肌酸激酶同工酶两种方法的对比分析

王志尊 郭艳霞 张然

[摘要] 目的 对肌酸激酶同工酶（CK-MB）的两种测定方法进行比较，分别为免疫抑制法和胶体金法。方法 标本来自于2014年12月—2015年2月期间在该院住院的患者， 主要针对儿科住院患者送检的标本，年龄段在6个月～3岁，随机选取152例。在全自动生化分析仪上分别进行测定肌酸激酶（CK）和肌酸激酶同工酶（CK-MB）活性，并从中选取二者不成比例的标本进一步用胶体金方法测定CK-MB质量。结果 测定标本共152人份，CK在正常范围内，CK-MB升高，高于正常值（51±20） U/L（免疫抑制法结果），用胶体金法结果为（2.367±1.038） ng/mL；CK高于正常值时，CK-MB免疫抑制法结果为（73±30） U/L，胶体金法结果为（9.152±1.123） ng/mL。结论 CK-MB的活性测定一般均为免疫抑制法，但由于方法学的局限性，可引起测定结果假性升高，出现异常升高时，及时和临床取得联系，可结合患者的病情，进一步用胶体金法测定CK-MB的质量，为患者提供更准确的检测结果。

[关键词] 肌酸激酶同工酶；免疫抑制法；胶体金法

[中图分类号] R542.22 [文献标识码] A [文章编号] 1674-0742（2015）08（c）-0176-02

Comparative Analysis of Two Measure Methods of CK-MB

WANG Zhi-zun， GUO Yan-xia， ZHANG Ran

Clinical laboratory， the Hospital of Shenzhou City， Shenzhou， Hebei Province， 053800 China

[Abstract] Objective To compare the two measure methods of Creatine kinase isoenzyme（CK-MB）， and they were immunosuppression method and colloidal gold method respectively. Methods Specimens were from randomly selected 152 patients hospitalized in our hospital from December 2014 to February 2015，mainly for pediatric inpatients aged 6 months to 3 years. Using auto biochemical analyzer to measure the activity of creatine kinase （CK） and creatine kinase isoenzyme（CK-MB）， and selected those disproportionate specimens for further measure of CK-MB using colloidal gold method. Results Measured 152 specimens in total， and CK was within the normal range， but CK - MB was higher than normal （51±20） U/L（using immune suppression method）， while using colloidal gold method the result was（2.367±1.038） ng/mL； When CK was higher than normal， the immune suppression measure results of CK-MB was （73±30） U/L， and the result of colloidal gold method was （9.152±1.123） ng/mL. Conclusion The measurement of CK-MB activity generally are immune suppression method， but due to the limitation of the methodology， it can cause pseudo rise. When encounter abnormal rise， make contact with clinical doctors， taking the patients state into account， one could use colloidal gold method for further measure of the quality of CK - MB， in order to provide more accurate measure results for patients.

[Key words] CK-MB； Immune suppression method； Colloidal gold method

正常情况下，CK-MB/CK应<5%，CK-MB升高，大于或等于正常高值的6%，被认为是临床上心肌损伤的特异性指标[1]。理论上CK-MB的活性不可能大于总CK的活性，但在临床实际工作中经常出现CK-MB活性异常升高甚至高于CK的活性，也有许多相关的报道。在实际工作中有的同志仅凭借工作经验，擅自改动检测结果，达到理想的水平，这样是很不负责任的表现，很有可能会造成漏诊或是误诊；并且临床医生有时会向检验科进行咨询，为什么会有时出现CK-MB升高，而CK不高的检测结果，与患儿的临床表现不一致；再考虑到患者的经济因素和避免不必要的医疗资源的浪费（CK-MB的质量浓度测定采用胶体金法，试剂相对比较昂贵）。鉴于以上几点因素，该研究选择2014年12月—2015年2月期间在该院住院的患者作为对象进行研究，重在探讨在什么条件下采用哪一种测定方法测定CK-MB，为临床提供更为准确的、合理的检测结果，现报道如下。

1 资料与方法

1.1 一般资料

2014年12月—2015年2月在深州市医院儿科病区住院的患者。年龄为6个月～3岁，未作性别分组。标本由儿科护士肘静脉采血，采血后立即送检验科。所选患儿基本排除肌病、脑病，多为心肌炎。标本排除溶血、脂血、黄疸的影响。

1.2 测定方法

1.2.1 仪器与试剂 CK活性检测用速率法，CK-MB活性检测用免疫抑制法，均使用日立7600系列生化分析仪。CK试剂是北京百奥泰康生物技术有限公司提供，CK-MB试剂是北京九强生物技术股份有限公司提供；CK-MB质量测定为胶体金法，仪器为瑞莱生物工程（深圳）有限公司提供的多功能免疫分析仪，及其配套试剂。以上操作均严格按照仪器操作规程和试剂使用说明书要求进行。

1.2.2 方法 对标本先在日立7600系列全自动生化分析仪进行CK和CK-MB活性测定，对二者不成比例的进行CK-MB质量测定。CK活性结果>240 U/L为升高，CK-MB活性结果>24 U/L，质量浓度>6 ng/mL为升高。

