籽粒苋愈伤组织诱导条件的初步筛选

高金秋 王官达 程金芝 赵娜

（白城师范学院 吉林白城 137000）

籽粒苋愈伤组织诱导条件的初步筛选

高金秋 王官达 程金芝 赵娜

（白城师范学院 吉林白城 137000）

利用子叶，胚轴作为外植体，诱导愈伤组织并对影响愈伤组织诱导和分化的激素种类进行筛选。结果表明：单一激素的最佳选择为子叶：NAA 1mg/L或KT 5mg/L，胚轴：NAA 0.1mg/L或KT 5mg/L的。愈伤组织诱导的最佳选择为子叶：NAA 0.1mg/L+KT 3mg/L，胚轴：NAA 0.1mg/L+KT 5mg/L。

籽粒苋；愈伤组织；激素

籽粒苋是一年生草本作物，具有良好的环境耐受性，增产潜力大，为当今食品工业重要原料之一[1]。植物组织培养是在无菌条件下，并给予适当培养条件，使其成长为完整植株的过程。因此，本文利用籽粒苋的子叶和胚轴作为外植体材料，对诱导条件进行筛选，为实现籽粒苋的育种提供了技术平台。

1 试验材料与方法

选取籽粒苋种子，在70%乙醇溶液中浸泡30s，并充分摇晃烧杯使种子充分接触酒精，后用无菌水冲洗一次；乙醇消毒后，选用现配置的1%次氯酸钠溶液消毒25min，用无菌水冲洗4～6次。每瓶25粒种子，共十瓶。接种后锥形瓶置于温度为26℃±2℃的光照培养箱下，培养4～6d。这段时间生长的子叶及胚轴的分化能力是最强的，接种后观察外植体生长状态。

培养4～6d后，取出幼苗，分别切取子叶和1cm长的胚轴，放入不同浓度的培养基中。每个浓度三瓶，每瓶15个。将接种后的培养基置于26℃±2℃的光照培养箱中，观察记录各浓度愈伤组织生长情况。胚轴生长状态见，子叶生长状态见[2]。

2 结果与分析

2.1 不同激素对外植体愈伤诱导的影响

子叶、胚轴接到不同浓度KT的固体培养基上，2d后愈伤组织开始形成，对诱导率进行统计。可知子叶在MS+KT 1mg/L条件下诱导率最低；胚轴在MS+KT 5mg/L条件下愈伤组织诱导效果最好。

子叶、胚轴接到不同浓度NAA的固体培养基上，子叶从第二天，胚轴从第一天开始愈伤组织形成，统计诱导率。其中，子叶在MS+NAA 1mg/L条件愈伤组织诱导效果最好；胚轴在MS+NAA 0.1mg/L条件下诱导效率最高。

2.2 不同激素配比对子叶、胚轴愈伤组织诱导的影响

子叶接种到不同KT和NAA浓度配比的固体培养基上，15d后统计的愈伤组织诱导数和诱导率。可知，愈伤组织诱导率均在75%以上，MS+NAA 0.1mg/L+KT 5mg/L愈伤组织诱导效果最好。

胚轴接种到不同KT和NAA浓度配比的固体培养基上，15d后统计的愈伤组织诱导数目和诱导率见表1。可知，MS+NAA 0.1mg/L+KT 5mg/L以及MS+NAA 0.05mg/L+KT 5mg/L愈伤组织诱导效果均为最佳。

表1 不同激素配比的籽粒苋胚轴愈伤组织诱导情况

3 讨论

单一激素的最佳选择为子叶：NAA 1mg/L或KT 5mg/L，胚轴：NAA 0.1mg/L或KT 5mg/L。愈伤组织诱导的最佳选择为子叶：NAA 0.1mg/L+KT 3mg/L，胚轴：NAA 0.1mg/L+KT 5mg/L。在操作过程中，注意无菌环境的建立[3]。观察愈伤组织发现其形态各异，有水浸状、排列松散、排列紧实等。其中部分致密松脆的愈伤组织存在分化率差异较大，尚有待进一步调整，为构建籽粒苋再生体系的构建提供优化条件。

[1]孟昭宁.籽粒苋人类未来的粮食[J].西部粮油科技，2003，28（6）：30～31.

[2]曹孜义，刘国民.实用植物组织培养技术教程（第三版）[M].甘肃科学技术出版社，2002，6.

[3]巩振辉，申书兴.植物组织培养（第一版）[M].北京：化学工业出版社，2007：7～42.

S541+.9

A

1005-7897（2015）10-0017-01

吉林省教育厅科学技术研究“十二五”规划课题。

2015-10-10

高金秋（1976-），女，山东单县人，讲师，硕士，主要从事植物生物技术研究。