多项目联合检测在阴道加德纳菌感染的应用研究

戴绘芬 徐振东 花鸿燕

多项目联合检测在阴道加德纳菌感染的应用研究

戴绘芬 徐振东 花鸿燕

目的 分析妇科阴道感染患者加德纳菌感染的快速检测方法。方法 选择260例检查阴道感染患者为观察组，选择同期进行体检的健康妇女260例作为对照组，对2组进行多项目联合检测。结果 观察组患者加德纳菌阳性总检出率为47.02%，而对照组加德纳菌（gardnerella vaginalis，GVA）阳性总检出率为7.3%，二者比较差异有统计学意义(P＜0.05)。结论 采用多项目联合检测阴道分泌物中的加德纳菌，成本低廉、操作方便、无需特殊设备，达到了加德纳菌检测快速、简便、敏感性高的目的，适合在基层医疗单位实验室推广应用，有可能成为今后实验室诊断和主要快速检测方法之一。

阴道感染；加德纳菌感染；多项目联合检测

近年来, 女性尿路感染的发病率有上升趋势。已成为困扰患者的顽疾，受到人们的重视。细菌性阴道病(bacterial vaginosis，BV)也称特异性阴道炎，临床表现为阴道分泌物增加，并有典型的鱼腥味，这种鱼腥味在月经或性交后尤为明显[1-2]。阴道加德纳菌(GVA)属于革兰氏阴性小杆菌，或者是球样小杆菌的变异体，有厌氧、嗜血的特性，是BV最常见病原菌，也是性接触传播疾病的病原菌之一。GVA不仅引起阴道炎和尿道炎、输卵管异位妊娠、胎膜早破、早产、低体重儿、急性输卵管炎、手术感染和子宫颈癌等，还与男性尿道感染/男性不育相关。目前报道阴道加德纳菌的检测方法主要有涂片革兰染色找线索细胞、胺试验、BV试验、分离培养法、免疫学方法、PCR法等。本院对260例阴道感染的女性患者进行了加德纳菌的致病性和快速检测探讨，现报道如下。

1 资料与方法

1.1 一般资料 2011年1月～2012年12月间选择260例来海安县中医院检查的阴道感染患者为观察组；其中阴道炎197例，宫颈炎63例；选择同期进行体检的健康妇女260例作为对照组。2组患者性别等一般资料比较经检验差异无统计学意义，具有可比性。

1.2 方法 先用无菌阴道窥器扩张阴道，再用无菌棉拭子于阴道距离宫颈口1～2cm处取宫颈或阴道分泌物及时送检。

革兰氏染色法：取宫颈或阴道分泌物直接涂片，自然干燥后火焰固定行革兰氏染色，于显微镜下观察，黏附在上皮细胞内的大量革兰氏阴性或革兰氏阳性的小杆菌或球杆菌，即为线索细胞，同时镜下革兰氏阳性杆菌少见或缺失（此即为阴道乳酸杆菌少见或缺失）。

胺试验法：将2滴100g/L的KOH溶液滴于涂有阴道分泌物的载玻片上，立即嗅闻是否有鱼腥味，若发出鱼腥气味即胺试验阳性。

pH试验法：用精密pH试纸(pH3.8～5.4)进行测试，如阴道分泌物的pH＞4.5，即疑为阴道加德纳菌引起pH改变。

分离培养鉴定法：将无菌生理盐水中的阴道或宫颈分泌物，以无菌手续接种于加德纳琼脂平板，置5%CO2孵育箱培养48h，挑取灰色、半透明、光滑、露滴状样菌落，如为革兰染色阴性小杆菌者，按说明书接种于棒状杆菌鉴定条上进行鉴定。

1.3 统计学方法 使用SPSS13.0统计软件进行统计分析，正态计量资料采用“±s”表示，组间比较采用t检验；计数资料用例数（n）表示，计数资料组间率（%）的比较采用χ2检验；P＜0.05为差异有统计学意义。

2 结果

观察组患者加德纳菌阳性总检出率为47.02%，而对照组加德纳菌阳性总检出率为7.3%，二者比较差异有统计学意义(P＜0.05)。

表1 几种检测方法结果

3 讨论

阴道加德纳菌是一种革兰染色阴性或染色不定的小杆菌或球杆菌，是Gardner于1954年从阴道炎患者阴道分泌物中分离的pH升高的一种细菌。过去认为GVA可视为生殖道正常菌群，现在加德纳菌已被确认为阴道感染性疾病的重要病原菌，并与输卵管妊娠、胎膜早破和新生儿早产等不良妊娠结局以及女性间质性膀胱炎等关系密切[3]。因此实验室建立快速、准确、可靠的诊断方法尤为重要。

