根据血液指标提早评估仔猪健康状态

Buzzard Brandi L.Edwards-Callaway Lily N.Engle Terry E.Rozell Timothy G.Dritz Steven S.（堪萨斯州立大学农学院；科罗拉多州立大学动物科学系；堪萨斯州立大学兽医学院）

朱秀高译（武汉回盛生物科技有限公司技术服务部，湖北武汉430042）

回盛“猪医生”专栏

根据血液指标提早评估仔猪健康状态

Buzzard Brandi L.1Edwards-Callaway Lily N.1Engle Terry E.2Rozell Timothy G.1Dritz Steven S.3
（1堪萨斯州立大学农学院；2科罗拉多州立大学动物科学系；3堪萨斯州立大学兽医学院）

朱秀高译
（武汉回盛生物科技有限公司技术服务部，湖北武汉430042）

摘要：将保育猪群分为健康与不健康两组。在健康猪只之间，一些血液成分和离子浓度水平有显著差异；在健康和非健康猪只之间，通过剖检并不能发现明显变化；而根据血液指标监测保育猪群的健康状态可能是有效的。

关键词：猪；儿茶酚胺；安乐死；剖检；不健康

保育群中大约有1%的仔猪会由于体弱、营养不良或行动迟缓以及易感蓝耳病或链球菌病等而造成损失。除此之外，体重较轻或营养不良的仔猪也会由于PFTS现象（断奶成长不足综合征），使其断奶后虽没有出现呼吸道、消化道或全身性症状，但会因为采食量较低而变得逐渐消瘦。一些仔猪还会出现其他能够引起食欲下降、发热、呼吸困难或体重降低的消耗性疾病。血液成分的测定对诊断、治疗和分析许多疾病的预后情况非常有价值，另外，通过对血液成分的测定来监控猪群的健康状况，可以在猪群还未表现出发病症状之前，及早发现异常。因此，将测定血液成分作为常规诊断方法，有助于我们早期确诊疾病或发现保育猪对疾病的易感性，从而减少发病死亡造成的损失。

正常血液成分发生变化能够说明环境改变影响了保育猪的生理状态，这种关系的确定可以帮助生产人员对猪群采取更好的管理措施，从而提升猪群的健康状况。本研究作为保育猪安乐死研究的一部分，主要目的是评估血液成分分析能否作为确定保育猪对疾病易感性的指标。

1　材料与方法

研究中所有的动物使用、处理和样品采集技术均按照堪萨斯州立大学动物关怀与使用委员会推荐的方法进行。

试验中使用了58头平均体重为（5.6±1.3）kg的断奶仔猪，这些猪的断奶日龄在21～28天之间。断奶时随机从3个保育舍的14栏中挑选后，将其饲养于环境可控的保育栏内。每个保育栏的尺寸为2.74 m×3.05 m，单栏饲养量为27～29头，栏内安装有一个自动饮水器和一个双面式喂料器。日粮以玉米、高粱和大豆粉为基础配制。试验第一天采集所有猪的血液样品，之后兽医将猪分为两类：健康或异常，其中异常猪不是指猪有外伤或脓肿，而是有明显可见的发病症状，这些症状包括但不局限于咳嗽、明显体弱、腹部鼓胀、明显脱水或营养不良、嗜睡和消瘦等；健康猪则不能出现上述这些症状。采集血液前饲料正常饲喂。

2　血液采集与分析

研究中用到的仔猪，由于一些猪的具体出生日期不详，在试验的第一天时，其日龄大约为21～28日龄。采血时，在连续3天的采集中，每头猪由兽医随机选择，其中第一天20头、第二天22头、第三天16头，采完血后的猪单独观察24～32小时。每头猪约采集15 mL血液，其中9 mL放入含K2EDTA的抗凝管内，用于分析一些应激相关激素；6 mL放入肝素抗凝管内，用于分析血象和离子浓度。样品采集完后，将猪称重、打耳标。

