牛大力根脂溶性成分的GC-MS分析*

陈德力　弓　宝　刘洋洋　方　草　王德立　郑希龙

中国医学科学院﹠北京协和医学院，药用植物研究所海南分所(海口570311)



·方药纵横·

牛大力根脂溶性成分的GC-MS分析*

陈德力弓宝刘洋洋方草▲王德立郑希龙△

中国医学科学院﹠北京协和医学院，药用植物研究所海南分所(海口570311)

目的：研究牛大力根脂溶性成分。方法：采用溶解提取法、硅胶柱层析分离，获得牛大力根脂溶性提取物F-1、F-2和F-3，结合气相色谱-质谱联用仪，对其化学成分进行分离、鉴定及分析。结果：从F-1中鉴定出31个成分，主要为苯基衍生物(65.71%)和不饱和脂肪酸(18.71%)。从F-2中鉴定出57个成分，主要为苯基及其衍生物(52.36%)和不饱和脂肪酸(27.58%)。从F-3中共鉴定50个成分，主要为苯基及其衍生物(18.04%)、不饱和脂肪酸(14.58%)、饱和脂肪酸(16.57%)以及其他类(23.41%)。结论：该研究首次对牛大力根部的脂溶性成分进行了系统的分析，为进一步开发利用牛大力根资源提供了科学依据。

牛大力(Millettia speciosa Champ.)为豆科崖豆藤属植物美丽崖豆藤的根，别名猪脚笠、山莲藕、大力薯、大力牛等，以根入药，载于《陆川本草》，全年可采[1]。目前，国内外学者对牛大力根及叶化学成分的研究表明，牛大力中含有三萜皂苷、异黄酮、查尔酮、多糖、香豆素、生物碱等类成分，具有抗氧化、增强免疫力、抗炎、抗肿瘤、祛痰平喘等活性，是一味具有多种药理作用和良好保健功效的南药材[2-3]。目前，对牛大力的药用部位根的脂溶性成分未见报道，而牛大力根部脂溶性成分对于其药效活性具有一定的相关性[4]。本项目组对牛大力根的脂溶性成分进行了植化分析，为进一步研究和开发利用奠定基础。

1　仪器与试药

1.1实验材料实验用牛大力根，于2013年10月，采自海南省五指山市毛阳镇，经中国医学科学院药用植物研究所海南分所冯锦东研究员鉴定为Millettia speciosa Champ.的根。采后晒干粉碎，放置干燥暗处贮存备用。

1.2仪器美国安捷伦公司GC-7890A，MS-5975C-MSD，气相色谱质谱联用仪，HP-5MS, 5% Phenyl Methyl Silox柱(30 m×0.25 mm×0.25 μm)。正己烷、石油醚、乙酸乙酯、正丁醇等均为国产AR。薄层色谱和柱色谱硅胶均为青岛海洋化工厂产品。

2　方法与结果

2.1样品制备牛大力根干燥粉末2.5 kg，用70%乙醇(10L× 3)室温提取7d，减压浓缩至无醇味浸膏250 g。将所得浸膏分散于水中成悬浊液，以石油醚、乙酸乙酯、正丁醇依次萃取后，减压浓缩得石油醚萃取物10g。取石油醚萃取物，硅胶柱色谱(200～300 目，40 g)干法上柱，以石油醚-乙酸乙酯(99∶1)梯度洗脱，采用TLC 检测合并相同馏分，得到12个部位，其中F-1(550 mg)和F-2(1.4728 g)为脂溶性成分，溶解于正己烷，过滤，备用。取200 g牛大力根干燥粉末，置于2 L烧瓶中，加入1000 mL石油醚，70oC加热回流萃取4 h，取萃取液过滤，减压浓缩，得到脂溶性成分F-3(2.5654 g)。

2.2GC-MS分析条件气相色谱条件：石英毛细管柱HP-5MS 5% Phenyl Methyl Silox (30 m×0.25 mm×0.25 μm film thickness)，程序升温：从50oC开始，保持4 min，以25oC /min 升温到175oC，再以2oC /min 升温到275oC，保持5 min，载气为He，柱流量1. 0 mL /min，进样口温度250oC，分流比为20:1。质谱条件：EI 源，电离电压70 eV，离子源温度230oC，扫描范围50～500 amu，进样量1. 0 μL。

