不同类型乡村井水中总大肠菌群的研究

郭华　李海燕　胡伟

摘要[目的] 掌握宜宾市翠屏区农村地区居民饮用水的水质状况。[方法] 用多管发酵法测定田间井水、草丛井水、果林井水、鱼塘井水以及山泉井水等5类井水中的总大肠菌群含量。[结果] 5类井水中总大肠菌群含量均不能达到国家饮用水标准（≤3个/L）；每类井水中总大肠菌群的含量差距较大；井水中总大肠菌群的含量从大到小排序为：田间井水 > 鱼塘井水 > 果林井水 > 草丛井水 > 山泉井水。[结论] 该研究可为翠屏区乡村群众的饮用水安全提供指导。

关键词井水；饮用水安全；总大肠菌群

中图分类号X172；S273.4文献标识码A文章编号0517-6611（2015）07-220-02

Study on Total Coliforms in Different Kinds of Rural Well Water

GUO Hua1， LI Hai-yan1， HU Wei2*

（1. Yibin Environmental Monitoring Center， Yibin， Sichuan 644000； 2. Cuiping Region Environmental Station of Yibin City， Yibin， Sichuan 644000）

Abstract[Objective] To obtain drinking water quality status in villeges of Cuiping District. [Method] Total coliforms in 5 kinds of rural well water， such as field wells， brushwood well， orchard well， fishpond well and mountain spring well are detected with the multiple-tube fermentation technique to master the quality situation of the residents drinking water in rural areas of Cuiping District. [Result] None of the total coliforms in five kinds of well water reach the notional drinking water standard of no more than 3 per L.Large content of total coliforms in different kinds of well water are revealed. The content of total coliforms in well water ordered from lowest to highest revealed to be： field well water > ponds well water > orchard well water > brushwood well water > spring well water. [Conclusion] The study can provide guidance for drinking water safety of villages in Cuiping District.

Key wordsWell water； Safety of drinking water； Total coliforms

近年来，国家对环保不断加强重视，更加关注人民的居住、生活环境，特别对散居的乡村地区的生活用水也给予了高度重视。总大肠菌群对人体健康是有害的，它是用来间接反映水体污染状况的一个重要指标。总大肠菌群是需氧及兼性厌氧的革兰氏阴性的无芽孢杆菌，它能在37 ℃ 48 h内发酵乳糖产酸产气，包括埃希氏菌属、柠檬酸杆菌属、肠杆菌属以及克雷伯菌属等细菌。总大肠菌群广泛分布于天然水体环境中，不论是地表水或地下水，甚至雨水或雪水，都可能含有总大肠菌群。未经处理，直接饮用这样的水会危害人们的身体健康。

当水体受到人畜粪便、生活污水或某些工业废水污染时，水中的总大肠菌群会大量增加。因此，水的细菌学检测，特别是总大肠菌群的检测，在环境质量评价、环境卫生监督等方面具有重大的意义，例如了解农村居民饮用水的水质状况[1-2]。翠屏区位于四川盆地南缘，地势呈南北两翼高而中部低，总体由西向东倾斜，由于特殊的地貌地势，境内乡村居民多为散居方式。由于集中供水成本高，境内乡村居民多取用井水作为生活用水，水中有害微生物超标的现象较为普遍。乡村居民常在田间、草丛中、果林中、鱼塘附近以及山体低洼处等环境打井，也常忽略了井水的卫生状况。为了掌握该区农村地区居民用水的水质状况，笔者定期测定这5类井水中的总大肠菌群含量，以期为该区乡村群众的饮用水安全提供指导。

1材料与方法

1.1试验仪器

冷藏柜（SC-308C型，河南新飞）、霉菌培养箱（MJ-250-II型，上海齐欣科学仪器有限公司）、高倍显微镜（DM500型，LEICA）。

1.2试验药品

乳糖蛋白胨：青岛高科园海博生物技术有限公司；品红亚硫酸钠琼脂培养基：北京三药科技开发公司。

1.3培养基的制备

单倍乳糖蛋白胨培养基：将乳糖蛋白胨用蒸馏水配制成23 mg/ml浓度的溶液，然后取10 ml于试管中（内含倒管），最后于115 ℃高压灭菌20 min，用于总大肠菌群的培养。