肝素抗凝管内的血液在离心前，取出一小部分用于测定乳酸、葡萄糖的含量，钙、钾、钠的离子浓度和血红蛋白的浓度，红细胞压积、pH值、氧及二氧化碳的分压。

在乳酸和iSTAT测定完成后，将样品在室温条件下1 000 g(离心力单位)、离心15分钟，离心得到的血浆转移到聚丙烯管内，冷冻保存至测定皮质醇和儿茶酚胺含量。

血浆中皮质醇含量的测定采用Coat-A-Count试剂盒、配合Packard Cobra Gamma计数器进行。该方法的回收率为100.14%、重复性为90.45%。

血浆中的肾上腺素和去甲肾上腺素用活化后的氧化铝和0.1 M的次氯酸分离，并根据Holladay和Edens介绍用HPLC法进行重复测定。该方法采用添加标准添加回收法时，其回收率为83%～87%、样品内重复间的变异系数（CVs）≤5%。如果测定中样品的重复性＞5%，则应进行重新测定，直至变异系数达到可接受程度。

3　试验猪的安乐死与剖检

试验结束后，猪只采用逐渐增加的低氧麻醉（约每秒钟36.9 m）或二氧化碳气体进行安乐死处理。猪只死亡后，将其分为3种类型：死亡前存在病变（病变与安乐死无关）、有明显的肺部病变（病变与安乐死有关，局限于肺部但不包含肺部的发绀）、没有明显病变。基于本文的需要，我们在此讨论死亡前存在病变的猪只与其健康状态之间的关系。

4　统计分析

试验得到的数据采用多线性模型和卡方方法分析。

5　结果

各组血液指标的结果见表1。健康保育猪的葡萄糖和钠离子浓度高于不健康猪；不健康猪的血红蛋白浓度和血细胞压积高于健康猪；其他检测指标如肾上腺素、去甲肾上腺素、皮质醇、钾离子、乳酸、pH值或氧分压等方面，二者无显著性差异；健康猪的钙离子浓度和二氧化碳分压呈好于不健康猪的趋势。

安乐死后，一头健康猪和两头不健康猪的肉眼可见肺部病变确认是与健康状况有关，而与安乐死无关。这种肺部的病变对任何年龄段、任何健康状况的猪来说，都较为少见。健康猪和不健康猪群中出现的肺部病变数量无显著性差异。

表1　不健康组保育猪（32头)和健康组保育猪（26头)的血液指标结果

6　讨论

本研究中测定的血液指标包含了与应激、代谢或营养状况相关的指标以及血液成分指标。这些指标发生变化，意味着机体正常生理状态被打破，因此通过对这些指标的监测，有助于早期发现疾病或处于亚临床状态的猪只。

从本次研究的结果来看，不健康保育猪主要呈脱水或营养不良状态。不过，结果并未说明出现这一状况的原因。Anderson等人发现断奶后5天小型猪的正常红细胞压积为29.8%～32.8%。本研究中，不健康保育猪的平均红细胞压积显著高于健康猪，这一数值的异常升高会影响心脏功能，可能是造成脱水或厌食的原因。例如，Xin等人禁锢22～26日龄的仔猪72小时，发现在试验开始时红细胞压积升高，并在整个禁锢期内持续升高（33.5%～40.1%）。与之相比，本研究中的仔猪大约为28日龄，且未受到禁锢，但归类入不健康群的仔猪，其平均红细胞压积为35%，这一数值接近Xin等人试验中的下限，所以该群中的仔猪确实呈不健康状态。

据报道，21～28日龄仔猪的正常血红蛋白水平为9.2～10.5 g/dL。本研究中，健康仔猪的这一指标位于正常范围之内；而不健康仔猪的这一指标偏高，分析原因可能是由于脱水或营养不良所致。

我们的试验显示，不健康仔猪的葡萄糖浓度低于健康仔猪，这也可能是仔猪出现厌食、脱水或二者都有的反应指标。仔猪正常的血液葡萄糖浓度为65～95mg/dL。本研究中不健康仔猪的葡萄糖浓度在这一参考范围内，但与健康仔猪相比偏低。这一结果与Gentz等人的结果一致，Gentz等将产房仔猪禁锢120小时，发现初生、1日龄、3日龄、9日龄和16日龄仔猪的血糖浓度呈持续降低趋势。

