复方人参挥发油气雾剂对异丙肾上腺素致大鼠心肌缺血损伤的影响

丁云录，李驰坤，欧喜燕，李晓兵，张琦，陈声武*

（长春中医药大学，长春130117）

复方人参挥发油气雾剂对异丙肾上腺素致大鼠心肌缺血损伤的影响

丁云录，李驰坤，欧喜燕，李晓兵，张琦，陈声武*

（长春中医药大学，长春130117）

目的观察复方人参挥发油气雾剂对异丙肾上腺素（ISO）诱导的急性心肌缺血损伤大鼠心电图和血清心肌酶的影响。方法72只Wistar大鼠随机分为6组，即正常对照组、模型对照组、阳性对照组、复方人参挥发油气雾剂3个剂量组，每组12只。采用腹腔注射ISO方法复制大鼠急性心肌缺血模型，观测心电图，检测心肌组织中超氧化物歧化酶（SOD）活性和丙二醛（MDA）含量以及血清天门冬氨酸氨基转移酶（AST）、乳酸脱氢酶（LDH）、肌酸磷酸激酶（CK）活性。结果复方人参挥发油气雾剂能明显提高心肌组织中SOD活性，降低心肌组织中MDA含量，降低血清AST、LDH和CK活性，并改善心电图的异常，与心肌缺血模型组比较有统计学意义（P＜0.05，P＜0.01）。结论复方人参挥发油气雾剂可有效抑制急性心肌缺血损伤大鼠ST段的抬高和调节心肌酶活性，保护心肌细胞膜的结构完整性，从而保护缺血损伤心肌。

心肌缺血；异丙肾上腺素；复方人参挥发油气雾剂

复方人参挥发油气雾剂由人参超临界提取物、桂枝超临界提取物、川芎超临界提取物、丹参超临界提取物、甘松超临界提取物组方而成。其中人参大补元气，桂枝温通经脉，丹参通络止痛，甘松理气止痛，川芎活血行气，5味药配伍合理，益气养心通络止痛的功效确切。5种药物可从不同角度治疗冠心病，本研究所述药物剂型为气雾剂，可以直接作用于疾病部位或通过吸入达到有效血药浓度，减少了药物用量及对胃肠道的刺激性，避免了首过效应，并且可以迅速缓解心绞痛症状，较常用口服剂型具有起效迅速，服用方便的优点，更适合应用于冠心病急症治疗。本研究旨在证实其对异丙肾上腺素诱导的急性心肌缺血损伤大鼠心电图和血清心肌酶的影响，为复方人参挥发油气雾剂对冠心病心绞痛临床治疗提供科学研究依据。

1 实验材料

1.1 动物Wistar大白鼠，清洁级，雄性，体质量（200±20）g。动物合格证号：SCXK-（吉）2011-0004，购于长春市亿斯实验动物技术有限责任公司。

1.2 药品及试剂复方人参挥发油气雾剂由长春中医药大学研发中心提供。阳性对照药：硝酸甘油气雾剂，规格：0.5 mg／揿，200揿／瓶，批号20120321，山东京卫制药有限公司产品。盐酸异丙肾上腺素注射液，批号：120701，上海禾丰制药有限公司产品。天冬氨酸氨基转移酶（AST）试剂盒，批号：120521，中生北控生物科技股份有限公司产品。肌酸激酶（CK）试剂盒，批号：120511，中生北控生物科技股份有限公司产品。乳酸脱氢酶（LDH）测试盒，批号：20120911，南京建成生物工程研究所产品。丙二醛（MDA）测试盒，批号：20120911，南京建成生物工程研究所产品。超氧化物歧化酶（SOD）测试盒，批号：20120911，南京建成生物工程研究所产品。

1.3 仪器Powerlab／8s型八导数据分析记录仪及相关附件，澳大利亚埃德公司产品。酶标仪，型号：BIO680，日本BIORAD公司产品。可调高速匀浆器，型号：FSH-2，江苏省金坛市荣华仪器制造有限公司生产。电热恒温水浴锅，型号：HH·SY21-Ni，北京长源试验设备厂产品。台式高速冷冻离心机，型号：Biofuge Stratos，德国贺利氏公司产品。

