凤仙花中槲皮素和山奈酚的薄层色谱鉴别

侯文欣 魏红立 方新平 徐利亚 孟宪磊

摘要 [目的]建立凤仙花药材中槲皮素、山奈酚的提取方法，对凤仙花药材中槲皮素、山奈酚进行薄层鉴别。[方法]采用羧甲基纤维素钠硅胶G 板分离凤仙花药材中槲皮素、山奈酚成分。[结果]供试品色谱在与对照品色谱相应位置上显相同颜色的斑点，可用于鉴别凤仙花中的槲皮素和山奈酚。[结论]薄层色谱方法简便、专属性强、重现性好，可用于凤仙花药材的鉴别。

关键词 凤仙花；槲皮素；山奈酚；薄层色谱；鉴别

中图分类号 S567 文献标识码

A 文章编号 0517-6611（2015）34-146-02

凤仙花为凤仙花科植物凤仙（Impatiens balsamina L.）的干燥花[1]，尚未被《中国药典》收载，凤仙花具有祛风除湿、活血定痛功效，含有香豆素类、黄酮类等多种化学成分，其中槲皮素和山奈酚是其主要的黄酮化合物[2]。槲皮素有抗炎、抗氧化、抗癌和抗突变等多种功能[3]，山奈酚具有止咳祛痰和消炎等作用[4-5]，具有很高药用价值。该试验考察了不同溶剂、不同提取方法提取槲皮素及山奈酚，并尝试不同展开剂和薄层板比较，最终确定了用于凤仙花中槲皮素及山奈酚的简捷、快速、分离效果好的薄层色谱鉴别方案，为凤仙花的质量控制提供了可靠依据。

1 材料与方法

1.1 材料 凤仙花（采于河北邢台将军墓）；槲皮素对照品（中国食品药品检定研究院，批号100081-200907）；山奈酚对照品（中国食品药品检定研究院，批号110861-200808）；电子天平（sartorius BS210S）；超声波清洗机（昆山市超声仪器有限公司）；硅胶G薄层色谱板（青岛海洋化工厂），羧甲基纤维素钠硅胶G（天津思利达科技有限公司），高效硅胶G（青岛市基亿达硅胶试剂厂）；试剂均为国药集团化学试剂有限公司生产，均为分析纯。

1.2 样品制备 取凤仙花药材，粉碎，取粉末0.5 g，加甲醇-稀盐酸（4∶1）20 ml，超声处理30 min，滤过，滤液加水20 ml，用乙酸乙酯振摇提取3次，每次20 ml，合并乙酸乙酯液，蒸干，残渣加甲醇3 ml溶解，作为供试品溶液。

1.3 对照品溶液制备 取槲皮素和山奈酚对照品，加甲醇分别制成浓度为0.2和1 mg/ml的溶液，作为对照品溶液。

1.4 色谱方法 照薄层色谱法（中国药典 2010年版一部附录VI B）试验，分别吸取上述样品及对照品溶液各2 μl，分别点于同一羧甲基纤维素钠硅胶G薄层板上， 以三氯甲烷-乙酸乙酯-甲酸（10∶3∶1）为展开剂，展开，取出，晾干，喷以2%三氯化铝乙醇溶液，置紫外光灯（365 nm）下检视。

2 结果与分析

由图1可见，供试品色谱在与对照品色谱相应位置上显相同颜色的斑点。表明该方法方便、快捷，斑点圆整、清晰，分离效果佳，可作为凤仙花中槲皮素及山奈酚的鉴别方法。

注：2为槲皮素对照品；4为山奈酚对照品；1、3、5、6、7为凤仙花样品。

图1 凤仙花TLC鉴别图谱

3 讨论

3.1 提取方法的比较 该试验尝试了多种提取方法：①以甲醇-稀盐酸（4∶1）为溶剂，超声处理30 min，滤过，滤液加水20 ml，用乙酸乙酯振摇提取3次，每次20 ml，合并乙酸乙酯液，蒸干，残渣加甲醇3 ml溶解；②以甲醇为溶剂超声处理30 min，滤过，滤液浓缩；③以乙醇为溶剂超声处理30 min，滤过，滤液浓缩；④以硼酸饱和的水溶液为溶剂，回流1 h，滤过，滤液加稀盐酸调pH至2～3，用石油醚（60～90 ℃）振摇提取3次，每次25 ml，弃去石油液，用乙醚振摇提取3次，每次25 ml，合并乙醚液，挥干，残渣加甲醇1ml使溶解。比较上述4种提取方法（图2）发现，以方法①所得色谱图斑点清晰、圆整，指纹斑点丰富，分离效果佳。

3.3 不同薄层板的比较 试验考察了青岛海洋化工厂硅胶G板（图4a）、青岛市基亿达硅胶试剂厂硅胶G板（图4b）、天津思利达科技有限公司羧甲基纤维素钠硅胶G板（图1），结果发现，利用羧甲基纤维素钠硅胶G板的分离效果最好。

参考文献

[1]

河北省食品药品监督管理局.河北省中药饮片炮制规范[M].北京：学苑出版社，2003：30.

[2] 胡喜兰，韩照祥，刘玉芬，等.凤仙花不同提取物中山奈酚的测定[J].分析实验室，2007，26（5）：33.

[3] 俞一心， 戈升荣， 王桂珍.槲皮素及其衍生物的药理作用研究进展[J].中药材， 2003， 26（12）：902.

[4] 王晓飞，于玲，杜华霜，等.三白草中槲皮素的薄層色谱鉴别[J].中国民族民间医药，2010（23）：61.

[5] 胡喜兰，程青芳，尹福军，等.凤仙花中山萘酚的提取、分离与纯化[J].时珍国医国药，2010，21（4）：932-933.