3周龄仔猪的正常血清钠离子含量为（144.9±2）mmol/L。本研究中，两组仔猪的该指标水平均低于正常水平。Accensi等给3组断奶仔猪（大约42日龄）分别饲喂呕吐毒素（DON）含量为280、560和840 μg/kg的日粮，结果显示，与对照组相比，三组仔猪血液中的钠含量均无显著差别。这一结果提示我们，尽管猪只采食量会下降，但血液中的钠离子水平不一定会降低。本研究中不健康猪的其他血液指标提示我们这些猪可能出现了脱水或营养不良等。结合Accensi等人试验中的其他结果，我们认为造成这些仔猪血钠水平偏低的原因可能与其他因素有关。

14～35日龄仔猪正常的血清钙离子浓度为10.9～11.5 mg/L。我们的研究显示健康猪的钙离子浓度要高于不健康猪，不过这两组猪的钙离子浓度都要低于上述参考值。

猪的正常二氧化碳分压为（40±3）mmHg。本研究结果显示，健康猪的该指标水平高于不健康猪，但后者的水平仍处于参考范围内。生产中，二氧化碳分压可以作为应激的指示剂，其与新生仔猪的肾上腺素水平呈正相关。因此，研究中的不健康仔猪可能处于轻微应激状态。

研究中的两组试验猪没有一组的肾上腺素或去甲肾上腺素显著升高。其他血液指标如钠、葡萄糖含量和红细胞压积等的显著变化，提示我们这些仔猪可能发生了衰弱、呼吸困难、脱水或厌食。不过，能够引起这些症状的刺激因素不一定能够使相关血液指标升高。

仔猪的肺部病变以及其他一些原因导致不健康仔猪逐渐消瘦。

根据本研究结果，仔猪的健康状况可以在一定时间内通过对血液成分的分析来确定，从而及时发现尚未表现出外观疾病症状的不健康猪，进而生产人员能够提前采取预防措施或对该类猪只早期淘汰。

7　结论

对血液葡萄糖、钠、血红蛋白含量和红细胞压积的测定有助于对保育猪消耗性疾病进行早期检测或研究。

血液指标的测定结果提示我们，猪群中的不健康猪可能发生了厌食和衰弱情况。

译自：Buzzard BL, Edwards-Callaway LN, Engle TE, et al. Evaluation of blood parameters as an early assessment of health status in nursery pigs[J]. J Swine Health Prod. 2013; 21(3):148-151.

农业部发布《关于促进畜禽屠宰行业健康发展的指导意见（征求意见稿)》

【本刊讯】为促进畜禽屠宰行业健康发展，农业部日前发布《关于促进畜禽屠宰行业健康发展的指导意见（征求意见稿）》。提出促进畜禽屠宰行业发展是保障肉品质量安全的必然要求，是适应居民食品消费结构升级的战略需要，是转变农业发展方式的客观选择。将在调整产业结构、提高产业集中度，转变发展方式、提升产业竞争能力，提升监管能力、规范产业发展秩序，加强统筹协调、优化产业发展环境等方面开展工作。以实现四个主要目标。一是产业结构更加合理。到2020年，生猪屠宰规模化程度达到40%以上，规模化生猪屠宰企业屠宰量占全国屠宰总量的80%以上。牛、羊、鸡集中屠宰稳步推进。屠宰产能进一步向畜禽养殖主产区转移，养殖、屠宰、加工各环节主体间利益联结更为紧密。二是发展质量明显提升。到2020年，生猪代宰率下降到60%以下，肉品质量安全抽检合格率达到98%以上，屠宰环节病死畜禽无害化处理率达到100%，屠宰病死畜禽、私屠滥宰、注水等违法行为得到有效遏制，肉品质量安全保障水平显著提高。三是科技进步不断加快。到2020年，规模化屠宰企业全面建立ISO9000质量安全管理体系，规模化屠宰企业兽医卫生实验室检验能力显著提高，大型屠宰企业关键设备和技术达到国际先进水平。四是监管能力显著增强。构建权责一致、分工明确的畜禽产品质量安全监管责任体系。畜禽屠宰监管体系、监管制度、监管机制进一步健全，动物卫生监督机构和官方兽医监管能力进一步提升。

