抗核抗体滴度水平与肝功能损害的相关性探讨

金妍　张苏伟

[摘要] 目的 探讨不同滴度的抗核抗体（ANA）与抗核抗体谱的相关性及其与肝功能异常检出率的临床意义。 方法 将78例ANA阳性患者根据结果滴度分为A组1∶100、B组1∶320和C组1∶1000。ANA定性检测采用免疫荧光法；抗核抗体谱检测采用免疫印迹法；ALT、AST、GGT采用速率法检测；TP采用双缩脲法检测。 结果 各滴度ANA阳性患者中ENA阳性检出率分别为A组63.33%、B组74.07%、C组80.95%。肝功能异常检出率分别为20.00%、29.60%、47.60%。 结论 ANA阳性患者肝功能损害检出率高，随着ANA滴度的升高肝功能损害检出率也升高；ANA阳性与肝功能损伤有相关性。

[关键词] 抗核抗体；抗核抗体谱；肝功能检查；自身免疫性疾病

[中图分类号] R392.11 [文献标识码] B [文章编号] 1673-9701（2015）21-0094-03

[Abstract] Objective To investigate correlation of the ANA and antinuclear antibody spectrum， and clinical significance of the abnormal liver function rate. Methods A total of 78 cases of ANA positive were divided into group A（1∶100）， group B（1∶320） and group C（1∶1000）. ANA qualitative detection by immunofluorescence method； Antinuclear antibody spectrum detection using western blot method； ALT， AST， GGT were detected by the rate method； Biuret method was used to test TP. Results ENA positive detection rate were group A（63.33%）， group B（74.07%）， group C（80.95%）. The abnormal liver function rate was 20.00%， 29.60%， 47.60%. Conclusion Liver function abnormalities in patients with ANA positive rate is increased， abnormal liver function rate is also increased， so ANA is associated with the abnormal liver function.

[Key words] Anti nuclear antibodies； Antinuclear antibody； Liver function tests； Autoimmune diseases

自身免疫疾病（AID）是由多种自身抗体作用导致的机体多器官损伤性疾病，临床表现多样化，常见疾病如系统性红斑狼疮（SLE）、干燥综合征（SS）、混合性结缔组织病（MCTD）、类风湿性关节炎（RA）、自身免疫性肝炎（AIH）、原发性肝硬化（PBC）、系统性硬皮病（PSS）、特发性血小板减少性紫癜（ITP）等[1]。AID几乎可累及人体的各系统、组织和器官，造成组织和器官的损伤，是主要的致残性疾病之一。免疫性疾病中有许多自身抗体，抗核抗体ANA就是自身抗体的一种[2]。很多AID是以临床症状出现前数月或数年即呈现自身抗体为特征的慢性疾病，自身抗体也可以预示疾病特异性、严重程度和进展，通过研究抗核抗体和抗核抗体谱的关系，对其联合检查进行疾病的辅助诊断、判断疾病活动程度、观察治疗效果、指导临床用药等方面有重要意义[3]。在自身免疫疾病中，伴随着ANA阳性，常可出现肝功能损害，抗核抗体与肝功能损害的联系的探讨对于临床的及时保肝治疗具有重大意义。但关于ANA与抗核抗体谱及肝功能异常的关系还少见报道。本文回顾性分析78例ANA阳性并进行抗核抗体谱和肝功能检查的患者数据，现报道如下。

1 资料与方法

1.1 标本来源

收集2014年9～12月汕头中心医院检测ANA阳性的患者88例，对其进行筛选，排除10例没有在同一次抽血进行抗核抗体谱和肝功能检查的患者，对剩余的78例进行分组；根据结果滴度分为A组1∶100（n=30）、B组1∶320（n=27）和C组1∶1000（n=21），各例均有在同一次抽血检查进行抗核抗体、抗核抗体谱和肝功能检查。

1.2 主要试剂与仪器

抗核抗体检测试剂盒和抗核抗体谱检测试剂盒购自欧蒙医学实验诊断有限公司。肝功能检查试剂盒购自美国贝克曼库尔特公司，采用美国贝克曼库尔特AU5821-1全自动分析仪进行检测。

1.3 方法

1.3.1 ANA定性检测 免疫荧光法：将稀释的血清标本与生物载玻片一起孵育，若IgG、IgA、IgM抗体结合相应核抗原，则为阳性。二次孵育时，由于荧光素标记的抗体与抗原结合，可在荧光显微镜先观察到特异性荧光。结果判断：抗体的滴度可根据不同稀释度血清所产生的荧光强度进行判断，见表1。

1.3.2 抗核抗体谱 免疫印迹法：第一次孵育时，稀释血清与检测膜反应，阳性标本的特异性抗体与对应的抗原反应，再加入酶标抗体孵育，加入底物，便可产生颜色反应。结果判断：肉眼观察，如果结果为阳性反应条膜上出现相应的结合印迹，没有出现条形印迹的项目即为阴性。