2.3结果经GC 数据处理机用面积归一法测得各组分的相对质量分数，并用GC-MS 联用技术进行检测，所得质谱图经计算机质谱数据库NIST 11.L检索，并按各峰的质谱裂片图与文献资料和标准图谱核对，从而确定了牛大力根部脂溶性提取物的化学成分，结果见表1。由表1可以看出，含量相对丰富的化合物主要分为5类，为烷烃烯烃、饱和脂肪酸、不饱和脂肪酸、苯基及其衍生物等。除此之外，还含有醇类、维生素、酮类等化合物。从F-1中共鉴定31个成分，主要为苯基衍生物(65.71%)和不饱和脂肪酸(18.71%)。苯基及其衍生物主要为邻苯二甲酸二异辛酯(30.13%)、邻苯二甲酸二丁酯(25.03%)、1,2-苯二甲酸双(苯甲基)酯(5.45%)和1,2-苯二羧酸异丁基酯(4.09%)；不饱和脂肪酸主要为亚油酸乙酯(12.78%)和(Z,Z,Z)- 9,12,15-十八碳三烯酸乙酯(4.48%)。从F-2中共鉴定57个成分，主要为苯基及其衍生物(52.36%)和不饱和脂肪酸(27.58%)。苯基及其衍生物主要为邻苯二甲酸二异辛酯(43.35%)、邻苯二甲酸二仲丁酯(4.89%)、1,2-苯二羧酸异丁基酯(1.64%)和邻苯二甲酸二丁酯(1.55%)；不饱和脂肪酸主要为亚油酸乙酯(19.57%)和油酸乙酯(7.18%)。从F-3中共鉴定50个成分，主要为苯基及其衍生物(18.04%)、不饱和脂肪酸(14.58%)、饱和脂肪酸(16.57%)以及其他类(23.41%)。苯基及其衍生物主要为邻苯二甲酸二丁酯(7.92%)和邻苯二甲酸二异辛酯(8.62%)；不饱和脂肪酸主要为(Z,Z)-9,12-十八烷二烯酸(13.72%)；饱和脂肪酸主要为肉豆蔻酸(13.72%)；其他类主要为豆甾醇(11.87%)。

表1　牛大力脂溶性成分GC-MS分析

续表

66硬脂酸甲酯0.190.300.83SFAE67(Z,Z)-9,12-十八烷二烯酸13.72UFAE68亚油酸乙酯12.7819.57UFAE69(Z,Z,Z)-9,12,15-十八碳三烯酸乙酯4.48UFAE70(E)-9-十八碳烯酸乙酯0.230.37UFAE71油酸乙酯7.18UFAE722-甲基-Z,Z-3,13-十八烷二烯0.33OC739-二十炔1.72AA741-十八烷基磺酰氯0.38OC75硬脂酸乙酯1.362.07SFAE7610-甲基十九烷0.19AA77N-苯基-2-萘胺0.05PDC78二十二烯0.12AA79(E,E)-9,12-十八碳二烯酸甲酯0.11UFAE80(Z,Z)-9,12-十八碳二烯酸甲酯0.11UFAE81(Z)-9-十八碳烯酸甲酯0.92UFAE829-甲基硬脂酸乙酯0.09SFAE83(Z)-14-甲基-8-十六碳烯0.40OC848-甲基十七烷0.35AA85二十四烷0.340.27AA86苯氧基-2,2'-亚甲基[6-(1,1-二甲基乙基-4-甲基]0.17PDC87(6αR-cis)-6H-苯并呋喃[3,2-c]苯并吡喃-6α,11α-二羟基-3,9-二甲氧基6H-Benzofuro[3,2-c][1]0.60PDC88十八烷0.110.32AA89邻苯二甲酸二异辛酯30.1343.358.62PDC90紫檀素1.92OC918-己基十五烷0.18AA922-乙基吖啶酮0.99OC9313-十四碳烯-1-醇醋酸酯0.08SFAE94二十七烷0.05AA95环己巴比妥0.75OC96二十八烷0.31AA97螺甾内酯0.36OC986,8-二氟代-4-羟基-3-羧酸喹啉乙酯1.63OC99角鲨烯0.361.06UFAE100维生素E2.982.61OC101十九烷0.13AA1021,1,3,3,5,5,7,7,9,9,11,11,13,13,15,15-16甲基八硅氧烷Octasiloxane,0.560.165.41OC103O-甲基-(+)-γ-维生素E(+)-γ-Tocopherol,1.64OC104豆甾醇11.87OCAA0.125.055.11SFAE6.811.0416.57PDC65.7152.3618.04UFAE18.7127.5814.58OC7.443.6523.41总计98.7899.6877.71