2 实验方法［1-5］

Wistar雄性大鼠72只，体质量（200±20）g，随机分为：正常对照组，模型对照组，阳性对照药组，复方人参挥发油气雾剂高、中、低剂量组，共6组，每组12只。每天喷雾给药1次，连续7 d。最后1次喷雾给药30 min后，将动物腹腔注射10%的水合氯醛（400 mg／kg）体质量麻醉，仰位固定于鼠板上，稳定30 min，记录一段正常标准Ⅱ导联心电图。待大鼠腹腔注射给药1 h后，腹腔注射异丙肾上腺素2 mg／kg体质量。随后，记录1、3、5、10、30 min的标准Ⅱ导联心电图。以大鼠在腹腔注射异丙肾上腺素后各检测时间点心电图ST段偏移绝对值为观测指标。1 h后，腹主动脉取血，分离血清，按试剂盒要求操作测CK、LDH、AST。取心脏，制作心肌匀浆，离心取上清液，按试剂盒要求操作测MDA、SOD。试验数据以均数±标准差（¯x±s）表示，统计学处理方法采用组间t检验。

3 实验结果

本试验通过腹腔注射大剂量异丙肾上腺素，造成大鼠亚急性心肌缺血的实验动物模型。随后，观察了3个不同给药剂量的复方人参挥发油气雾剂对该种缺血性实验动物模型心电图的影响。结果表明，复方人参挥发油气雾剂对异丙肾上腺素所引起的大鼠心肌缺血有明显的保护作用。见表1。

表1 复方人参挥发油气雾剂对异丙肾上腺素所致大鼠缺血性心电图的影响（¯x±s，n＝12）

当心肌梗死后，可导致心肌细胞及周围组织溶解及坏死。坏死后的心肌细胞内糖原竭耗，肌红蛋白外溢，CK、AST及LDH释放入血。因此，血清心肌酶含量的变化是反映梗死程度的重要指标［6-7］。从表2所列数据可以看出，模型组动物血清AST、CK和LDH的释放量均明显高于对照组（P＜0.01或P＜0.05），表明模型复制成功。在给予复方人参挥发油气雾剂药物干预后，复方人参挥发油气雾剂高剂量可以明显降低大鼠血清中异常升高的AST、CK和LDH含量（与模型对照组比较均P＜0.05）；复方人参挥发油气雾剂中剂量可以明显降低大鼠血清中异常升高的CK和LDH含量（与模型对照组比较均P＜0.05）。上述试验结果表明，复方人参挥发油气雾剂在心肌缺血条件下，通过预防性给药，可以明显减少心肌酶的释放，减轻心肌损伤程度。详细结果见表2。

表2 复方人参挥发油气雾剂对心肌缺血大鼠血清AST、CK、LDH含量的影响（¯x±s，n＝12）U／L

随着心肌缺血损伤机制研究的深入，发现大量氧自由基生成及脂质过氧化物反应增强是心肌缺血损伤的主要机制之一［8-10］，SOD作为氧自由基清除酶能清除超氧阴离子，保护心肌细胞，减轻心脏功能的损伤程度。其活力的高低常间接地反映机体清除自由基的能力，当心肌缺血受损时可导致SOD活性降低。MDA则在一定程度上反映机体内脂质过氧化的程度，间接反映细胞损伤的轻重。因此，冠心病患者心肌中SOD活性下降及MDA含量升高也是反映心肌缺血、缺氧程度的重要标志。本试验中，模型对照组血清中过氧化脂质代谢产物MDA含量显著升高；相反，超氧阴离子自由基清除酶SOD活性却明显下降。表明在心肌缺血缺氧损伤后产生了大量的过氧化脂质代谢产物MDA，同时使氧自由基清除酶SOD大量被消耗。从试验结果中可以看出，复方人参挥发油气雾剂高剂量组及中剂量组均有降低动物心肌匀浆中过氧化脂质代谢产物MDA含量及升高超氧阴离子自由基清除酶SOD活性的作用（与模型对照组比较P＜0.01或P＜0.05）。详细结果见表3。