1.3.3 肝功能检测 丙氨酸氨基转移酶（ALT）、门冬氨酸氨基转移酶（AST）、r-谷氨酰转移酶（GGT）、总蛋白（TP）均用Beckman DXC800全自动生化仪上机检测。

1.4 统计学处理

使用SPSS11.5统计学软件进行统计分析，计数资料多组间比较用χ2检验，P<0.05为差异有统计学意义。

2 结果

2.1 ANA阳性患者抗核抗体谱各项目检出率

78例ANA阳性患者中检出抗核抗体谱阳性有56例，占71.79%；56例ENA阳性患者抗SSA抗体检出40例，占阳性结果的86.95%；A组抗核抗体谱检出阳性19例，阳性率63.33%；B 组抗核抗体谱检出20例，阳性率74.07%；C组抗核抗体谱检出阳性17例，阳性率80.95%；检出率C组高滴度组大于B组中滴度组，B组大于A组低滴度组；抗SSA抗体的检出率最高，达37.18%。见表2。

2.2 ANA阳性各组患肝功能异常指标检出率

78例ANA阳性患者中肝功能异常者为46例，占58.97%（46/78）； 其中，肝酶增高异常24例，占52.17%（24/46）；有4例所有肝酶全部升高。总蛋白TP增高共32例，清蛋白/球蛋白A/G倒置的共有30例，总蛋白增高且清蛋白/球蛋白A/G降低的患者共有35例，占76.09%（35/46），肝功能异常患者的检出率C组大于B组，B组大于A组，组间两两比较，差异有统计学意义。见表3。

3 讨论

自身免疫疾病AID是指机体产生针对自身成分的抗体或细胞性免疫效应的现象。由此而引起自身组织的损伤并出现临床症状。自身免疫病大都为原发性，少数为继发性。前者与遗传因素密切相关，预后多数不良，常呈慢性迁延[4]。自身免疫病的筛选指标可以选择ANA，抗核抗体ANA是一组将自身真核细胞的各种成分脱氧核糖核蛋白（DNP）、DNA、可提取的核抗原（ENA）和RNA等作为靶抗原的自身抗体的总称，能与所有动物的细胞核发生反应，主要存在于血清中，也可存在于胸水、关节滑膜液和尿液中。ENA 即抗可溶性抗原。抗可溶性抗原ENA抗体是针对核内可提取性核抗原的一种自身抗体，有10余种，主要为抗核糖核蛋白抗体（RNP）和酸性核蛋白（Sm）抗体。所谓ENA是指在盐水中可溶解的一部分核抗原。ANA与ENA联合检测可以提高AID的检出率，对AID的诊断、治疗及预后做出有益的评估[6，7]。本文结果显示，各滴度ANA阳性患者中ENA阳性的检出率分别为A组低滴度组63.33%、B组中滴度组74.07%、C组高滴度组80.95%，随着ANA滴度的升高，ENA阳性的检出率也对应升高。ANA为阳性结果的患者ENA并不一定阳性，而是随着ANA滴度的升高ENA检出率也升高，因此，两者的阳性率并不完全吻合，而是存在一定的检测误差，但是随着ANA滴度的升高，两个结果的阳性率趋向于吻合，即高滴度时检测的误差影响较小。因此本实验的结果可以充分证明结论，即ANA滴度的升高ENA阳性的检出率也对应升高。

自身免疫疾病AID是指机体产生针对自身成分的抗体或细胞性免疫效应的现象。由此而引起自身组织的损伤并出现临床症状，其发病机制复杂，经常累及多个脏器器官，肝脏是最容易受到侵犯的器官，也是人体合成多种蛋白质的主要器官，是重要的免疫器官。本文结果显示，C组高滴度组的肝功能异常检出率大于B组中滴度组，而B组又大于A组低滴度组，由此可见肝功能异常的检出率随着ANA滴度的升高而升高。AID可以产生大量的自身抗体累及脏器器官，脏器器官受损又可诱导产生自身抗体，因此自身抗体的水平高低可以反映脏器的受损程度[8-13]。ANA可以增强机体的免疫应答水平，导致机体脏器受到自身的免疫性损伤。

从本文来看，ANA的检测对于AID患者的确诊有重要的意义，ANA阳性与ENA的阳性率矛盾主要是因两种物质的检测方法的灵敏度不同导致，但是在高浓度的自身抗体时，这种检测的误差的影响较小，因此ENA检测阳性率随着ANA的滴度而发生变化，高滴度ANA时ENA的检测阳性率也高。ANA阳性与肝功能损伤有一定的关联性，随着ANA的浓度的升高，对于肝脏的损伤程度也升高，肝功能检测阳性率随着ANA的滴度在升高。但ANA阳性患者的ENA检查结果并非一定为阳性，两者的阳性率并不完全吻合，对其进行联合检测有利于对自身免疫疾病进行辅助诊断。因此ANA的不同滴度检测对于自身免疫性疾病的诊断、治疗、预后的判断具有重要的临床意义，对自身免疫性疾病引起的器官损伤特别是肝脏的损伤诊断具有一定的意义。

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（收稿日期：2015-04-21）