农业部废止81个兽药生物制品并停用洛美沙星等4种兽药

【本刊讯】为加强兽用生物制品标准管理工作，确保产品安全、有效、质量可控，农业部组织开展了兽用生物制品标准清理工作。经研究，对不符合当前国家动物防疫政策、存在较大生物安全隐患、已被新产品取代且至少5年无企业生产，以及检验项目不全、不能保证产品质量的口蹄疫O、A型活疫苗（依据2000年版《中华人民共和国兽用生物制品规程》标准）等81个兽用生物制品标准予以废止。要求自2016年1月1日起，停止生产上述81个兽用生物制品，涉及相关企业的兽药产品批准文号同时撤销；2015年12月31日前生产的产品，可以在2016年12月31日前流通使用；自2017年1月1日起，停止经营、使用上述81个兽用生物制品。

另外，为保障动物产品质量安全和公共卫生安全，农业部组织开展了部分兽药的安全性评价工作。认为洛美沙星、培氟沙星、氧氟沙星、诺氟沙星4种原料药的各种盐、酯及其各种制剂可能对养殖业、人体健康造成危害或者存在潜在风险。根据《兽药管理条例》第六十九条规定，农业部决定在食品动物中停止使用洛美沙星、培氟沙星、氧氟沙星、诺氟沙星4种兽药，撤销相关兽药产品批准文号。要求自2015年12月31日起，停止生产用于食品动物的洛美沙星等4种原料药的各种盐、酯及其各种制剂，涉及的相关企业的兽药产品批准文号同时撤销；2015年12月31日前生产的产品，可以在2016年12月31日前流通使用；自2016年12月31日起，停止经营、使用用于食品动物的洛美沙星等4种兽药。

2015年11月起暂停征收动物及动物产品检疫费

【本刊辑】据中新网2015年10月10日报道，财政部、国家发改委日前发布通知称，自2015年11月1日起，在全国统一取消和暂停征收37项行政事业性收费。其中，在农业部门方面，将暂停征收动物及动物产品检疫费。

通知要求，取消和暂停征收收费后，有关部门及所属事业单位依法履行管理职能所需经费，由同级财政预算予以统筹安排，保障工作正常开展。有关部门和单位要到财政部门办理财政票据缴销手续。有关收费的清欠收入，应当按照财政部门规定的渠道全额上缴国库。通知还要求，各省（区、市）财政、价格部门要抓紧对省级设立的行政事业性收费项目进行全面清理。取消属于政府提供普遍公共服务或体现一般性管理职能，以及主要目的是养人、违背市场经济基本原则的不合理收费项目。坚决取缔各种乱收费。

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新修订的《食品安全法》的施行，因为体现了最严谨的标准、最严格的监管、最严厉的处罚和最严肃的问责，该法被人们称为“史上最严”，社会各界也对它充满期待。

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据了解，自1989年以来，河南省已经连续27年成功举办河南畜牧业交易会。目前，河南畜牧业交易会已成为行业交流合作、招商引资、产品交易、学术研讨的重要平台，全国畜牧行业最大的A级交易会。

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新希望投资12.71亿在美国成立投资公司

【本刊辑】据新华视点报道，新希望在2015年10 月9日晚间发布公告称，为加快公司海外发展战略的实施与落地，促进公司海外业务长期持续发展，现拟由公司全额出资，在美国设立“新希望六和投资（美国）有限公司”（投资公司信息以最终注册完成为准），项目投资总额12.71亿元人民币（投资公司注册资金2亿美金，人民币投资额度以投资款到账当日中国人民银行公布的美元对人民币汇率计算为准）。

供港生鲜产品将投放内地市场60万居民率先享用

【本刊辑】据国际在线报道，日前从2016年度供港生鲜招标发布会上获悉，在足额保障香港市场的前提下，2016年将有200亿元供港生鲜产品投放国内市场，包括北上广深及长三角、珠三角的60万居民将首先开始享用。产品覆盖肉禽蛋奶、瓜果蔬菜、米面油及调味品等。

