半胱氨酸处理血清诊断布病试验

李雁萍

（山西畜牧兽医学校030024）

半胱氨酸处理血清诊断布病试验

李雁萍

（山西畜牧兽医学校030024）

近年来由于广泛应用布病病菌，对控制和消灭牛、羊布病起到了很好的效果。但是注苗后能刺激畜体产生凝集素，在进行血清学检验时，无法区别是自然感染还是免疫后的反应，这给检疫工作带来很大困难。因此采用何种方法鉴别诊断是当前迫切需要解决的问题。据报道，用半胱氨酸处理血清诊断布病效果很好。最近我们对重点地区乡镇县个体养殖户的奶牛和羊群作了试验，获得了很好的效果，现将试验结果报告如下。

1 材料和方法

1.1 材料

（1）半胱氨酸：C3H7O2NS、分子量为121.15，一半胱氨酸盐酸盐C3H7NSO2HCl，分子量为157.61。

（2）氢氧化钠：分子量为40。

（3）试管凝集反应抗元、补体结合反应抗元及阴、阳性血清。

（4）被检血清：注苗后一年以上的奶牛、奶羊、绵羊血清和一少部分布病牛及免疫的羊血清。

（5）生理盐水及10%盐水等。

1.2 溶液配制

1N的氢氧化钠溶液：称取4g氢氧化钠，加入100ml蒸馏水中放冰箱保存备用。临用前用蒸馏水稀

释成0.4N的氢氧化钠溶液。0.2M半胱氨酸：分子量为157.61的半胱氨酸，即称取3.15mg溶于10ml0.4N氢氧化钠溶液中。

1.3 处理血清的方法程序和制定标准

取1：5生理盐水或10%盐水稀释的被检牛、羊血清0.5ml与等量的0.2M半胱氨酸碱性溶液混合，放37℃温箱中，30min后取出，用生理盐水或10%盐水连续稀释血清，然后各管加入0.5ml试管凝集反应抗原。混匀放37℃温箱中18～20h后取出，在室温下放置2h后，根据现行凝集反应标准判定结果。

2 结果

2.1 半胱氨酸凝集反应结果

最近我们对历年经免疫的重点奶场的奶牛和疫情逐年下降的南郊区及疫情稍有上升的清徐县部分乡镇的奶羊和几个重点乡镇养殖户的羊群采血检验结果见表1、2、3。

从以上结果来看，半胱氨酸凝集试验在查不同程度感染地区的牛羊群时，其结果是与疫情相吻合的，在疫情严重地区其羊经过多次检验为阳性，未进行免疫的牛，又如清徐县6个乡村均有阳性反应羊，而有病的3个乡镇的阳性和疑性反应羊，即占该县反应羊的93.68%。从7个重点大城看，有病情的4个乡村即有阳性和疑性反应羊43只。占该县反应羊的45.26%。另外在3个乡是布病暴发区经过多年免疫和消毒，效果好又无病牛，所以基本是清净的。

表1 奶牛半胱氨酸凝集反应检验结果

表2 羊半胱氨酸凝集反应检验结果

表3 重点郊区县村羊反应情况

2.2 半胱氨酸凝集反应与其他血清学方法的比较

这次检验中我们同时用试管凝集反应，半胱氨酸试管凝集反应和补体结合反应3种方法进行比较，结果见表4。

从表4的结果来看，这些经过免疫的牛或羊有部分因连续多次免疫，机体内长期存在低滴度的凝集素，所以有些牛或羊凝集反应表现为阳性和疑性。而经半胱氨酸处理过的血清作凝集反应大部分趋于阴性，其中牛有41头，羊有131只反应为阳性或疑性，同时还可以看出结果基本与补体结合反应是一致的，牛的符合率占64%，我们估计与这些牛的病程长短有关。

表4 半胱氨酸凝集反应与其他血清学方法比较

3 讨论

（1）根据试验证明，半胱氨酸凝集反应方法可以将牛、羊群中自然感染的布病牛、羊检出，其结果与疫性也是相吻合的，所以笔者认为半胱氨酸处理血清作凝集反应，对诊断布病感染与免疫反应有一定的价值。

（2）试验表明，凡半胱氨酸凝集反应为阳性凝集反应均为阳性。笔者认为在大群羊检疫时可以先用凝集反应进行一次筛检，然后将阳性反应血清再用半胱氨基酸凝集反应方法检查。这样可以节省人力、物力和时间。

（3）关于半胱氨酸凝集反应的判定标准和半胱酸凝集反应对免疫后不同时期的羊血清的效果如何，还需进一步进行试验。