1.3 统计方法

用SPSS13.0软件对数据进行分析，计量资料如为正态分布采用（x±s）表示。

2 结果

选取152份标本，其中有82份标本为已确诊为心肌炎的， 并在该院儿科病区住院经过治疗前、后的两次标本，70份标本为门诊患者。对所测定结果进行比较分析。其中CK和CK-MB同时成比例升高的标本有123份，与理论也基本符合，CK 均值为（485±108）U/L，CK-MB的均值为（73±30）U/L，结果见表1.但有29份标本二者结果与理论不符，均为CK小于240 U/L，但CK-MB大于24 U/L，进一步用胶体金法测定CK-MB质量，测定结果在正常范围内，见表2。

表1 CK升高>240 U/L（x±s）

表2 CK正常<240U/L（x±s）

3 讨论

在该研究中有29份标本与理论的CK与CK-MB的比值不相符，进一步测定CK-MB的质量，结果比较和临床相一致。其中有5例诊断为心肌炎，经过一个疗程的治疗后，复查心肌酶谱，其它几项均恢复正常，只有CK-MB>24 U/L，但是CK-MB的质量浓度在正常范围内。

CK以二聚体的形式存在，由两种亚基组成-M亚基和B亚基，形成三种同工酶的结构：CK-MM、CK-MB、CK-BB。M亚基主要存在于肌肉中，不同肌肉中同工酶的比例不同，骨骼肌中CK-MM占绝大部分，CK-MB<3%。心肌是人体唯一含CK-MB最多的器官，CK-MB占15%～40%[2]。B亚基主要存在于脑及神经细胞中。CK-MB免疫抑制法的检测原理是试剂中含有抗M抗体，与M亚单位结合且抑制其活性，测定血清的B亚基活性，所测酶活性乘以因数2即代表血清CK-MB的活性，因CK-BB含量极少，可略而不计。CK-MB质量法采用胶体金法，利用双向侧流免疫反应原理，通过双抗体夹心法制备而成。样本中的CK-MB抗原首先与化学耦合垫上的抗CK-MB抗体偶合物发生免疫反应，形成免疫复合物。其后免疫复合物随着样品在硝基纤维素膜上层析流动，当免疫复合物层析至检测区时，与抗CK-MB抗体发生反应。血液中的CK-MB越多，测试带的复合物越多，条带上的光密度值越高。

目前常规测定CK-MB的活性方法为免疫抑制法，在全自动生化分析仪检测，其检测成本低、速度快，临床应用比较普遍。但由于方法学的局限性，可引起测定结果的假性升高。有报道称肿瘤患者和脑病患者中CK-MB/CK>25%的比例比较高[2]，这可能是CK-BB、巨CK、巨CK2的干扰所致[3-5]。另外由于生理因素的原因，血清中的CK-BB含量与年龄存在一定的关系，儿童血清中的CK-BB的含量高于成人[6]。因此免疫抑制法测定的CK-MB的活性偏高，但是CK-MB的质量测定一般均在正常范围内[2]。这与该研究结果基本一致。

另有报道认为在哮喘儿童中CK-MB升高提示患儿缺氧状态，CK-MB可认为是呼吸功能损伤的一项指标[8]。因此在检测结果出现CK与CK-MB二者不成比例时，应该综合分析结合患儿的病史资料，进一步的进行CK-MB质量测定，或者进一步的检测肌钙蛋白I，Troponin I浓度为0.034 ug/L为临界值判断心肌损伤[7]。为患者提供更为准确的检测结果。这是对患者负责也是对自己负责。在目前医患关系比较紧张的局势下，作为医务工作者，我们更应该认真对待每一份检测结果，对每一个数据都应该做到心中有数，无论是患者还是临床咨询都应该给出合理的、科学的解释。

[参考文献]

[1] 王虹，刘石，邢艳琳，等.肌酸激酶同工酶质量判定肌病心肌损害的局限性[J]. 中国危重病急救医学，2011，23（12）：723-726.

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[3] 陈建芸，石玉玲，李林海，等.CK-MB质量及其活性检测结果对比分析[J].华南国防医学杂志，2010，24（6）：455-467.

[4] 李晓，徐宗琴，陈建芸.血清CK-MB活性大于总CK活性的原因初探及处理[J].现代检验医学杂志，2010，25（6）：78-82.

[5] 彭兰，张娥，万芳，等.“CK-MB”测定的干扰现象及实验对策[J].中国实验诊断学，2011，15（12）：2160-2161.

[6] 吕礼应，张敏，杨久华，等.婴幼儿血清CK正常儿CK-MB活性增高的临床意义[J].临床检验杂志，2010，28（30）：177-178.

[7] 李怀远，蒋黎敏，郑建新，等.肌钙蛋白I和肌酸激酶同工酶儿童参考区间的建立[J].中华检验医学杂志，2012，35（12）：1142-1145.

[8] 孙颖，刘晓丽，曹晓.哮喘儿童血清中肌酸激酶同工酶水平的研究[J].中华妇幼保健，2013，8（14）：2329-2330.

（收稿日期：2015-05-05）