据悉，长期以来，内外销双重标准问题一直困扰着内地消费者，以至于出现国内消费者到日本买大米、打酱油的风潮。为此，根据有关部门的统一部署，中国国际贸易协会国际品牌管理中心开始建设公共采购平台，并在国家认监委注册部及广东省检验检疫局的支持配合下，赴广东等地对出口企业开始了系统的调研工作，针对出口优质产品回归难的诸多问题，国际品牌管理中心以供港生鲜为突破点，通过“一个识别符号加双复制”的供港交易平台模式，得到了各方的积极回应。在国内首次推出以消费者权利为导向的采购标准，全面与国际标准接轨。

大北农拟开展玉米、豆粕、大豆等套期保值

【本刊辑】据全景网2015年9月14日报道，为规避原材料的价格大幅波动给公司经营带来的不利影响，大北农计划通过有资质的期货经纪公司在具有农产品期货交易产品的期货交易所进行套期保值业务操作，以有效管理价格大幅波动的风险。套期保值期货品种为大连商品期货交易所挂牌交易的玉米、豆粕、大豆、豆油等期货合约、郑州商品期货交易所挂牌交易的硬麦、菜粕等期货合约。

据悉，大北农主要业务是饲料的开发、生产和销售，玉米、豆粕、油脂、米糠、棉粕、菜粕、面粉作为主要的饲料原料，在饲料原料中占比在40%（以上饲料原料加上玉米后占比达80%以上，不加玉米为40%）左右。大北农方面表示，预计全年套保数量不超过30万吨，公司拟套期保值的原料合约最高数量约占当年度对应原料预计耗用量的20%。所需保证金总额合计不得超过人民币2 000万元（分子公司使用帐户不超过5个，合计金额不得超过2 000万元），所建立的期货套期保值头寸以公司现货用量和库存量为基础，业务时间从股东大会审议通过之日起开始。

牧原推6.8亿元员工持股计划

【本刊辑】据中国经营报2015年9月28报道，日前，牧原食品股份有限公司发布公告，拟推公司第一期员工持股计划（草案）。此次非公开发行A股股票的发行价格由60.91元/股调整为30.42元/股，发行数量自不超过1 642万股调整为不超过3 288股。其中公司董事长秦英林认购不少于986.19万股、董事钱瑛认购不少于32.87万股，公司员工持股计划认购不超过2 301.12万股。

公告称，草案经过修订，现持股计划参与人数合计不超过500人。参与此次员工持股计划的公司董事、监事和高级管理人员合计5人，分别为：曹治年、褚柯、鲁香莉、王华同、秦军，5人合计认购12 000万元。除公司董事、监事和高级管理人员外，其他参加员工持股计划的公司及全资子公司员工合计不超过495人，合计认购不超过56 000万元。

大华农将被温氏集团吸收合并19日起不再交易

【本刊辑】据中证网报道，2015年10月9日晚间，大华农发布公告，广东温氏食品集团股份有限公司（以下简称“温氏集团”）将发行股份吸收合并大华农。大华农股票停牌后将直接进入终止上市程序，原大华农股东持有的大华农股份将按照换股比例转换为温氏集团股份。

大华农股票（股票代码：300186）将自2015年10 月19日起开始连续停牌，不再交易，直至实施换股后，转换成温氏集团股票在深圳证券交易所创业板上市流通。温氏集团本次发行价格为16.15元/股。大华农的换股价格为8.33元/股为基础，并在此基础上给予60%的换股溢价率确定，结合大华农2014年度分红派息事项，大华农本次换股价格为13.03元/股。由此可以确定本次换股吸收合并的换股比例为0.8070，即换股股东所持有的每1股大华农A股股票可以换得0.8070股温氏集团本次发行的A股股票。

中国农科院北京畜牧兽医研究医所培育出国际首例高瘦肉率梅山猪新种群

【本刊讯】近日，从中国农业科学院北京畜牧兽医研究所猪基因工程与种质创新团队获悉，该团队历时5年通过基因编辑技术成功制备并培育出具有“双肌”表型的肌抑素（Myostatin）纯合子突变梅山猪新种群，该种群与野生梅山猪相比瘦肉率提高近12%。研究成果于9月24日在线发表在国际刊物《科学报告（Scientific Reports）》杂志上,是国际上首篇有关肌抑素突变猪的研究性报道。

