干燥丝瓜叶水煎液的抗炎作用研究*

代永霞，高 青，张家梁，马素好

(郑州澍青医学高等专科学校，郑州 450064)

丝瓜是一种常用蔬菜，属葫芦科植物，出自《滇南本草》。丝瓜的药用价值很高，如成熟丝瓜、丝瓜络、丝瓜叶、丝瓜藤、丝瓜根、丝瓜子等均可入药。《本草纲目》曰:能通人脉络脏腑，而祛风解毒，消肿化痰，祛痛杀虫［1-4］。丝瓜中含有蛋白质、维生素、矿物质及皂甙、植物黏液、木糖胶等。丝瓜味甘、性平，具有通络下乳，清热解毒，散瘀止血，利湿除黄，理疝消肿等效用，可治胸胁疼痛、腹痛、腰痛、睾丸肿痛、肺热痰咳、妇女经闭、乳汁不通、痈肿、痔漏等［5-6］。而干燥丝瓜叶的抗炎作用尚未见报道，该文将从干燥丝瓜叶水煎液的抗炎作用进行探讨研究，为丝瓜叶的临床应用提供依据。

1 材料与方法

1.1 仪器 AB104-N型电子天平(梅特勒-托利多仪器有限公司，d=0.1 mg)，打孔器，烘箱(奈美特工业设备有限公司)。

1.2 药物与试剂

1.2.1 药物制备 干燥丝瓜叶水煎液制备:丝瓜叶经河南中医学院鉴定为葫芦科植物丝瓜的干燥叶，把干燥丝瓜叶50 g倒入药锅内摊平，然后加1 000 mL冷水至高出药平面寸许，浸泡0.5～1 h;先用武火(急火)将药物煮沸，煮沸后宜改为文火(慢火)，从沸腾开始计算时间，煎煮20～25 min;将药汁滤出，重新加入冷水至高出药平面约0.5～1 cm，武火煎煮至沸腾后改为文火煎煮15～20 min，将两次药液混匀后，浓缩至所50%的浓度，4℃保存备用。

1.2.2 试剂 角叉菜胶(天津市福晨化学试剂厂，批号:20120602)，二甲苯(江苏金坛市试剂厂，批号:20121021);阿司匹林(0.5 g/片，西安利君制药有限责任公司，批号:20121006)。

1.3 动物 SPF级KM小鼠50只，雌雄各半，体重18～22 g，由山东鲁抗医药股份有限公司实验动物室提供，生产许可证号 SCXK(鲁)2013-0001;SPF级SD大鼠，雌雄各半，体重180～220 g，由山东鲁抗医药股份有限公司实验动物室提供，生产许可证号SCXK(鲁)2013-0001。

1.4 方法

1.4.1 二甲苯致小鼠耳肿胀试验［7］小鼠50只，雌雄各半，随机分为5组，各组小鼠按表1设计剂量灌胃给药，0.2 mL/10 g，每日 1 次，连续 7 d，末次给药1 h后，将二甲苯20 μL均匀涂于左耳前后两面，右耳为正常对照。60 min后沿耳廓基线剪下双耳，用0.6 mm直径的打孔器在两耳同一部位打孔，称圆耳片重量，按公式计算耳肿胀度及肿胀抑制率。耳肿胀度(mg)=左耳重量-右耳重量;肿胀抑制率(%)=(生理盐水组肿胀度-各给药组肿胀度)/生理盐水组肿胀度×100%。

1.4.2 角叉菜胶致小鼠足跖肿胀试验［8］小鼠50只，雌雄各半，随机分为5组，各组小鼠按表2设计剂量灌胃给药，0.2 mL/10 g，每日1 次，连续 7 d，末次给药1 h后，小鼠左后足跖皮下注入0.1%新鲜的角叉菜胶30 μL致炎，于致炎后5 h从踝关节处对称剪下小鼠两足并称重，以左、右足质量差为足跖肿胀度，计算肿胀度及抑制率。足跖肿胀度(mg)=左后足跖质量-右后足跖质量;抑制率(%)=(生理盐水组肿胀度-各给药组肿胀度)/生理盐水组肿胀度×100%。

1.4.3 大鼠棉球肉芽肿试验［9］大鼠50只，雌雄各半，随机分为5组，各组大鼠腹腔注射10%的水合氯醛0.4 mL/kg麻醉，无菌状态下，在大鼠两侧腹股沟部皮下切开一小口，将灭菌棉球(20±2 mg/个)分别植入大鼠腹股沟开口皮下，随即缝合皮肤，常规消毒。大鼠按表3设计的剂量灌胃给药，2 mL/100 g，每天1次，连续7 d。第7天，末次给药后1 h脱颈椎处死大鼠，将棉球连同周围组织一起取出，剔除多余脂肪，放入70℃ 烘箱中烘至恒重并称重，计算肉芽肿净重和抑制率(%)。肉芽肿净重=肉芽组织重量-灭菌棉球重量;抑制率=(生理盐水组平均肉芽肿净重-给药组平均肉芽肿净重)/生理盐水组平均肉芽肿净重×100%。

1.4.4 数据分析 采用 SSPS 13.3统计学软件，数据用均数±标准差(±s)表示，采用单因素方差分析，以P＜0.05为差异有统计学意义。

2 结果

2.1 二甲苯致小鼠耳肿胀试验 由表1可见，干燥丝瓜叶水煎液10 g/kg组和阿司匹林组小鼠耳廓肿胀率明显降低，与生理盐水组比较差异均有统计学意义(P＜0.01)，提示干燥丝瓜叶水煎液对二甲苯诱发的小鼠耳廓肿胀有一定的抑制作用。

