Stathmin1蛋白在胃癌演变过程中的表达意义及与幽门螺杆菌感染关系

胡桂梅　叶国良　秦丽君

Stathmin1蛋白在胃癌演变过程中的表达意义及与幽门螺杆菌感染关系

胡桂梅叶国良秦丽君

目的 探讨Stathmin1蛋白在胃癌演变过程中的表达变化，了解其与幽门螺杆杆菌的关系。方法 应用免疫组化法检测进展期胃癌、早期胃癌、上皮内瘤变、慢性胃炎黏膜组织中Stathmin1蛋白的表达水平。用14C呼气试验和组织学改良Giemsa染色方法联合检测胃癌中幽门螺杆菌（Hp）感染情况，分析Stathmin1蛋白与幽门螺杆菌感染的关系。结果 Stathmin1在胃癌中表达与胃炎组、上皮内瘤变组比较差异有统计学意义（P＜0.05），与早期胃癌组比较差异无统计学意义（P＞0. 05）。胃癌中stathmin1的表达与年龄、性别无明显关系，与分化类型、浸润深度、淋巴转移、TNM分期差异有统计学意义（P＜0.05），Hp感染者stathmin1蛋白表达量明显增多（P＜0.05）。结论 Stathmin1蛋白表达与肿瘤浸润转移恶性生物学行为的指标呈正相关，可作为反映胃癌恶性表型及预后重要指标，亦可作为早期胃癌的筛查指标。

胃癌 上皮内瘤变 Stathmin1 幽门螺杆菌

Stathmin1蛋白是一种高度保守的胞质磷酸蛋白，通过微管解聚活性，控制细胞周期，改变细胞的增殖、分化，活性等生物学行为［1］。近年来国内外研究证实在白血病、淋巴瘤、前列腺癌、卵巢癌、肺癌、宫颈癌、肝癌、成骨肉瘤等多种肿瘤中，Stathmin1均有高水平表达，抑制其表达可以干扰恶性细胞的增殖［2］。本资料主要通过检测进展期胃癌、早期胃癌、上皮内瘤变、慢性胃炎黏膜组织中Stathmin1蛋白的表达水平和分布情况，探讨是stathmin1蛋白在胃癌演变过程中的表达变化和幽门螺杆菌（Hp）的关系。

1　临床资料

1.1一般资料 收集本院2011年6月至2013年12月胃癌手术切标本80例，其中男52例，女28例；年龄39～78岁，平均（59.3±8.9）岁。胃癌分期采用1997年国际抗癌联盟（UICC） 制定的TNM 分期法。所有胃癌病例均经病理证实，并附有完整的临床病理资料。患者术前均未接受化疗或放疗。收集同年胃镜活检标本共120例，其中慢性胃炎60例，上皮内瘤变60例。同年在本院行内镜下黏膜剥离（ESD）术后病理证实为早期胃癌标本40例。

1.2Hp检查 采用14C呼气试验和组织学改良Giemsa染色方法联合检测Hp，两项检查结果均为阳性者判定为阳性，全部为阴性者判定为Hp阴性，两种检测方法结果不一致的病例被除外。

1.3试剂与方法 stathmin1 单克隆抗体购自 ABD Serotec公司，S P 试剂盒和DAB 染色剂均购自北京中山生物技术有限公司。常规免疫组织化学SP 法（ 具体步骤按试剂盒说明书进行），DAB 显色，用已知的阳性片作阳性对照，用PBS 代替一抗作阴性对照。

1.4结果判断 Stathmin1蛋白染色主要定位于细胞浆上，随机选择10个高倍（×400）视野，根据染色程度及染色细胞百分率进行分析评分，阳性细胞百分率：≤10%：1分；10%～50%：2分；≥50%：3分。肿瘤显色深浅：基本不着色，0分；色淡，1分；色中，2分；色深，3分。计算两者乘积，得0分或1分为阴性（-），得2、3或4分为阳性（+），≥6分为强阳性（++）。所有切片均由2位有经验的病理医师，经仔细阅片2次，保证了结果的可重复性。

