，等.不同稀释剂对母猪繁殖性能的影响[J].PIG TODAY，2007（3）：21-23.

[5]GB/T 25172-2010，猪常温精液生产与保存技术规范[S].

[6]俞湘麟，吴昊晏，曹建国，等.不同精液稀释粉与保存温度对猪精液的保存效果[J].上海畜牧兽医通讯，2009（9）：52-53.

[7]霍立军.长期液态保存的公猪精液中精子的活率，线粒体活性，获能和顶体完整性检测[D].哈尔滨：东北农业大学，2002.

[8]陈清森，谭岳华，胡斌，等.四种猪精液稀释粉的比较试验[J].国外畜牧学（猪与禽），2012（8）：65-66.

赵媛，女，中级畜牧师。