分子排阻色谱法测定马罗匹坦注射液中磺丁倍他环糊精钠的含量

于晓辉等

摘要[目的] 建立马罗匹坦注射液中磺丁倍他环糊精钠的含量测定方法。[方法] 采用分子排阻色谱法，以0.1 mol/L硝酸钾溶液-甲醇（65∶35）为流动相，采用分子排阻色谱法检测马罗匹注射液中磺丁倍他环糊精钠的含量。[结果] 磺丁倍他环糊精钠与相邻峰的分离度均大于3.0；在6～180 μg范围内峰面积与浓度呈良好的线性关系（r=0.999 9，n=8）；在80%、100%、120% 3种添加水平下的平均回收率分别为95.96%（RSD=0.5%，n=3）、98.41% （RSD=0.4%，n=3）、97.77%（RSD=0.5%，n=3）。[结论] 该方法专属性强、准确度好、适应范围宽，可作为马罗匹坦注射液中磺丁倍他环糊精钠的含量测定方法。

关键词磺丁倍他环糊精钠；马罗匹坦注射液；分子排阻色谱法

中图分类号S859.79文献标识码

A文章编号0517-6611（2015）21-154-03

马罗匹坦是1型神经激肽（NK1）的受体拮抗剂，可通过抑制P物质（引起呕吐的关键性神经递质）而作用于中枢神经系统。马罗匹坦注射液可以用于预防和治疗犬的急性呕吐。

磺丁倍他环糊精钠（SBECD）作为赋形剂添加于马罗匹坦注射液中，由于其对含氮类药物具有特殊的亲和力和包合性，因此主要用于提高药物的溶解性和生物利用度。但是，有研究发现重复给药时容易出现肾脏蓄积，因此需要对制剂中SBECD的含量进行准确控制。笔者采用分子排阻色谱法测定了马罗匹坦注射液中SBECD的含量，并对其进行了方法学考察。

1材料与方法

1.1材料

1.1.1主要试剂。磺丁倍他环糊精钠对照品，纯度95.8%，购自美国辉瑞公司；马罗匹坦注射液购自美国辉瑞公司；甲醇，色谱纯；水为超纯水；其他试剂均为分析纯。

1.1.2主要仪器。高效液相色谱仪， 2695型，配有410示差折光检测器和EmpowerⅡ工作站，为美国Waters公司产品；电子分析天平，AE240型，为瑞士METTLERTOLEDO公司产品。

1.2方法

1.2.1色谱条件。色谱柱为YMCDiol60（8.0 mm×300 mm，5 μm），柱温为35 ℃；流动相为0.1 mol/L硝酸钾溶液-甲醇（65∶35），流速2.0 ml/min；示差折光检测器，检测器温度为35 ℃；进样量为10 μl。

1.2.2溶液制备。

1.2.2.1SBECD对照品储备液。取SBECD对照品约600 mg，精密称量，置于10 ml量瓶中，加入流动相使溶解并稀释至刻度，摇匀，即得浓度约为60 mg/ml的对照品储备液。

1.2.2.2样品溶液。精密量取马罗匹坦注射液1 ml，置于10 ml量瓶中，用流动相稀释至刻度，摇匀，即得样品溶液。

1.2.2.3陰性样品溶液。按照马罗匹坦注射液的处方，配制不含有SBECD的阴性样品；按照“1.2.2.2”中样品溶液的制备方法，配制阴性样品溶液。

1.2.3方法学考察。

1.2.3.1专属性考察。精密量取对照品储备液1 ml，置于10 ml量瓶中，用流动相稀释至刻度，即得对照品溶液。精密量取对照品溶液和阴性样品溶液各10 μl，按照“1.2.1”中的色谱条件进行测定，记录色谱图。

1.2.3.2线性关系考察。精密量取对照品储备液0.1、0.2、0.3、0.5、1.0、1.5、2.0、3.0 ml，分别置于10 ml量瓶中，用流动相稀释至刻度，摇匀，即得到浓度分别为0.6、1.2、1.8、3.0、6.0、9.0、12.0、18.0 mg/ml的对照品溶液。按照“1.2.1”中的色谱条件，进样测定，记录色谱图，以浓度X（mg/ml）对峰面积Y作图，并进行统计学处理。

1.2.3.3精密度试验。精密量取对照品储备液1 ml置于10 ml量瓶中，用流动相稀释至刻度，摇匀，即得到浓度约为6 mg/ml的对照品溶液，按照“1.2.1”中的色谱条件进样测定，连续进样6次，计算SBECD峰面积的RSD。

1.2.3.4稳定性试验。 取制备的样品溶液，分别于0、8、16、24、32、48 h按照“1.2.1”中的色谱条件进样测定，计算SBECD峰面积的RSD。

1.2.3.5加样回收率试验。按照“1.2.1”中的色谱条件，对马罗匹坦注射液中SBECD的含量进行测定，结果其含量为62.13 mg/ml。

精密量取马罗匹坦注射液0.5 ml，共量取9份，分别置于10 ml量瓶中；每3份为1组，将上述9份样品分为3组，每组分别精密加入SBECD对照品储备液0.4、0.5、0.6 ml，用流动相稀释至刻度，摇匀，即得到添加水平约为80%、100%和120%的3组样品，按照“1.2.1”中的色谱条件分别进样测定，计算加样回收率。

1.2.3.6检出限和定量限。按照“1.2.2”中对照品储备液的配制方法制备不同浓度的SBECD对照品溶液，按照“1.2.1”中的色谱条件进样测定，计算信噪比。信噪比为3和10时的浓度即分别为SBECD的检出限和定量限。

1.2.4样品含量的测定。 按照“1.2.2”中对照品储备液的配制方法，制备浓度约为6 mg/ml的SBECD对照品溶液，精密吸取样品溶液和对照品溶液各10 μl，按照“1.2.1”中的色谱条件进行测定，记录色谱图，按照外标法以峰面积计算马罗匹坦注射液中SBECD的含量。

2结果与分析

2.1方法学考察

2.1.1专属性考察。从图1可以看出，阴性样品在SBECD色谱峰位置处无吸收峰，表明样品中的其他成分对SBECD的测定结果无干扰。