三倍乳糖蛋白胨培养基：称取乳糖蛋白胨用蒸馏水配制成69 mg/ml浓度的溶液，然后取5 ml于试管中（内含倒管），最后于115 ℃高压灭菌20 min，用于总大肠菌群的培养。

品红亚硫酸钠培养基：称取42 g品红亚硫酸钠于1 L蒸馏水中，加热溶解后于115 ℃高压灭菌20 min，最后倒入无菌培养皿中待其凝固。

1.4试验方法

1.4.1采样。

分别从翠屏区具有代表性的代家村、方家沟、梨子坳、苍水岩、塘弯等5个村社各选取4个采样点（记为1#、2#、3#、4#）来代表田间井水、草丛井水、果园井水、山泉井水、鱼塘井水，从井中采取水样检测总大肠菌群。

1.4.2总大肠菌群的测定。

将水样稀释10倍后取10 ml加入5个装有5 ml三倍浓缩乳糖蛋白胨培养液的试管中（内有倒管），再取1 ml上述稀释后的水样加入5个装有10 ml单倍乳糖蛋白胨培养液的试剂管中（内有倒管），最后将上述稀释水样再稀释10倍，取1 ml加入5个装有10 ml单倍

乳糖蛋白胨培养液的试管中（内有倒管），将各管充分混匀，置于37 ℃恒温箱培养24 h。

待培养24 h后，发酵试管颜色变黄为产酸，小玻璃倒管内有气泡为产气。将产酸产气及只产酸发酵管，分别用接种环划线接种于品红亚硫酸钠培养基，置37 ℃恒温箱内培养18～24 h，挑选符合特征的菌群，取菌落的一小部分进行涂片、革兰氏染色、镜检。若涂片镜检的菌落为革兰氏阴性无芽胞的杆菌，则挑选该菌落的另一部分接种于普通浓度乳糖蛋白胨培养液中（内有倒管），每管可接种分离自同一初发酵管的最典型菌落1～3个，然后置于37 ℃恒温箱中培养24 h，有产酸产气者，即证实有大肠菌群菌存在。根据证实有大肠菌群存在的阳性管（瓶）数查表得到MPN值（公式（1）），报告每升水样中的大肠菌群数[3]。

MPN值=MPN指数×10（ml）接种量最大的一管（ml）（1）

2结果与分析

2.1田间井水中总大肠菌群含量的测定

由于水田区域水量比较充足，田间空地成为挖井较好的选址。该类型井中的井水多由田水通过泥土渗透而来，由于泥土具有吸附、迟滞作用使得水中部分总大肠菌群被土壤过滤掉。同时农村散养的鸡、鸭、鹅等禽畜排泄的粪便会进入田间，另外农业生产时所施的农家肥中也含有大量的总大肠菌群。因而测定田间井水中总大肠菌群的含量是十分必要的。田间井水中总大肠菌群含量的测定结果如图1所示。

图1田间井水中总大肠菌群的测定结果

由图1可知，该地区田间井水中总大肠菌群的含量差异较大，从3 100～4 900个/L，虽然低于其他地区的16 000个/L[4]，但均严重超过国家饮用水标准的最大值3个/L[5]。通过对该地区生活用水现状的调查，发现该地区禽畜养殖有一定规模，另外农家肥施用量较大，这些对田间井水中总大肠菌群含量的超标均有较大贡献。

2.2草丛井水中总大肠菌群含量的测定

由于草丛根系比较发达，有松土作用，孔隙较多的土壤吸水作用较好，因此在草丛中挖井也是一种较好的选择。由于卫生意识不强，多数村民没有在井口加盖，使得落叶杂草较易掉入井里。水中的落叶杂草等生物质腐烂后经过一系列的生物化学作用，在适当的温度下，会滋生大量的总大肠菌群。草丛井水中总大肠菌群含量的测定结果如图2所示。

