发热模型的研究进展

李欣芮 宋惠欣

关键词：发热；动物模型；综述中图分类号：R254

文献标志码：A

文章编号：1007-2349（2015）04-0077-03发热大多是由于致热冈子作用于机体，使得内热原得以产生并释放，使体温在一定程度上升高。近年来，建立动物的发热模型为解热药物的研究提供了非常重要的根据。到目前为止，常用的致热原有：LPS，2，4-二硝基酚，干酵母等。近年来有关学者又研究出了脑膜炎奈瑟菌致发热模型和新西兰兔金黄色葡萄球菌感染性发热模型。本文将从化学药品造模法、生物制剂造模法和其它造模法三方面对前人研究的发热模型综述如下。1 化学药品造模法1.1 2，4-二硝基酚（DNP）导致的发热模型 DNP可以刺激细胞氧化过程，使氧化的过程受到刺激所增加的能量不能够通过磷酰化转变成ATP或磷酸肌酸，而以热能散发，从而引起发热I。陈敬然等[2]以160 mg/kg的剂量给大鼠ihDNP溶液，若大鼠温度升高0.6℃以上，则说明造模成功。张发艳等[3]在大鼠背部 ih DNP生理盐水混合溶液制造实热证大鼠发热模型、、刘亚欧等[4]于大鼠颈背部ih 2，4--二硝基苯酚（12.5mg/kg）以复制大鼠发热模型。1.2角叉菜胶（卡拉胶）导致的发热模型较大剂量的ih角义菜胶会引起一个持续的炎症反应，激活巨噬细胞，从而引起发热。王之梅等[5]用1%的卡拉胶混悬液0.1 mL给ih大鼠，制造出了发热模型。刘亚欧等[4]于大鼠颈背部ih 20%干酵世混悬液（ 10mL/kg）以复制大鼠发热模型。1.3

