复方补筋片制备与质量标准研究

2015-10-26林向前

中国药业 2015年24期

关键词：瓶塞丹皮锥形瓶

林向前

（福建省漳州市中医院，福建漳州363000）

复方补筋片制备与质量标准研究

林向前

（福建省漳州市中医院，福建漳州363000）

目的建立复方补筋片的质量控制标准。方法采用薄层色谱法对处方中的牡丹皮、当归、木香进行定性鉴别，用紫外分光光度法测定处方中牡丹皮中的丹皮酚含量。结果薄层色谱检出牡丹皮、当归、木香的特征斑点；丹皮酚质量浓度在5.80～34.80μg/mL范围内与吸光度呈良好线性关系（r=0.997 4），平均加样回收率为99.86%，RSD为0.07%（n=6）。结论该方法操作简捷准确、重复性好、精密度高，可用于复方补筋片的质量检测与控制。

复方补筋片；质量标准；薄层色谱法；紫外分光光度法；丹皮酚；当归；去氢木香内酯

复方补筋片是我院中医骨伤科经典中药制剂，在我院临床使用有近60年历史。该制剂由党参、菟丝子、山药、蛇床子、木香等十几味中药材组成，具有补脾益肾、行气理血、强筋健骨之功效，常用于治疗跌打闪筋瘀滞、筋骨疼痛及肝肾亏损之腰膝冷痛、关节不利。为控制其质量，笔者参考相关文献，对复方补筋片的质量标准进行了研究，现报道如下。

1　仪器与试药

2F-2型三用紫外仪；BP211D型电子天平（Sarhorius）；UV-160A型紫外分光光度计（Shimadzu）；KQ5200DB型超声波清洗器（昆山市超声仪器有限公司）。丹皮酚对照品（中国药品生物制品检定所，批号为110708-200505）；当归对照药材（批号：927-9303，中国药品生物制品检定所）；去氢木香内酯对照品（批号为1526-200001，中国药品生物制品检定所）；薄层用硅胶G（青岛海洋化工有限公司）；复方补筋片（本院制剂中心，批号分别为20120601，20121201，20130601）；水为重蒸馏水；试剂均为分析纯。

2　方法与结果

2.1处方与制备

处方：牛膝、肉苁蓉、菟丝子、木瓜、牡丹皮、当归、党参、山药、熟地、蛇床子、丁香、木香。共制1 000片。

制备工艺：取处方各药炮制合格，称量备齐。取处方中的蛇床子、牛膝、肉苁蓉、菟丝子、木瓜加水提取3次，合并3次煎提液，浓缩至稠膏备用（热测相对密度1.15～1.30）。取处方中余下的各药烘干，粉碎过100～120目筛备用。药用淀粉12.5 g与上述稠膏共煮成淀粉浆备用。取上述淀粉浆加入细粉中搅拌成软材，挤压过20目筛得湿颗粒。取上述湿颗粒置于60～80℃烘箱中，烘干（含水量为4.0%～6.0%）。取干颗粒经整粒后加入12.5 g滑石粉及硬脂酸镁1.25 g搅拌均匀，压片，每片0.3 g。

2.2一般质量控制

性状：灰棕色片，气香，味微苦。

检查：按复方补筋片片剂项下相关规定，对3批样品质量差异、崩解时限、微生物限度［1］进行检查，结果均符合规定。

2.3定性鉴别［1］

牡丹皮：取样品7片，捣碎成细粉，放入带有瓶塞的锥形瓶中，加入20mL乙醚，盖紧瓶塞，用超声波提取20min，过滤，滤液蒸发干燥，干燥物加入2mL丙酮搅拌使其溶解，作为供试品溶液。另取丹皮酚对照品适量，加丙酮配制成质量浓度为2 g/L的溶液，作为对照品溶液。按拟订方法制备缺中药牡丹皮饮片的阴性对照品溶液。照2010年版《中国药典（一部）》附录ⅥB薄层色谱法［1］试验，吸取上述3种溶液各10μL，分别点于硅胶G薄层板上，以正己烷-醋酸乙酯（9∶1）为展开剂，展开，取出，晾干，喷以盐酸酸性5%三氯化铁乙醇溶液，加热至斑点显色清晰。供试品溶液色谱中，在与对照品溶液色谱相应位置上显示相同颜色的斑点，阴性无干扰（见图1 A）。