表1 二甲苯致小鼠耳肿胀试验(n=10，±s)

表1 二甲苯致小鼠耳肿胀试验(n=10，±s)

注:与生理盐水组相比，1)P ＜0.05，2)P ＜0.01。

组别 剂量(w/g·kg-1)耳肿胀度(m/mg)肿胀抑制率/%生理盐水组 0.18 2.40 ±0.46—丝瓜叶水煎液 2.50 2.20 ±0.39 8.30丝瓜叶水煎液 5.00 1.90 ±0.511) 20.83丝瓜叶水煎液 10.00 1.40 ±0.482) 41.67阿司匹林组 0.20 1.30 ±0.522)45.83

2.2 角叉菜胶致小鼠足跖肿胀试验 由表2可见，与生理盐水组相比，干燥丝瓜水煎液10 g/kg组(P＜0.05)和阿司匹林组(P＜0.01)小鼠足肿胀度明显降低，提示干燥丝瓜叶水煎液对角叉菜胶诱发的小鼠足跖肿胀有一定的抑制作用。

表2 角叉菜胶致小鼠足跖肿胀试验(n=10，±s)

表2 角叉菜胶致小鼠足跖肿胀试验(n=10，±s)

注:与生理盐水组相比，1)P ＜0.05，2)P ＜0.01。

组别 剂量(w/g·kg-1)足跖肿胀度(m/mg)肿胀抑制率/%生理盐水组 0.18 36.24 ±9.55—丝瓜叶水煎液 2.50 28.74 ±3.68 20.69丝瓜叶水煎液 5.00 21.82 ±2.891) 39.79丝瓜叶水煎液 10.00 18.28 ±3.941) 49.56阿司匹林组 0.20 17.32 ±8.072)52.21

2.3 大鼠棉球肉芽肿试验 由表3可见，干燥丝瓜叶水煎液10 g/kg组和阿司匹林组小鼠肉芽肿干重明显降低，与生理盐水组比较差异均有统计学意义(P＜0.01)，提示干燥丝瓜叶水煎液对棉球诱发的肉芽肿有一定的抑制作用。

表3 大鼠棉球肉芽肿试验(n=10，±s)

表3 大鼠棉球肉芽肿试验(n=10，±s)

注:与生理盐水组相比，1)P ＜0.05，2)P ＜0.01。

组别 剂量(w/g·kg-1)肉芽肿干重(m/g)肉芽肿抑制率/%生理盐水组 0.18 0.47 ±5.84—丝瓜叶水煎液 2.5 0.43 ±9.49 8.51丝瓜叶水煎液 5.0 0.41 ±9.881) 12.77丝瓜叶水煎液 10.0 0.36 ±8.432) 23.40阿司匹林组 0.2 0.34 ±7.842)27.66

3 讨论

本试验以生理盐水组作为空白对照组，以阿司匹林组作为阳性对照组，采用多种炎症动物模型进行抗炎作用研究，其中二甲苯致小鼠耳肿胀、角叉菜胶致小鼠足跖肿胀模型是急性非特异性炎症模型，而大鼠棉球肉芽肿模型是慢性非特异性炎症模型。非特异性炎症反应通常分为三个时相，即以局部血管扩张、毛细血管通透性增加为特征的急性时相;以白细胞、巨噬细胞浸润为特征的亚急性时相;以组织变性和纤维化为特征的慢性增殖相。小鼠耳肿胀试验结果表明，丝瓜叶水煎液的5.0 g/kg及10.0 g/kg剂量组与生理盐水组比较均有显著性差异，能显著抑制二甲苯所引起的耳肿胀;小鼠足跖肿胀试验表明丝瓜叶水煎液5.0 g/kg及10.0 g/kg剂量组能显著抑制角叉菜胶所引起的足跖肿胀，抗炎作用明显;综上结果表明干燥丝瓜叶水煎液对炎症的急性时相有一定的抑制作用。而大鼠棉球肉芽肿试验结果也表明丝瓜叶水煎液5.0 g/kg及10.0 g/kg剂量组均能抑制大鼠棉球肉芽肿，说明干燥丝瓜叶水煎液对炎症的慢性增殖相也有一定的抑制作用。因此，上述试验结果提示干燥丝瓜叶水煎液具有一定的抗炎作用，且随着其剂量的增加，抗炎作用逐渐增强，特别是10.0 g/kg的剂量，其抗炎作用和阳性对照药阿司匹林相当，提示该药的抗炎作用强弱与剂量有关。

丝瓜是日常常用食物，其毒性很小，安全性很高，基本属于无毒物质。丝瓜叶的抗炎作用可能是临床或民间用于治疗乳痈肿痛、胸胁疼痛等病症的药理学基础，但干燥丝瓜叶抗炎作用的主要成分和作用机制尚不明确。该实验结果提示丝瓜叶水煎液抗炎作用与阿司匹林相似。由文献可知丝瓜中含有的主要成分是多酚、皂苷和黄酮类成分［10］，后期也可用丝瓜叶水煎液或主要成分与金银花、连翘等抗炎作用显著、抗炎机制明确的中药材进行比较，进一步确定丝瓜叶中的有效成分并验证丝瓜叶水煎液的抗炎作用机制，为丝瓜叶抗炎临床应用提供依据。

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