氨溴索亚微乳理化性质研究

张会丽，李阳杰，李书平

（郑州工业应用技术学院，河南郑州451150）

氨溴索亚微乳理化性质研究

张会丽，李阳杰，李书平

（郑州工业应用技术学院，河南郑州451150）

目的探讨氨溴索亚微乳的理化性质。方法在氨溴索亚微乳处方和制备工艺的基础上，对乳剂类型、粒径、pH、黏度等理化性质进行考察。结果制备的乳剂外观为乳白色，3批样品的粒径分别为169.9，170.0，166.8 nm，平均pH为8.12，8.19，8.23，25℃时黏度为（1.9±0.1）mPa·s。结论氨溴索亚微乳注射剂的理化性质稳定，符合静脉注射要求。

氨溴索；亚微乳；性质

盐酸氨溴索是盐酸溴己新在人体内的代谢产物，有促进黏痰排除及溶解分泌物的特性，促排痰作用比溴己新强，可预防新生儿呼吸窘迫综合征（NRDS）的发生［2］，辅助治疗小儿支气管肺炎［1-3］。吸入盐酸氨溴索、沙丁胺醇、N-乙酰半胱氨酸，可通过有效促进结核病患者排痰来增加抗酸杆菌（AFB）涂片的阳性诊断率［4］。国内目前上市的盐酸氨溴索口服制剂起效慢，缓释胶囊对于不能口服给药的患者无法使用，注射剂又需反复给药。注射用亚微乳是主要以植物油为油相、以磷脂为乳化剂的O/W型乳剂，属于热力学不稳定体系［5］。其作为脂溶性药物的良好载体，不仅具有增加药物稳定性、减轻不良反应、靶向释药作用、易于实现工业化等特点，还能提供适当的能量和必需脂肪酸［6］，在体内迅速分布，能减缓机体对药物的消除［7］，现已广泛应用于临床。笔者以盐酸氨溴索为原料药制备脂溶性氨溴索，再制备水包油的乳剂，作为研究平台考察了脂溶性药物制成O/W亚乳剂后的缓释效果，并对其理化性质及初步稳定性进行考察。

1　仪器与试药

Mettler Toledo AT460型电子天平，Mettler Toledo AG245型电子天平（瑞士Mettler-Toledo仪器公司）；Professional Meter PP-50型电位与pH计（德国Sartorius公司）；NDJ-1型旋转黏度计（上海天平仪器厂）；BI-9000AT型光子相关光谱测定仪（美国Brookhaven公司）；DDS307型电导率仪（上海雷磁仪器厂）；LC-10AT型高效液相色谱仪（日本岛津公司，Anastar工作站）；Diamonsil®C18色谱柱（250mm×4.6mm，5μm，重庆迪马公司）。盐酸氨溴索（北京太洋药业有限公司）；二甲基黄染色剂（天津市染化四厂）；二甲酚橙染色剂（天津市化学试剂一厂）；正丁醇（天津兴通精细化工有限公司）；注射用大豆油（浙江龙游聚兴粮油医药化工有限公司）；其余试剂均为分析纯或色谱纯。

2　方法与结果

2.1亚微乳注射剂制备

氨溴索加入油相，70℃保温；甘油、乳化剂加入水中，70℃保温；水相和油相在70℃混合乳化，19 000 r/min均质离心5min，将初乳在仪表压力40，60，80 psi下通过微射流仪2次，在氮气流下灌封于10mL安瓿，用恒温水浴振荡器进行灭菌。

2.2氨溴索含量测定

2.2.1色谱条件

色谱柱：Diamonsil®C18柱（250mm×4.6mm，5μm）；检测波长：248 nm；柱温：30℃；流速：1.0mL/min；流动相：甲醇；进样量：20μL。

2.2.2方法学考察

专属性试验：取空白乳剂、供试品溶液和对照品溶液分别进样，记录色谱图，考察其他成分是否干扰测定。由图1可见，氨溴索和乳剂中其他成分分离较好，表明方法专属性好。

图1　高效液相色谱图

线性关系考察：取氨溴索适量，精密称定，用流动相溶解成质量浓度为1 g/L的贮备液。精密量取贮备液，用流动相稀释成质量浓度为5，10，20，30，50，80，100μg/mL，进样20μL测定。以氨溴索的峰面积（A）为纵坐标、质量浓度（C）为横坐标进行线性回归，得回归方程A=56991C+249697，r=0.9996（n=7）。结果表明，氨溴索质量浓度在5～100μg/mL范围内与峰面积线性关系良好。

精密度试验：线性关系考察项下质量浓度为30μg/mL的氨溴索溶液重复进样6次，测定峰面积。结果的RSD为0.41%（n=6），表明仪器精密度良好。

重复性试验：精密量取同一批样品6份，每份1mL，置10mL容量瓶中，加甲醇适量超声破乳，定容；精密量取稀释液1mL，置10mL容量瓶中，加甲醇适量溶解，定容；取上述样品各20μL进样测定，计算氨溴索含量。结果平均含量为2.47 g/L，RSD为0.60%（n=6），表明方法重复性良好。

稳定性试验：取供试品，用流动相配制成质量浓度为10μg/mL的溶液，测定其8 h内的稳定性。结果的RSD为0.44%，表明供试品溶液在8 h内稳定。

加样回收试验：分别称取约20，25，30mg氨溴索各3份，置10mL容量瓶中，加入适量空白乳剂，超声处理。待溶解完全后，放冷至室温，加空白乳剂定容至刻度，得加样的乳液。依法制配供试品溶液，进样测定，计算回收率，结果见表1。