当归［1］：取样品7片，捣碎成细粉，放入带有瓶塞的锥形瓶中，加入20mL正己烷，盖紧瓶塞，用超声波提取20min，过滤，滤液蒸发干燥，干燥物加入2mL正己烷搅拌使其溶解，作为供试品溶液。另取当归对照药材1 g，按拟订方法制备成对照药材溶液。同法制备缺中药当归饮片的阴性对照品溶液。照2010年版《中国药典（一部）》附录VIB薄层色谱法［1］试验，吸取上述3种溶液各5μL，分别点于同一硅胶G薄层板上，以乙酸乙酯-正己烷（1∶9）为展开剂，展开，取出，晾干，置紫外光灯（365 nm）下检视。供试品溶液色谱中，在与对照药材溶液色谱相应位置上显示相同颜色的斑点，阴性无干扰（见图1 B）。

木香［1］：取样品7片，捣碎成细粉，放入带有瓶塞的锥形瓶中，加入20mL石油醚（60～90℃），盖紧瓶塞，用超声波提取20min，过滤，滤液蒸发干燥，干燥物加入5mL三氯甲烷搅拌使其溶解，作为供试品溶液。另取去氢木香内酯对照品适量，加三氯甲烷配制成质量浓度为1 g/L的溶液，作为对照品溶液。按拟订方法制备缺中药木香饮片的阴性对照品溶液。照2010年版《中国药典（一部）》附录ⅥB照薄层色谱法［1］试验，吸取上述3种溶液各5μL，分别点于同一硅胶G薄层板上，以环己烷-三氯甲烷（1∶5）为展开剂，展开，取出，晾干，喷以1%香草醛硫酸溶液，加热至斑点显色清晰。供试品溶液色谱中，在与对照品溶液色谱相应位置上显示相同颜色的斑点，阴性无干扰（见图1 C）。

图1　薄层色谱图

2.4丹皮酚含量测定

2.4.1溶液制备

取复方补筋片样品20片，捣碎成细粉，称取约3 g的复方补筋片细粉，精密称定质量，放入带有瓶塞的锥形瓶中，加入50mL甲醇，盖紧瓶塞，准确称定总质量，超声提取30min，再称定总质量，用甲醇补足减失的质量，摇匀，滤过，即作为复方补筋片供试品溶液。同法制得空白对照品溶液［2］。称取丹皮酚对照品适量，减压干燥，加甲醇制成含丹皮酚0.145 g/L的溶液，作为对照品贮备液［2］。

2.4.2测定波长选择［3］

精密量取丹皮酚贮备液1mL，置25mL容量瓶中，加甲醇稀释至25mL，摇匀，即得丹皮酚对照品溶液（质量浓度为5.8μg/mL）［3］。以甲醇为空白，在波长200～400 nm范围内检测对照品、供试品、空白对照品溶液的紫外吸收光谱。结果显示，丹皮酚对照品溶液和供试品溶液于274 nm波长处有最大吸收峰，空白对照品溶液无干扰。故选择274 nm为测定波长［3］。

2.4.3方法学考察

线性关系考察：精密量取标准对照品贮备液1，2，3，4，5，6 mL；分别置25 mL具塞锥形瓶中，用甲醇稀释至25 mL，摇匀，配制成一系列质量浓度的溶液，以甲醇溶液为空白对照品溶液，于274 nm处测定吸光度（A）［3］。以A为纵坐标（Y）、质量浓度（C）为横坐标（X）作线性回归，得回归方程：A=0.066 4C+ 0.024 5（n=6）。丹皮酚质量浓度在5.80～34.80μg/mL范围内与A呈良好线性关系。

精密度试验：取质量浓度为17.40μg/mL丹皮酚对照品溶液，同法重复测定6次。结果的RSD为0.06%（n=6），表明仪器精密度良好。

稳定性试验［3］：取同一供试品溶液，分别于0，2，4，8，16，24 h时依法测定。结果的RSD为0.25%（n=6），表明供试品溶液在24 h内稳定。

重复性试验：精密称取同一批供试品6份，按拟订方法分别制备供试品溶液，于274 nm波长处平行操作测定［3］，结果的RSD=1.05%（n=6），表明方法重复性良好。

加样回收试验［3］：精密量取对照品贮备液1，2，3mL各2份，分别装入50 mL具塞锥形瓶中，然后往锥形瓶中加入10 mL已知质量浓度的供试品溶液，用配制对照品溶液稀释剂调整体积至50 mL。依法测定，结果见表1。