甲状腺片导致的发热模型 甲状腺激素是甲状腺片的主要成分，甲状腺激素增多，会使代谢增强，产热量增加，从而造成发热。黄丽萍等611以0.6g/kg剂量的甲状腺片，连续灌胃30 d制造出了动物发热模型。廖梅香等[7]将甲状腺片以0.5%的羧甲基纤维素钠配制成所需浓度的混悬液，剂量为50mg/kg每日，连续给药7d后，得到了需要的发热动物模型。2 生物制剂造模法西医学认为，发热是某些致热原侵入机体，温度感受器接受体内、外环境温度的闽值上移，从而引起了产热增加的同时散热减少，导致发热。因此，一些可以造成上述现象的生物制剂就可以用来制作动物发热模型，发热机理较清楚，成功率相对较高。2.1脂多糖（lipopolysaccharide.LPS）导致的发热模型到目前为止，脂多糖（ lipopolysaccharide，LPS）动物发热模型是实验研究里最为常用的动物发热模型。LPS为c-菌细胞壁的主要成分，内毒素作用于巨噬细胞等，使之产生IL一l、IL-6和TNF -α，这些具有内源性致热原效应的细胞因子作用于下匠脑体温调节中枢，引起机体发热。张福利等[8]研究LPS导致发热模型的剂量从10～250Lg/kg不等，发现20μg/kg的剂量为引起大鼠发热的最佳剂量。江启煜等[9]分别以15μg/kg和75μg/kg剂量给SD大鼠ip浓度为25pg/mL的内毒素生理盐水溶液制作发热模型。金龙等[10]将家兔灌胃给药（或静脉注射），l天1次，连续3天，末次给药后th，将家兔iv人肠杆菌内毒素250n～（mL·kg）建立发热模型，陈婷等[11]将家兔经耳缘ivLPSl.5μg/Kg（攻毒）建立发热模型。2.2疫苗引起发热模型疫苗是减毒或灭活的细菌或病毒，当它进入动物体内时会攻击免疫系统，迫使免疫系统产生抗体，从而能够预防相应的细菌或病毒再次侵入动物体时造成的损害。因此，接种疫苗后，动物体的免疫系统被攻击.就会出现暂时的发热等不适现象。张恩户等[12]取健康的新西兰兔，iv剂量为0.5mL/kg伤寒、副伤寒三联疫苗制作兔发热模型。胡春萍等[13]将家兔经iv过期三联疫苗-NS.稀释液，造成发热模型。赵娇等[14]按0.5～2.0mL/kg给家兔静注，注入l-2h后，可见直肠温度上升1.0～1.5℃，持续3～4h。2.3细菌引起的发热模型①巴氏杆菌马健等[15]控制实验室温度为20qC左右，局部消毒兔头枕部后用预冷的1 mL注射器连接5号针头经小脑延髓池穿刺抽取脑脊液0.4mL，48h后，按1 mL多杀性巴氏杆菌菌液（含3千个活菌）/kg进行颈根部皮下注射来制作家兔发热模型。②肺炎球菌周育平等[16]将实验家兔将肺炎球菌菌液以1.5mL/Kg的剂量经家兔耳缘静脉注入，制作家兔发热模型。③脑膜炎奈瑟菌加曼·沙俄等[17]采用小脑延髓池法固定家兔，模型组家兔每只经小脑延髓池注射3×l08 cfu/mL的脑膜炎奈瑟菌溶液，注射完毕开始测体温、观察家兔症候表现，此期间家兔处于自南饮水、进食状态。④金黄色葡萄球菌李妤蓉等[18]将凝固酶阳性金黄色葡萄球菌经增菌、鉴定、再增菌等程序，最后获得血清肉汤菌液。实验前将实验兔背部皮内注射6×107个金黄色葡萄球菌活菌液。⑤注射腐败干草浸剂赵娇等[14]将干草浸入适量水中，放在见阳处3—4周，将腐败浸液过滤煮沸，蒸发，得到滤液。给家兔静注，可在1h内引起发热，持续8～10 h。⑥大肠埃希菌菌液赵娇等[14]用生理盐水配制成0.5 mL溶液中含l06～ 107个细菌浓度的大肠埃希菌菌液，通过给大鼠静脉注射的方法制造发热模型。2.4干酵母导致的发热模型用酵母混悬液ih大鼠（或家兔），先引起动物体温下降。一段时间后动物体温明显升高，并持续较长时间，局部有明显炎症反应，与临床伴内脏或皮肤有明显急性炎症的里热证类似，故可用此作为发热动物模型以研究药物的解热效果。贾德武等[19]将大白鼠从背部ihl0%的鲜啤酒酵母混悬液3 mL/kg制成发热模型。赵娇等[14]用0. 5%羧甲基纤维素钠分别制成10、5、1、0.2%啤酒酵母混悬液，给大鼠按10 mL/kg的剂量背部皮下注射。6h后体温升高1.2～2.2℃。2.5病毒病毒致热成分是病毒体和其所含的血细胞凝集素。黄厚才[23]将日本大耳白兔接种仙台病毒后体温渐生，至8h（注射N.S6h），体温高达（40.79±0.40）℃，与造模前比较，体温有非常显著差异。（P<0.01）。蔡定芳等[24]将西德纯种成年白毛兔ipl50兔出血热病毒（RHFV）1mL制作兔发热模型。3其它造模法除上述造模方法外，还有物理造模法、中药造模法、食品提取物造模法等。3.1 物理造模法杨志仙等[22]直接利用热水浴使大鼠高热惊厥，隔日诱导惊厥1次，共诱导10次。魏伟等[23]直接刺激下丘脑的体温调节中枢，从而引起体温升高。3.2中药造模法 贺庭桢等[24]将附子、干姜、肉桂按1：1：1的比例或者将附子、干姜按1：1比例配成中药处方制成l00%水煎剂给大鼠灌服复制大鼠热证模型。