贵州省猪瘟血清学调查研究

张 华， 李照伟， 李 涛， 王 慧， 尹 鑫， 王伟丞

(贵州省动物疫病预防控制中心，贵州贵阳550008)



贵州省猪瘟血清学调查研究

张 华， 李照伟， 李 涛， 王 慧， 尹 鑫， 王伟丞

(贵州省动物疫病预防控制中心，贵州贵阳550008)

为了解2012—2014年贵州省猪瘟免疫防控情况，采用间接ELISA检测方法，对随机采集我省9个市(州)11 390个场点113 342份经过猪瘟疫苗免疫后的猪血清样品，进行猪瘟免疫抗体检测。结果显示，猪瘟免疫抗体平均合格率为80.92%； 2012—2014年猪瘟免疫抗体合格率分别为78.79%、 82.48%、 82.37%，连续3年均达到国家免疫合格标准70%以上，呈现稳定的上升趋势，且2013、 2014年样品免疫抗体合格率显著高于2012年；按照不同季度、不同场点、不同地区进行统计分析，检测样品猪瘟免疫抗体合格率也均达到70%以上。研究结果表明，贵州省近3年猪瘟免疫防控工作较为理想。

猪瘟；间接ELISA；血清学调查；贵州省

猪瘟(Clssical swine fever, CSF)是由黄病毒科，瘟病毒属的猪瘟病毒(Clssical swine fever virus, CSFV)引起的一种急性、热性和高度接触性传染病[1]。该病在世界各国广泛流行，是对养猪业危害严重的重要传染病之一，造成了巨大的经济损失[2，3]。OIE将猪瘟列为必须通报的动物疫病，在我国也被列为一类动物疫病[4]。猪是该病唯一的自然宿主[1]。现今集约化、规模化猪饲养程度越来越高，大量引种、频繁流通导致带毒猪的存在和与其他猪病毒病混合感染的情况越来越严重，给猪瘟的免疫防控造成一些困难[5，6]。本调查旨在对2012—2014年连续3年采集猪瘟疫苗免疫后的猪血清样品进行猪瘟免疫抗体检测，通过不同年份、不同季度、不同场点以及不同地区样品免疫抗体合格率的统计和比较，分析得出贵州省近3年猪瘟免疫预防的整体情况，从而系统全面地研判我省猪瘟的免疫防控工作是否有效，相应的免疫程序、技术措施是否合理，为今后更有针对性地防控猪瘟，以及对猪瘟免疫水平和免疫效果的评估提供科学的理论依据。

1 材料与方法

1.1 材料

1.1.1 血清样品：2012—2014年间于猪瘟疫苗免疫后随机采集猪血并及时分离血清，-20 ℃保存备用。采集场点覆盖全省9个市(州)，包括贵阳市、六盘水市、遵义市、安顺市、铜仁市、毕节市、黔西南州、黔东南州和黔南州。

1.1.2 检测试剂盒：猪瘟病毒ELISA抗体检测试剂盒，购自武汉科前动物生物制品有限公司。

1.1.3 仪器设备：微量移液器、震荡器、温箱、酶标仪。

1.2 方法

1.2.1 血清样品检测方法：应用间接ELISA检测法，严格按照检测试剂盒内的说明书进行操作。通过配制洗涤液，稀释样品及阴阳性对照，设置阴性对照孔、阳性对照孔和待检样品孔，加样，温育，洗板，加酶标二抗，温育，洗板，加酶结合底物，显色，终止等操作，测定各孔的D630 nm值。

1.2.2 结果判定：在酶标仪上测各孔D630 nm值。试验成立的条件是阳性对照孔平均D630 nm值≥0.6，阴性对照孔平均D630 nm值<0.3。样品D630 nm值≥0.35，判为阳性；样品D630 nm值<0.35，判为阴性。

2 结果

2.1 猪瘟免疫抗体总体检测结果 2012—2014年于贵州省9个市(州)11 390个场点随机采集113 342份猪血清样品，进行猪瘟免疫抗体检测。通过间接ELISA检测方法，检测出阳性血清91 719份，免疫合格率为80.92%(91 719/113 342)。见表1。

2.2 不同年份猪瘟免疫抗体检测结果 由表1、图1可看出，随机检测的113 342份猪血清样品中，2012年检测了46 582份，抗体合格率为78.79%(36 700/46 582)； 2013年检测了28 136份，抗体合格率为82.48%(23 206/28 136)； 2012年检测了38 624份，抗体合格率为82.37%(31 813/38 624)， 2013年和2014年的免疫抗体合格率均高于2012年。

通过卡方检验[7]，2013年的抗体合格率与2012年相比，以及2014年的抗体合格率与2012年相比，差异都是极显著的。

表1 2012—2014年猪瘟样品检测情况

图1 2012—2014年猪瘟样品免疫合格率比较

2.3 不同季度猪瘟免疫抗体检测结果 由表2、图2可以看出，连续3年不同季度血清样品的猪瘟免疫抗体合格率均达到了80%以上，其中第一季度的抗体合格率最高。

表2 2012—2014年不同季度猪瘟免疫抗体合格率 %

图2 不同季度样品猪瘟免疫抗体合格率比较

2012年4个季度的猪瘟免疫抗体合格率呈现明显的下降趋势，在第3、4季度下降到了80%以下； 2013年4个季度的猪瘟免疫抗体合格率则较平稳，都保持在80%以上；而2014年4个季度的猪瘟免疫抗体合格率呈现先降后升的趋势，总体也都保持在80%以上。