图2草丛井水中总大肠菌群的测定结果

与图1田间井水中总大肠菌群含量的测定结果相比，可以看出草丛井水中总大肠菌群含量相对较低，总体在1 300～1 700 个/L之间，这是由于这类井水受农业生产活动影响较小，草丛对井水也具有一定的遮蔽作用。由图2还可以看出，草丛井水中总大肠菌群含量比较均匀。

2.3果林水井中总大肠菌群的测定

果林间土壤含水量也较为丰沛，但同时受农业生产活动影响的机率也较高，例如定期给果木的施肥以及水果的腐烂，都会滋生大量的总大肠菌群。这类井水即便通过土壤的过滤，井水中的总大肠菌群含量也时常超标。果林水井中总大肠菌群含量的测定结果如图3所示。

图3果林井水中总大肠菌群的测定结果

由图3可知，果林井水中总大肠菌群含量差异不大，维持在2 100～2 600 个/L之间。由于果林中的土壤较为紧实，果木间的间距相对均匀，土壤对总大肠菌群的过滤作用不大。

2.4鱼塘水井中总大肠菌群的测定

在鱼塘附近选址挖井，水井离鱼塘有一段距离，然而鱼类养殖过程中会产生大量的废弃物，如鱼类排泄物、未被利用的青草饲料经过一段时间后都可能带有大量的总大肠菌群。鱼塘井水中总大肠菌群的测定结果如图4所示。

图4鱼塘水井中总大肠菌群的测定结果

由图4可知，鱼塘水井中总大肠菌群的含量在4 200～4 600个/L之间，略低于田间井水中的含量，这是由于这两类水井所处的环境相似。

2.5山泉井水中总大肠菌群的测定

山泉井水是乡村居民

生活用水最佳的选择，这类山泉水主要从山体低洼处浸出。

山泉井水中总大肠菌群含量的测定结果如图5所示。

图5山泉井水中总大肠菌群的测定结果

由图5可知，山泉井水中的总大肠菌群的含量是这5类井水中总大肠菌群含量中最低的，但仍高于500 个/L，这是因为这类水井大多未加盖，雨水直接或经土壤过滤进入水井的过程中带入了大量的总大肠菌群。

3结论

通过对田间井水、草丛井水、果林井水、鱼塘井水以及山泉井水等5类井水中总大肠菌群进行测定，结果发现，这5类井水中总大肠菌群均不能达到国家饮用水总大肠菌群标

准（≤3个/L）；每类井水中总大肠菌群的含量差距较大；这5类井水中总大肠菌群的含量按从大到小的顺序排序为：田间井水>鱼塘井水>果林井水>草丛井水>山泉井水。

4 建议

乡村居民对生活用水的重视程度不高，因此根据现实条件对乡村居民生活用水提出一些参考性建议：在有条件的乡村采用集中供水，在没有条件集中供水的乡村，选择远离农业生产活动的地方打井的环境，同时将井尽量挖深；取水后用干净的水缸加盖储存，并在澄清后经煮沸再饮用。

参考文献

[1] 曹文婷，蒋兆峰，徐虹，等.句容市区域供水对农村饮水卫生质量的影响[J].职业与健康，2013，29（23）：3181-3182.

[2] 操基玉，张留喜，孙峰，等.合肥农村不同水系地区井水卫生学调查[J].环境与健康杂志，2006，23（4）：331-333.

[3] 国家环境保护总局《水和废水监测分析方法》编委会.水和废水监测分析方法[M].4版.北京：中国环境科学出版社，2002：697-698.

[4] 潘新明.332份农村饮用井水总大肠菌群和耐热大肠菌群污染状况分析[J].海峡预防杂志，2009，15（6）：60-61.

[5] 中华人民共和国卫生部.GB/T5750-2006.生活饮用水标准检验方法[S].北京：中国标准出版社，2006.