3.3牛奶、脱脂牛奶导致的发热模型 陈洪等[25]把实验猪分为不同剂量试验组、不同品种试验组以及不同日龄和不同体重试验组，攻毒剂量分别为：低剂量组每1kg体重注射lmL，中剂量组每1kg体重注射2mL，高剂量组每1kg体重注射3mL。试验猪均经下腹部ih脱脂消毒牛奶，使猪体温升高。3.4蛋白胨导致的发热模型刘永录等[26]通过兔iml0%蛋白胨制作家兔发热模型。3.5其它发热模型笔者查阅相关文献发现，相关研究人员用寒、热交替法复制出了大、小鼠发热模型。4结语到目前为止，大多数医疗用发热模型以化学或生物致热原为致病因子，向动物体内注入脂多糖（ LPS）、干酵母、2，4-二硝基酚等制作发热模型。上述模型是适应西医学角度的研究方法和应用单纯西药的药物试验，具有方便.耗费时间短、成功率高、对实验条件要求也比较低等优点。虽然上述经典发热模型与中医外感伤寒发热病症有一定程度的契合，但无法完全模拟中医理论中感受外邪的模型，所以真正符合中医理论的伤寒发热模型少之又少，随着中医药发展的科学化，构建符合中医理论的伤寒发热模型迫在眉睫。在今后的实验过程中，寻找和中医学基础理论相结合，符合中医热证的辩证特点的发热模型是总体趋势。可以多考虑物理法构建发热模型，这种方法构建的发热模型将会具有较强的实用性、适用性和可行性，同时具有深远的社会效益和潜在的经济价值。参考文献：[1]唐晓峰，薛漫清，王晖，大鼠发热机制的研究进展[J].广东药学院学报，2009，03：327-331.[2]陈敬然，孙红梅，尹晓飞，等.牛黄解毒滴丸解热镇痛和抗炎作用实验J.中国药师2010 13 9 1257-1259[3]张发艳.大黄、黄连及其提取物对实热证模型大鼠肝基冈表达谱的影响[D].山东中医药大学，2012.[4]刘亚欧，黄利，李利民芩术颗粒对发热和疼痛模型鼠的解热镇痛作用[J].中国药房，2014，23：2134-2136.[5]王之梅，万鹏，黄崇刚，等.止嗽退热合剂主要药理作用研究[J].中国中医急症，2011，20（7）：1099-1100.[6]黄丽萍，彭淑红，蒙晓芳，胡强，陈凯峰，余日跃，刘红宁，孙建宁热证大鼠脂肪代谢及解耦联蛋白1 mRNA表达的相关研究[J].辽宁中医杂志，2010，03：541-543.[7]廖梅香，李银保，朱卫丰，等热证大鼠模型肝脏组织中腺苷酸含量的测定[J].湖北农业科学，2010，04：954-955.[8]张福利，许宏连，马艳春，等脂多糖对寒体、热体、常体大鼠攻毒发热后体温曲线、一氧化氮的影响[J].中医药学报，2007，35（1）：17-19.[9]江启煜，黄文恒，柴银口服液对大鼠内毒素诱导发热模型的 影响[J].贵阳中医学院学报，2010，03：71-73.[10]金龙，李军梅，洪晓华，等.中药方剂对实验性发热模型动物体温的影响[J]中国中西医结合杂志，2004，Sl：236-239[11]陈婷，任秋生，杨爱东，等、山药替代白虎汤中粳米干预发热模型的比较研究[J].中国医学工程，2014，08：158 +160.[12]张恩户，赵勤，侯建平，等.补中益气汤对家兔脾虚发热模型体温、脑脊液PCE_2和PO/AH区组织cAMP含量的影响[J].中医药学刊，2003，09：1529 - 1552.[13]胡春萍，蒋加进，石磊，等，牦牛角等6种角类药超细粉对发热家兔的影响[J].医学动物制，2006，04：235-238.[14]赵娇.白虎汤中石膏清热作用的成分研究[D].黑龙江中医药大学.2012.[15]马健，樊巧玲，周群，蔡定芳.截营汤对细菌性高热模型家兔发热影响的实验研究[J].中国中医药科技，1995，06：28-29[16]周育平，李春生，肺炎双球菌复制家兔温病发热模型的研究[J].北京中医，2007，08：536-538.[17]加曼·沙俄，额尔敦朝鲁，纪月岭.脑膜炎奈瑟菌致蒙医未成熟热、成熟热期发热模型建立研究[J].内蒙古民族大学学报（自然科学版），2014，03：323 - 325.[18]李妤蓉，刘文利，王丽霞，等，新西兰兔金黄色葡萄球菌感染性发热模型的制备[J].医学动物防制，2014.05：516-517.[19]贾德武，叶寿山抗感滴丸主要药效学实验研究[J].中医药临床杂志，2007 ，04：351-353[20]黄厚才，家兔病毒性发热模型的研制[J].江苏药学与临床研究，1997，02：5-6[21]蔡定芳，邬祥惠，沈白尹，等，病毒性发热的家兔模型[J].中华传染病杂志，1995，02：95-97[22]杨志仙，秦炯，周国平，等，发育期大鼠高热惊厥脑损伤模型的建立[J].北京大学学报：医学版，2002，34（3）：225 -228[23]魏伟，吴希美，李元建.药理实验方法学（第4版）[M].北京：人民卫生出版社，2010：769-770.[24]贺庭桢.热结肠道型气分证大鼠模型的构建及肠道黏膜免疫病理评价研究[D].西南大学，2014.[25]陈洪，唐廷崇，盛兰弟，等，建立实验室猪发热模型[J].中国兽药杂志，2005，11：20 - 22.[26]刘永录，汤法银，李艳玲，兽用中药制剂温毒清浸膏的解热作用研究[J].中兽医学杂志，2011，02：7-8.（收稿日期：2015-01-12）