1.5统计学方法 采用 SPSS 17.0 统计软件。计量资料以（x±s）表示，组间比较采用t检验，计数资料采用χ2检验，P＜0.05为差异有统计学意义。

2　结果

2.1Stathmin1 在胃炎、癌前病变及癌组织中的表达情况 见表1。

表1　Stathmin1在胃炎、癌前病变及胃癌中的表达情况（n）

2.2Stathmin1表达与胃癌临床病理特征的关系 胃癌中stathmin1的表达与年龄、性别无明显关系（P＞0.05），与分化类型、浸润深度、淋巴转移、TNM分期差异有统计学意义（P＜0.05），Hp感染者stathmin1蛋白表达量明显增多，差异有统计学意义（P＜0.05）。

3　讨论

胃癌是世界上最常见的消化道恶性肿瘤之一，胃癌的发生是多种因素共同作用的结果。Stathmin1蛋白是一种主要的微管不稳定蛋白，通过调节微管系统的动力学平衡，控制细胞周期，并以此改变细胞的增殖、分化、活性等生物学行为，其表达情况与肿瘤细胞增殖及转移有关［3］。本资料结果显示，Stathmin1在慢性胃炎中表现为表达减少或缺失，在胃癌中表达水平高，多呈阳性或强阳性表达，与上皮内瘤变组比较存在明显差异。统计分析结果显示，Stathmin1胃癌中的表达水平与肿瘤分化类型、浸润深度、淋巴结转移、TNM分期等临床病理参数均高度相关（ P＜0. 05），在低分化、有浆膜侵犯、淋巴结、TNM 分期晚的胃癌中Stathmin1表达强明显升高，提示Stathmin1 表达水平上升参与胃癌的发展过程，Stathmin1蛋白水平越高，肿瘤的侵袭力越强，越易发生转移。Jeon TY等［4］认为Stathmin1的表达可作为评估胃癌预后的指标和胃癌治疗靶向基因。因此，Stathmin1的高表达在胃癌的预后及发生发展中均发挥了重要作用，

1994 年世界卫生组织国际癌症研究机构将Hp列为人类I 类（即肯定的）致癌因子，相关研究证实Hp感染是胃癌发生的最重要危险因素之一，70%的胃癌发生与Hp感染有关［5］。本资料发现在Hp阳性的胃癌中stathmin1表达明显增多，作者推测是否Hp感染可促使stathmin1的表达。由于Stathmin1蛋白可以与多种抑癌基因如p53或p27等相互作用，引起细胞生物学改变，从而改变细胞的增殖、分化、活性等生物学行为。因此作者推测，Hp感染可能通过影响p53、p27等蛋白表达从而促使stathmin1蛋白的表达增加。

Stathmin1在胃上皮内瘤变中表达量开始出现异常，但在胃癌中其表达量明显升高，其蛋白表达与肿瘤浸润转移恶性生物学行为的指标呈正相关，提示Stathminl可作为反映胃癌恶性表型及预后重要指标，也可作为早期胃癌的筛查指标。

1 Rubin CI， Arweh GF. The role of Stathmin in the regulation of the cell cycle.J Cell Biochem，2004，93（2）：242.

2 Ghosh R， Gu G， Tillman E， et al. Increased expression and differential phosphorylation of Stathmin may promote prostate cancer progression. Prostate， 2007，67（10）：1038～1052.

3 Singer S， Ehemann V， Brauckhoff A， et al. Protumorigenic overexpression of stathmin/Op18 by gain-of-function mutation in p53 in human hepatocarcinogenesis. Hepatology，2007， 46（3）： 759～768.

4 Jeon TY， Han ME， Lee YW，et al. Overexpression of stathmin1 in the diffuse type of gastric cancer and its roles in proliferation and migration of gastric cancer cells. Br J Cancer，2010，102（4）：710～718.

5 Peek RM Jr， Blaser MJ. Helicobacter pylori and gastrointestinal tract adenocarcinomas. Nat Rev Cancer，2002，2（1）：28～37.

315020宁波大学医学院附属医院消化科