随着科学技术的不断进步，医学检验诊断技术的发展也非常神速。针对阴道加德纳氏菌感染的实验诊断方法主要：胺试验诊断法；聚合酶链式反应（PCR）检测法；显微镜检测法；荧光抗体检测法，此外，实验诊断方法还有酶测定法、分泌物pH值测定法、气相色谱法等一些诊断阴道加德纳氏菌感染的方法[4]。目前革兰染色找线索细胞、胺试验诊断法和分泌物pH值测定法等单项方法检测仍是一种诊断细菌性阴道病的常规、快速的方法但是受到各自方法原理和检验人员人为因素的制约，各存在一定的缺点，分离培养鉴定法是国际确认的金指标，临床上由于不正规的应用抗生素，导致许多病原体在一定程度上受到抑制，造成分离培养的效果不理想，且培养技术耗时较长。目前还有一种PCR技术，该方法检测的是病原体的遗传物质DNA，有高度的特异性和敏感性，选用特异的寡核苷酸引物序列，不受抗生素治疗等药物治疗的影响，对彻底根治疾病有重要临床意义。但该技术的设备和试剂较为昂贵，在基层医院难以普及。因此根据本次研究结果推荐的检测方法为：革兰染色油镜下查找线索细胞、胺试验、pH测试三者组合的检测。本研究应用三种不同的方法技术检测阴道感染患者和正常者体检者的阴道分泌物，发现观察组患者加德纳菌阳性总检出率为47.02%，而对照组加德纳菌阳性总检出率为7.3%，二者比较差异有统计学意义(P＜0.05)。表明GVA是引起阴道炎和尿道炎等的主要病原体[5]，且在一定程度上克服了单方法检测带来的假阳性的特点。本次研究在健康妇女中检出该菌但无临床症状，可能与加德纳菌的感染量及生物型别不同有关[6]。

综上所述，采用此方法检测阴道分泌物中的加德纳菌，成本低廉、操作方便、无需特殊设备，达到了加德纳菌检测快速、简便、敏感性高的目的，适合在基层医疗单位实验室推广应用，有可能成为今后实验室诊断和主要快速检测方法之一。

[1] 张春霞，陈庆华.阴道炎治疗药物及其外用制剂研究进展[J].世界临床药物，2010，31（6）：381-386.

[2] 辛亚兰，王卡娜，何荣霞，等.4396例已婚妇女妇科病患病情况研究[J].现代预防医学，2011，38（4）：630-632.

[3] 王英.浅谈妇科疾病的症状和预防措施[J]．求医问药：学术版，2012,10（10）:29-30.

[4] 李连青,朱庆义,刘俊芬,等.道加德纳菌对细菌性阴道病的病原学诊断评价[J].中华医院感染学杂志,2005,15(2):226-230.

[5] 陈丽丹，黄晓燕.尿液中阴道加德纳菌的分离培养及药敏试验[J].现代检验医杂志,2013,28(6):110-114.

[6] 吴爱武,陈艳珍.阴道加德纳菌生物型与细菌性阴道病的关系[J].中国微生态学杂志,2000,2(6):337-339.

Objective Analysis patients with gynecological vaginal infection Gardnerella infection fast detection method. Methods Select the 260 patients in Hai’an County Hospital of Traditional Chinese Medicine examination vaginal infection in patients in the observation group, select the concurrent examination of 260 cases of healthy women as a control group. Results The patients gardnerella total positive rate was 47.02%, while the control group GVA gardnerella total positive rate was 7.3%,the difference was statistically signifcant (P＜0.05).Description Gardnerella bacterial vaginosis is one of the main pathogens. Conclusion Use this method of detection of Gardnerella vaginal secretions, low cost, easy to operate, no special equipment, reached gardnerella testing fast, easy, aim high sensitivity, suitable for primary health care units laboratory application, may become a major future laboratory diagnosis and rapid detection methods.

Vaginal infections; Gardnerella infection;Joint detection techniques

10.3969/j.issn.1009-4393.2015.6.016

江苏 226600 海安县中医院检验科 （戴绘芬 徐振东 花鸿燕）