表1　氨溴索加样回收试验结果（n=9）

2.2.3样品含量测定

精密量取已灭菌自制乳剂（批号分别为20130515，20130516，20130517）各1mL，置10mL容量瓶中，加甲醇适量超声破乳，定容；精密量取稀释液1mL，置10mL容量瓶中，加甲醇适量溶解，定容，得供试品溶液；另精密称取氨溴索2.5mg各3份，置10mL容量瓶中，加甲醇适量超声破乳，定容；精密量取稀释液1mL，置10mL容量瓶中，加甲醇适量溶解，定容，得对照品溶液。取上述溶液各20μL进样，按外标法计算氨溴索含量。结果3批样品的含量分别为2.55，2.48，2.46 g/L。

2.3理化性质考察

乳剂类型鉴别：染色法是利用油性染料二甲基黄和水性染料二甲酚橙在乳液中黄色或橙色扩散快慢来判断乳剂类型，若黄色扩散快于橙色则为W/O型乳剂，反之为O/W型。结果，乳剂橙色扩散快于黄色，乳剂为O/W型。在乳剂中分别滴加2滴水和2滴大豆油，观察水和大豆油的分散快慢情况。若大豆油扩散快于水则为W/O型乳剂，反之为O/W型。结果乳剂水扩散快于大豆油，乳剂为O/W型。

pH：注射剂的pH要求与血液相近，一般为4～9，对于注射用乳剂，较适宜的pH为6～7；乳剂由于在贮存过程中，甘油酯和磷脂的水解会导致乳剂pH的降低，故弱碱性的pH较适宜［8］。在初乳通过微射流仪前用0.2mol/L氢氧化钠溶液调节pH，用Professional Meter PP-50酸度计测定，控制其pH约为8.5，灭菌后再次测定。取已灭菌自制乳剂（批号分别为20130515，20130516，20130517）各10 mL，用Professional Meter PP-50酸度计测定，3批样品pH分别为8.12，8.19，8.23，符合要求。

流变学性质：乳剂粒径大小及分布、分散相的用量等均影响到乳剂的黏度，作为注射乳剂应具有的良好的流动性，因而研究乳剂制剂的流变学性质对制剂的质量、贮存和稳定性等具有重要意义。采用NDJ-1型旋转黏度计，在25℃条件下，将待测乳剂置于直径大于7 cm的烧杯中，将选定的转子浸入溶液中，至液面标志与液面相平，开启黏度计约60 s，待指针稳定后，测得黏度η。用旋转黏度计测定空白乳剂和载药乳剂在25℃时的黏度。分散相的相体积分数、分散介质的黏度、乳化剂的性质和用量、乳滴的大小和粒径分布等对乳剂的黏度都会发生影响。用同一转子，测定25℃不同转速下乳剂的黏度，得到流变学曲线。见图2。可见，黏度不随转速的改变而变化，该乳剂为牛顿流体。结果3批样品的黏度为（1.9±0.1）mPa·s。

图2　不同转速下的黏度曲线

粒径：乳化剂的种类及其用量是影响乳滴粒径的重要因素［9］，乳剂的稳定性与粒径及其分布有相关性，粒径越小、粒径分布越窄，乳剂越稳定［10］。取自制乳剂（批号分别为20130515，20130516，20130517）各2.5 mL，用双蒸水稀释至澄清透明，以BI-9000AT型光子相关光谱测定仪进行测定。结果3批样品粒径分别为169.9，170.0，166.8 nm。

3　讨论

乳剂的类型可用稀释法进行鉴别，O/W型乳剂可被水稀释，W/O型乳剂可以被油稀释。也可用染色法进行鉴别，O/W型乳剂用水溶性染料染色，在显微镜下可观察到外相被染色，用油溶性染料染色，在显微镜下可观察到内相被染色；W/O型乳剂则相反。用染色法、稀释法分别对乳剂进行鉴别，结果均为O/W型乳剂。

乳剂的稳定性与粒径及其分布有关，粒径越小、粒径分布越窄，乳剂越稳定。由粒径测定结果可见，所制备的乳剂为亚微乳，粒径相对较集中，所制备的乳剂较稳定。

含量测定时，根据药物和磷脂的溶解性，选用甲醇，既能溶解氨溴索又能溶解大豆磷脂；乳剂用甲醇稀释50倍时不澄清，稀释100倍时，呈澄明溶液，故将乳剂用甲醇稀释100倍后测定含量。

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Physicochem ical Properties of Am broxol Subm icron Em ulsion

Zhang Huili，Li Yangjie，Li Shuping
（Zhengzhou University of Industrial Technology，Zhengzhou，Henan，China 451150）

Objective To investigate the physicochemical properties of ambroxol submicron emulsion.M ethods On the basis of the formulation and the preparing technique of ambroxol submicron emulsion，the emulsion type，particle size，pH，viscosity were investigated. Results The submicron emulsion was milkiness，The particle sizes of the prepared ambroxol submicron emulsion in the 3 batches were 169.9，170.0，166.8 nm，respectively，while the average pH were 8.12，8.19，8.23，respectively，and the viscosity was（1.9±0.1）mPa·s at 25℃. Conclusion The physicochemical properties of ambroxol submicron emulsion is stable and can meet the standards of injection preparation.

ambroxol；submicron emulsion；property

R974+.1；TQ460.7+2

A

1006-4931（2015）24-0066-03

张会丽（1972-），女，河南新郑人，硕士研究生，讲师，主管药师，研究方向为药物新剂型，（电子信箱）15838202638@139.com。

2014-09-10；

2015-09-28）