盐胁迫下2种樱桃砧木的生理变化
2015-09-10梁发辉王芳杨静慧等
梁发辉 王芳 杨静慧等
摘要: 为了选择耐盐樱桃砧木,以黑山樱(Cerasus maximowiczii)和四川樱桃(Cerasus szechuanica)为试材,通过不同浓度(0、0 2%、0 4%、0 6%)的NaCl胁迫处理,研究植株的生理生化指标(MDA含量、SOD酶活性、POD酶活性、Prp含量、叶绿素b含量)。结果表明,各盐胁迫浓度下,四川樱桃的MDA含量均高于黑山樱;除对照外,黑山樱的SOD酶活性在各盐胁迫浓度下均较四川樱桃的低;在0 4%~0 6%的高盐浓度下,黑山樱的POD酶活性较高,耐盐性较强;在≤0 2%的低盐浓度下,四川樱桃的POD酶活性较高;在各盐胁迫浓度下,黑山樱的Pro含量均高于四川樱桃而叶绿素b含量均低于四川樱桃。隶属函数综合分析认为,黑山樱耐盐性(0 8)强于四川樱桃(0 2)。
关键词: 大樱桃;砧木;耐盐性;盐胁迫;生理生化指标
中图分类号:S662 501 文献标志码: A
文章编号:1002-1302(2015)08-0171-03
大樱桃是我国北方落叶果树中成熟较早的树种之一,素有“春果第一枝”之称。大樱桃色泽鲜艳、营养丰富,最新研究发现,大樱桃还含有花色素、花青素和花红素等,这些生物素都有重要的医药价值 [1]。大樱桃果实发育期短,在果实生长期不施农药,是真正无污染的绿色水果,深受人们的喜爱。由于大樱桃不耐贮藏和运输,适宜在大城市周边地区发展,就近供应。天津地区拥有较多的消费群体,因此在天津周边地区发展大樱桃栽植具有广阔的市场前景 [2]。
大樱桃适宜生长的土壤pH值为6 0~7 5 [3],我国种植大樱桃的中北部地区土壤的pH值为7 0~7 8,为微碱性土壤,在这种pH值范围内大樱桃基本可以正常生长。由于天津大部分地区为轻度或中度盐碱地,在天津地区选育耐盐樱桃砧木对于充分利用盐碱地,为农民创收具有重要意义 [4]。因此,本试验通过分析盐胁迫下樱桃砧木的生理生化反应和变化,比较了黑山樱(Cerasus maximowiczii)砧木和四川樱桃(Cerasus szechuanica)砧木的耐盐性,为大樱桃在天津地区的发展提供理论依据。
1 材料与方法
1 1 材料
黑山樱种子购买于河北秦皇岛,四川樱桃种子采自于四川平武山区。
1 2 方法
试验采用NaCl溶液进行盐胁迫,设置4个浓度处理,分别为0(对照)、0 2%、0 4%和0 6%。将经过低温沙藏后的种子用清水洗净,在蛭石苗床上进行播种,待长出2张真叶后,移入带托花盆中,每盆3株。缓苗4周后,用相应浓度盐水进行胁迫处理,每处理5盆(5次重复)。
处理4周后,同组植株随机选取叶片,测其丙二醛(MDA) 含量、超氧化物歧化酶(SOD)活性、过氧化物酶(POD)活性、游离脯氨酸(Pro)含量以及叶绿素b含量。每组处理3次重复,每次读数3次重复,运用公式计算各项指标。MDA含量的测定:采用硫代巴比妥酸比色法 [5];SOD酶活性测定:采用抑制氮蓝四唑法(NBT)光化还原法 [5];POD酶活性测定:采用愈创木酚比色法 [5];Pro含量测定:采用酸性茚三酮比色法 [5];叶绿素b含量的测定:采用分光光度法 [5]。试验所用分光光度计品牌为PerKinElmer,型号为Lambda 35。
试验数据用SPSS和Excel进行差异显著性分析和作图。
2 结果与分析
2 1 盐胁迫对2种樱桃叶片MDA含量的影响
由图1可知,四川樱桃的MDA含量随NaCl浓度升高呈现出先升高后下降的趋势,且在NaCl浓度为0 2%时达到最大值。在各盐胁迫浓度下,四川樱桃的MDA含量均高于黑山樱。黑山樱在不同NaCl浓度处理时,MDA含量内存在显著差异,四川樱桃在NaCl浓度为0 6%时与对照差异不显著,其余各浓度均差异显著。MDA是脂质过氧化作用的产物,植物在逆境胁迫下,体内产生大量的活性氧,活性氧通过脂质过氧化作用形成氢过氧化物,氢过氧化物可以分解产生MDA,MDA间接反映了膜受损状况。因此,从叶片中MDA含量随NaCl处理浓度的变化看,在0 2% NaCl处理下,四川樱桃和黑山樱MDA大量积累,膜受损情况严重 [6-7],而黑山樱的变化幅度要小于四川樱桃,可见黑山樱对盐胁迫有一定的调节能力,其耐盐性强。因此,从MDA含量看,黑山樱的耐盐性较强,四川桃较差。
2 2 盐胁迫对2种樱桃叶片SOD酶活性的影响