表3 复方人参挥发油气雾剂对心肌缺血大鼠心肌匀浆组织中SOD和MDA的影响（¯x±s，n＝12）

4 讨论

异丙肾上腺素（ISO）是人工合成的β受体激动剂，临床上常用于增强心肌收缩，但腹腔注射大剂量ISO可因增加心肌耗氧而造成大鼠急性心肌缺血，其心电图、心肌酶学及组织病理学变化均类似于人类急性心肌梗死的病变特征［11］。与其他心肌缺血动物模型相比，这种模型方法成本低、操作简单、可重复性强，且心肌坏死为非特异性损伤，目前已广泛应用于探索心肌缺血坏死的发生机制和评价其防治措施的实验研究。

ISO通过收缩冠状动脉、增强心肌收缩力和增加心肌耗氧量等多方面机制诱发心肌缺血。在心肌缺血的实验研究中，多以ST段抬高的毫伏数表示心肌损伤的程度。心肌缺血缺氧时，细胞膜通透性增强导致心肌酶外漏，其中尤以AST、LDH和CK为显著，其含量与缺血缺氧程度呈正比［12］。氧自由基与心肌缺血损伤有密切关系，心肌缺血后SOD活性下降，而MDA大量蓄积，破坏了细胞膜的结构和功能，引起心肌细胞严重损伤，故其可判断心肌损伤程度［13-14］。

本研究采用经典腹腔注射异丙肾上腺素诱导急性心肌缺血模型，观察复方人参挥发油气雾剂对模型动物心肌缺血损伤程度的影响。实验结果显示：复方人参挥发油气雾剂可改善心电图ST段偏移，降低心电图ST段的异常抬高，同时明显抑制急性心肌缺血时AST、CK、LDH的释放，有降低动物心肌匀浆中过氧化脂质代谢产物MDA含量及升高超氧阴离子自由基清除酶SOD活性的作用，对抗ISO诱发大鼠所致的心肌缺血损伤，表明复方人参挥发油气雾剂可保护心肌细胞膜结构完整性，对缺血性损伤的心肌细胞具有良好预防作用。

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Effects of ffrshfyqwj E1 on electrocardiogram and cardiac enzymes of myocardial injury induced by isoproterenol in rats

DING Yunlu，LI Chikun，OU Xiyan，LI Xiaobing，ZHANG Qi，CHEN Shengwu*
（Changchun University of Chinese Medicine，Changchun 130117，China）

ObjectiveTo observe the effects of ffrshfyqwj on electrocardiogram and cardiacenzymes of myocardial ischemic injury induced by isoproterenoe（ISO）in rats.MethodsSeventy-two Wistar rats were randomly divided into six groups as following（n＝12）.Acute myocardium ischemia rat model was established by ip of ISO.The level of，malondialdehyde（MDA）and superoxide dismutase（SOD）in myocardial homogenate and the content of AST，LDH，CK in serumwere observed after ISO injection.Rat ECGwas also recorded.ResultsFfrshfyqwj could significantly increase SOD activity and decrease content of MDA，AST，LDH，CK and improve the abnormity of ECG（P＜0.05，P＜0.01）.ConclusionFfrshfyqwj can inhibit the elevation of ST-T period ofacute myocardial ischemia rats，and regulate the activity of cardiac enzymes to protect the ischemic myocar-dium.

myocardial ischemia；isoproterenol；ffrshfyqwj

R285.5

A

1003-5699（2015）09-0945-04

：张瑞彬

2015-03-13）

10.13463／j.cnki.jlzyy.2015.09.024

吉林省中医药管理局中医药科技项目（YJS-0201）；吉林省科技发展计划项目（20110932）。

丁云录（1979-），男，大学本科，助理研究员，主要从事药理学研究。

*通信作者：陈声武，电话-（0431）86177510；电子信箱-chenshengwu 1958＠yahoo.com.cn