注：AA为烷烃和烯烃；SFAE为饱和脂肪酸；PDC为苯基及其衍生物；UFAE为不饱和脂肪酸；OC为其他类化合物

3　讨　论

本文首次对牛大力根部的脂溶性成分进行了系统的分析研究，采用GC-MS 检出丰富多样的化学成分，其分离得到的提取物F-1、F-2以及加热回流提取的脂溶性部位F-3的化学组成相似，主要为苯基及其衍生物、不饱和脂肪酸和饱和脂肪酸酯以及维生素E等。牛大力根部脂溶性成分中含有大量的酯类化合物，其中，硬脂酸甲酯、硬脂酸乙酯适用于护肤、护发及美容化妆品中的增溶剂、保湿剂、软化剂以及香料香精、化学驱蚊、灭蚊原料药的溶剂。不饱和脂肪酸酯，如油酸甲酯、油酸乙酯、亚油酸甲酯、亚油酸乙酯、十八碳二烯酸甲酯和十八碳三烯酸乙酯等，具有降血脂、抗氧化、抗炎、抗衰老以及防止动脉硬化等活性，广泛用于医药保健产品等开发[5-6]。同时，牛大力根部脂溶性成分中含有3%左右的维生素E，是最主要的抗氧化剂之一，在防治心脑血管疾病、肿瘤、糖尿病及其他并发症、中枢神经系统疾病、运动系统疾病、皮肤疾病以及抗衰老等方面具有广泛的作用。本次研究阐明了牛大力根部脂溶性成分的物质基础，为其药理作用的深入研究开发提供了较好的理论基础，同时，研究表明牛大力根部作为岭南地区著名的药食两用植物，其药效活性与其不饱和脂肪酸酯以及维生素E等具有一定的相关性，说明牛大力根部脂溶性成分具有较好的开发价值。

[1] 广东中药志编辑委员会. 广东中药志[M]. 广州:广东科学技术出版社，1991.

[2] 国家中医药管理局《中华本草》编委会. 中华本草[M]. 上海:上海科学技术出版社，1999.

[3] 韦玉燕，巫繁菁，曾海生，等. 牛大力研究概况[J]. 广西科学院学报，2010，26(3)：380-382.

[4] 黎瑞汝，陈占科，高 珊，等. 中药牛大力的研究进展[J]. 亚太传统医药，2010，6(12)：165-167.

[5] 赖富丽，王祝年，王建荣，等. 牛大力藤叶脂溶性成分的GC-MS分析[J]. 热带作物学报，2009，30(5)：714-717.

[6] 张正祥，李宝莉，陈雅慧，等. 复方酸枣仁油栀子油软胶囊脂肪酸成份测定[J]. 陕西医学杂志，2009，38(7)：792-793.

(收稿2015-03-20；修回2015-04-30)

GC-MS analysis of liposoluble constituents from the radix of Millettia speciosa Hainan Branch Institute of Medicinal Plant Development, Chinese Academy of Medical

Sciences & Peking Union Medical College (Haikou 570311)

Chen DeliGong BaoLiu Yangyanget al

Objective: To study the lipophilic chemical constituents of the radix of Millettia speciosa. Methods: Liposoluble extracts F-1, F-2 and F-3 were isolated from the radix of Millettia speciosa by solvent extraction method and silica column chromatography, and their chemical composition was identified and analyzed by GC-MS. Results：31 compounds were found in the extract F-1, mainly comprising phenyl derivatives and related compounds (65.71%) and unsaturated fatty acids and esters (18.71%). 57 compounds were found in the extract F-2, mainly comprising phenyl derivatives and related compounds (52.36%) and unsaturated fatty acids and esters (27.58%). 50 compounds were found in the extract F-3, mainly comprising phenyl derivatives and related compounds (18.04%), unsaturated fatty acids and esters (14.58%), saturated fatty acids and esters (16.57%) and other compounds (23.41%). Conclusion：The present study provides a chemical basis for Millettia speciosa.

Chemical Compositions (TCD)@ Millettia@GC-MS

R282

Adoi:10.3969/j.issn.1000-7369.2015.09.076

*中央级公益性科研院所基本科研业务费专项(2013HNB02)

海南省自然科学基金(813242)

▲海南省农垦总医院(海口 570311)

主题词 中药化学成分 @牛大力 @GC-MS分析