由图2可知,黑山樱和四川樱桃的SOD酶活性随NaCl浓度升高均呈现先升高后下降的趋势,黑山樱和四川樱桃在NaCl浓度为0 2%时SOD酶活性达到最大值。在各盐胁迫浓度下,黑山樱的SOD酶活性低于四川樱桃。
在0~0 4% NaCl处理时黑山樱SOD酶活性差异不显著,当NaCl浓度达到0 6%时黑山樱SOD酶活性与其他处理差异显著。除对照外,四川樱桃SOD酶活性在不同浓度NaCl处理时均有显著差异。
SOD酶是防御系统中的重要酶类,在逆境下其活性增加可以减轻活性氧代谢对膜的伤害,增强植物对逆境的抗性;但在严重的逆境下,SOD酶活性将下降 [8-10]。四川樱桃的SOD酶活性在盐胁迫下下降趋势明显,没有明显的调节作用;因此,从SOD酶活性看,黑山樱的耐盐性较强,四川樱桃较差。
2 3 盐胁迫对2种樱桃叶片POD酶活性的影响
由图3可知,黑山樱和四川樱桃的POD酶活性都表现出随NaCl浓度升高而先升高后下降的趋势。其中,在低盐浓度下(盐浓度为0~0 2%)四川樱桃的POD酶活性高,在NaCl浓度为0 2%时达到最大值,比对照提高了433%。在高盐浓度下(盐浓度为0 4%~0 6%)黑山樱的POD酶活性高,并在NaCl浓度为0 4%时达到最大值,比对照提高了586%。黑山樱与四川樱桃在各盐胁迫浓度下POD酶活性均差异显著。
POD(过氧化物酶)作为抗氧化酶也是逆境胁迫研究中常测定的一项生化指标。在逆境下其活性增加可以减轻活性氧代谢对膜的伤害,增强植物对逆境的抗性 [11-12]。POD活性越强,保护效应越强。综合分析可知,在0 4% NaCl处理下,黑山樱的POD酶仍然在起调节作用,其调节范围较四川樱桃更大。可见,从POD酶活性看,黑山樱较耐盐,四川樱桃的耐盐性较差。
2 4 盐胁迫对2种樱桃叶片Pro含量的影响
由图4可知,四川樱桃Pro的含量表现出随NaCl浓度升高而先升高后下降的趋势,黑山樱的Pro含量则先增加后减少再增加,且均在NaCl浓度为0 2%时达到最大值。在各盐胁迫浓度下,黑山樱的Pro含量均高于四川樱桃(0 4%盐浓度下无明显差异)。
黑山樱在0 4% NaCl处理时Pro含量与其他处理差异显著,在NaCl浓度为0 2%、0 6%时差异不显著,四川樱桃在各盐胁迫浓度下Pro含量差异显著。
植物在不良环境胁迫下,脯氨酸含量会显著增加 [13],在盐胁迫条件下抗性强的植物体内的脯氨酸含量较多,脯氨酸也是盐生植物的一个非常重要的调节渗透压物质。因此,从游离脯氨酸含量变化看,黑山樱和四川樱桃在盐浓度为0 2%时Pro含量都迅速增加,但在盐浓度为0 6%时黑山樱Pro含量又急剧上升,说明黑山樱较耐盐,四川樱桃的耐盐性较差。
2 5 盐胁迫对2种樱桃叶片叶绿素b含量的影响
由图5可知,四川樱桃叶绿素b的含量表现出随NaCl浓度升高而先升高后下降的趋势,在NaCl浓度为0 2%时达到最大值,除对照外,在各盐胁迫浓度下,四川樱桃叶绿素b含量均差异显著。黑山樱叶片中的叶绿素b含量受盐胁迫的影响不大,在各盐浓度处理下差异不显著。
光合作用是衡量植物合成功能的重要生理指标,而叶绿素是植物光合作用的基础,叶绿素含量的高低往往能客观地反映植物抗性的强弱 [14]。因此,从叶绿素b含量看,四川樱桃对盐胁迫的调节能力较强,黑山樱较差。
2 6 盐胁迫下2种樱桃砧木的生理生化指标的综合分析
为了综合分析2种植物的耐盐性,根据上述2种樱桃的各个生理指标,计算了在0 2%、0 4%和0 6% 3个盐浓度下的隶属函数值(表1),以评估在不同盐浓度下2个樱桃种类的耐盐性。各指标均赋予同等权重。其中,MDA与耐盐性呈负相关,叶绿素b含量、POD酶活性、SOD酶活性和游离脯氨酸含量与耐盐性呈正相关。根据隶属函数平均值评价各樱桃种类的耐盐性,隶属函数平均值越大,耐盐性越强。表1显示,黑山樱的隶属函数平均值为0 8,四川樱桃的为0 2。因此,黑山樱耐盐性强于四川樱桃。
3 小结
叶片的生理生化指标能在一定程度上反映植物的生长状况,本研究结果表明,与四川樱桃相比,黑山樱植株叶片具有较低的SOD酶活性、MDA含量和较高的Pro含量,SOD酶活性下降较慢,因此有较强的耐盐性。在低盐浓度下,四川樱桃的POD酶活性较高,说明在低盐胁迫下,该酶有一定的调节能力,此外四川樱桃的叶绿素b含量较高,有一定的耐盐性。因此,综合分析认为,黑山樱的耐盐性强于四川樱桃。
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