研究首先利用锌指核酸酶技术（ZFNs）对梅山猪胎儿成纤维细胞自身肌抑素基因进行定点编辑，然后通过体细胞核移植技术获得了两种肌抑素突变梅山猪。该猪健康状况良好，目前已繁育到第三代，经屠宰试验测定，与野生梅山猪相比，纯合子突变梅山猪瘦肉率提高11.62%，杂合子突变梅山猪瘦肉提高3.54%。如此之高的瘦肉率提升是传统育种无法企及的。

研究不仅充分利用了现代生物技术的巨大优势，而且还对其产品的安全性给予了高度重视。该研究成果有望在不久的将来被应用于农业及医药领域,并将推动现代生物技术的广泛应用。

我国疫苗首次获得国外临床许可

【本刊辑】据中国证券网2015年10月12日报道，塞拉利昂当地时间10日上午，由军事医学科学院生物工程研究所陈薇研究员带领团队自主研制的重组埃博拉疫苗，在相继获得塞拉利昂伦理与科学评价委员会伦理许可、药学理事会临床许可后，正式启动了在塞拉利昂的II期临床试验。

据悉，重组埃博拉疫苗项目相继获得国家863计划、国家杰出青年科学基金、国家重大专项、科技部科技改革与发展专项支持。该疫苗有三大特点：一是针对性强，是目前全球唯一进入临床的2014基因型疫苗；二是稳定性好，全球首创冻干粉针剂型，37℃环境下可稳定存储2周以上，适合疫苗冷链条件难以保障的西非地区广泛使用；三是安全性好，临床结果表明其具有很好的安全性和免疫原性。前期，在泰州医药城和浙江大学完成了该疫苗在中国人群和在华非洲人群的I期临床试验，证明了疫苗的安全性和有效性，相关工作为在非洲开展临床试验奠定了基础。

国内首条动物核酸疫苗生产线在华派生物通过GMP验收

【本刊辑】据中国畜牧兽医报2015年9月20日报道，近日，农业部兽药GMP专家库专家组成的验收小组对四川精华集团华派生物制药公司核酸疫苗生产线进行了为期2天的兽药GMP验收。此次GMP验收的通过，意味着我国第一条动物核酸疫苗生产线在华派生物诞生，华派生物也将正式成为国内首家拥有核酸疫苗生产线的企业。

陈化兰荣获“世界杰出女科学家成就奖”

【本刊讯】来自农业部新闻办公室消息，2015年10 月2日，联合国教科文组织公布了2016年生命科学领域的5位“世界杰出女科学家成就奖”获得者名单，中国农业科学院哈尔滨兽医研究所陈化兰研究员作为亚洲及太平洋地区的杰出代表获此殊荣。

由来自国际科学界的13名著名科学家组成的独立国际评委会，从超过2 600名杰出女科学家提名人选中遴选出5位2016年联合国教科文组织-欧莱雅“世界杰出女科学家成就奖”获得者。陈化兰因“在禽流感生物学领域的杰出研究，流感有效疫苗开发及应用方面的领先成果”而获选。

欧盟批准勃林格猪圆环疫苗用于妊娠期和哺乳期母猪

【本刊辑】据生物谷报道2015年9月9日报道，德国制药巨头勃林格殷格翰（BI）近日宣布，欧洲药品管理局（EMA）已批准该公司猪圆环病毒病（PCVD）疫苗产品Ingelvac CircoFLEX用于妊娠期和哺乳期母猪，预防由猪圆环病毒2型（PCV2）引发的相关疾病。Ingelvac CircoFLEX能够降低与PCV2相关的疾病死亡率、临床症状及病变。进一步的研究证实，母猪接种Ingelvac CircoFLEX能够对繁殖性能带来显著的积极影响，尤其表现在产仔率、仔猪存活数及每窝断奶数。

据悉，此次批准也使Ingelvac CircoFLEX成为欧洲首个可同时保护仔猪和母猪的PCV2疫苗，将为兽医和养殖户提供一种有效手段，针对这种致命病毒提供更广泛的保护。

中图分类号：S858.28

文献标识码：A

文章编号：1673-4645(2015)10-0076-03

收稿日期：2015-08-28