2.4 不同场点猪瘟免疫抗体检测结果 由表3、图3可看出，连续3年不同场点血清样品猪瘟免疫抗体的合格率水平存在一定的差异，其抗体合格率由大到小依次为种猪场>商品代饲养场>散养户>其他>交易市场，5个场点均达到70%以上免疫抗体水平，其中种猪场和商品代饲养场样品的抗体合格率都达到了80%以上；连续3年中散养户样品的抗体合格率是逐年升高的。

图3 不同场点样品猪瘟免疫抗体合格率比较

表3 2012—2014年不同场点猪瘟免疫抗体合格率 %

2.5 不同地区猪瘟免疫抗体检测结果 由表4、图4可以看出，连续3年9个市(州)的血清样品猪瘟免疫抗体合格率均达到了70%以上，其中7个市(州)的抗体合格率达到了80%以上；连续3年中六盘水市、铜仁市和毕节市的免疫抗体合格率都是逐年上升的。

表4 2012—2014年不同地区猪瘟免疫抗体合格率 %

图4 不同地区样品猪瘟免疫抗体合格率比较

3 讨论

3.1 研究表明，2012—2014年于贵州省9个市(州)11 390个场点采集的113 342份猪血清样品中，共检出猪瘟免疫抗体阳性血清91 719份，免疫合格率为80.92%(91 719/113 342)。不同年份样品的免疫合格率分别为78.79%、82.48%、82.37%，呈现上升且趋于稳定的趋势，2013年和2014年免疫合格率(80%以上)较2012年显著上升，达到农业部规定免疫抗体合格率 70%以上要求，这表明贵州省对于猪瘟的免疫预防是合理有效的，且免疫效果是显著的。

3.2 对于不同季度样品的调查发现，猪瘟免疫抗体合格率均达到80%以上，其中以第一季度的抗体合格率最高。在猪瘟高发的春秋季节，免疫抗体合格率都能保持在80%以上，这证明相应的猪瘟免疫程序和方法是行之有效的。

3.3 对于不同场点样品的调查发现，猪瘟免疫抗体合格率均达到70%以上，抗体合格率依次为种猪场>商品代饲养场>散养户>其他>交易市场，其中种猪场和商品代饲养场的抗体合格率达到了80%以上，这与其规范化的饲养管理、科学的免疫预防、系统的免疫监测是密不可分的。与此同时，连续3年散养户的样品免疫抗体合格率逐年升高，这说明散养户对于猪瘟免疫工作的重视程度在不断增高，对于猪瘟免疫预防的意识在不断加强。

3.4 对于不同地区样品的调查发现，猪瘟免疫抗体合格率均达到70%以上，其中7个市(州)的抗体合格率达到80%以上，且连续3年六盘水市、铜仁市和毕节市的免疫抗体合格率都在逐年上升，这说明猪瘟免疫防控成效在我省是较普遍的。

3.5 目前，我国对猪瘟实施了强制免疫计划[8]，由上述调查结果分析可知我省近几年实施的猪瘟强制免疫措施是积极有效的，为进一步稳定和提高猪瘟免疫抗体水平，应该在合理的免疫程序指导下，加强免疫抗体的监测[9,10]，以此规划免疫时间，并结合猪瘟病原学的检测，双重评价疫苗免疫效果。此外，还应注重猪瘟的综合防控，加强种猪群净化[11,12]，设置合理的饲养环境、饲养密度，定期清洗消毒，带毒猪及时淘汰并无害化处理，向饲养管理人员普及相关知识等，尤其是散养户应多借鉴规模化养殖场的饲养、管理和免疫预防接种经验等[13]。这些都将为猪瘟从全面免疫、盲目免疫到重点免疫、针对性免疫打下基础，对于预防控制该病具有重要意义。

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[2] 赵德明，张中秋，等译.猪病学[M].第8版.北京：中国农业大学出版社，2000.157～173.

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Serological Survey of Classic Swine Fever in Guizhou Province

Zhang Hua, Li Zhaowei, Li Tao, Wang Hui, Yin Xing, Wang Weicheng

(Animal Disease Prevention and Control Center in Guizhou Province，Guiyang Guizhou 550008，China)

To investigate the immune and prevention situation of classic swine fever in Guizhou province from 2012 to 2014, a total of 113 342 swab samples were collected from 11 390 sites in our 9 city (state). We detected the antibody of classic swine fever by indirect ELISA method. Results showed that the qualified rate of antibody was 80.92%, and the qualified rate from 2012 to 2014 respectively was 78.79%, 82.48% and 82.37%. Three consecutive years reached the national immunization standard, which also assumed ascending and stable trend. According to different seasons, different sites and different regions for statistical analysis, the qualified rate of the samples of classic swine fever antibody also reached more than 70%. These results suggested that the work of immunization prevention and control was ideal in our province in recent 3 years.

Clssical Swine Fever； ELISA； Serological Survey； Guizhou Province

2015-08-27

贵州省农业攻关项目：贵州省主要人畜共患病综合防控技术研究(黔科合NY字[2011]3061号)

张华(1969—)，男，高级兽医师，贵州省动物疫病预防控制中心副主任。

S858.28

A

1007-1474(2015)06-0001-04