固肾定喘丸对老年COPD急性加重期患者血清和呼气冷凝液中SP-D、CCL18、CC16表达的影响

胡芬,熊吟

(1.武汉市东湖医院 内五科，湖北 武汉 430070；2.武汉市普爱医院 老年病科，湖北 武汉 430030)



固肾定喘丸对老年COPD急性加重期患者血清和呼气冷凝液中SP-D、CCL18、CC16表达的影响

胡芬1,熊吟2

(1.武汉市东湖医院 内五科，湖北 武汉 430070；2.武汉市普爱医院 老年病科，湖北 武汉 430030)

目的 探讨SP-D、CCL18、CC16在老年COPD急性加重期患者血清和呼气冷凝液中的表达及固肾定喘丸对上述指标的影响。方法 选择2010年1月～2013年12月武汉市东湖医院40例COPD急性加重期患者为研究对象，选择40例COPD缓解期患者为疾病对照组，选择健康人群40例为健康对照组。COPD急性加重期患者给予固肾定喘丸治疗。检测受试者血清和呼气冷凝液中SP-D、CCLl8、CCl6含量，同时检测COPD急性加重期患者治疗后上述指标水平，并对各指标与年龄、烟龄、肺功能、BMI的关系进行相关性分析。结果 急性期呼气冷凝液SP-D、CCL18含量明显高于缓解期和对照组(P<0.05)，且缓解期CCL18含量高于对照组(P<0.05)；急性期血清SP-D、CCL18、CC16含量明显高于缓解期和对照组(P<0.05)，且缓解期SP-D、CCL18、CC16含量高于对照组(P<0.05)；血清SP-D、CCL18水平明显高于呼气冷凝液(P<0.01)；治疗后，COPD急性期患者血清、呼气冷凝液中SP-D、CCL18及血清CC16水平明显较治疗前降低，差异有统计学意义(P<0.01)；呼气冷凝液、血清SP-D与烟龄呈正相关(P<0.05)，与FEV1%预计值、FEV1/FVC(%)呈负相关(P<0.05)；血清CC16与FEV1%预计值、FEV1/FVC(%)负相关(P<0.05)。结论 血清、呼气冷凝液中SP-D、CCL18及血清CC16等指标与COPD急性加重密切相关，监测上述指标可对COPD病情及预后进行监测与判断，固肾定喘丸具有降低COPD急性期患者SP-D、CCLl8、CC16等指标表达的功效。

慢性阻塞性肺疾病；肺表面活性蛋白D；肺部活化调节趋化因子；Clara细胞蛋白；固肾定喘丸

慢性阻塞性肺疾病(chronic obstructive pulmonary disease，COPD)为一种慢性进行性肺部疾病，以气流受限为主要特征，随着人口老龄化程度的加剧，其发病有上升趋势[1]。预计到2020年，COPD致死率将仅次于心脑血管疾病，给社会及家庭带来沉重负担[2]。研究显示，氧化应激、感染、炎症及生物标志物表达变化等多种因素与COPD的发病关系密切，在COPD进展过程中起重要作用[3-5]。肺表面活性蛋白D(surfactant protein D，SP-D)为胶原凝集素蛋白家族成员，肺部活化调节趋化因子(pulmonary and activation-regulated chemokine，CCLl8)、Clara细胞蛋白(clara cell protein，CCl6)主要在肺中表达，上述指标在肺部疾病中存在异常表达[6-7]。本研究通过检测COPD急性加重期患者血清、呼气冷凝液中SP-D、CCLl8、CCl6水平，旨在探讨SP-D、CCLl8、CCl6在COPD急性加重期患者血清、呼气冷凝液中的表达及固肾定喘丸对上述指标的影响，现报道如下。

1 资料与方法

1.1 一般资料 选择2010年1月～2013年12月武汉市东湖医院收治的40例COPD急性加重期患者为研究对象，患者年龄在59～85岁；选择COPD缓解期患者40例为疾病对照组。上述入组对象均符合相关疾病的诊断标准[1]。另选择同期在我院体检的健康人群40例为健康对照组。本研究已经武汉市东湖医院伦理委员会审批通过，并经患者知情签署知情同意书。

1.2 病例组纳入与排除标准

1.2.1 纳入标准[2]:无严重肝肾疾病；近期未接受激素治疗；依从性佳；患者知情同意。

1.2.2 排除标准[2]：伴有其他呼吸系统疾病者；合并免疫系统疾病者；职业暴露者；有精神疾病者；吸入有害气体者；未完成研究者。

1.3 治疗方法 给予COPD急性期患者服用舒氟美(广州迈特兴华，批号: 国药准字H44023791)0.2g，q12 h，同时联合使用固肾定喘丸(广州敬修堂药业股份有限公司，批号：国药准字H106428)，2 g/次，3次/天，上述药物治疗疗程均为3个月。

1.4 标本收集及指标检测 于清晨空腹状态下抽取受试者外周静脉血4 mL，3500 r/min离心10 min，上清液-80 ℃保存待测。采用德国Jaeger公司呼气冷凝液收集装置Ecoscreen收集呼气冷凝液。该装置由制冷器和呼气冷凝液收集管路构成，受试者呼气时，气体由进气口进入冷凝室，再由出气口排出，气体在冷凝室遇冷凝集成液体。采用ELISA法检测血清和呼气冷凝液中SP-D、CCLl8、CCl6等指标，试剂盒购自于上海华大基因科技公司，严格按照说明书进行操作。

1.5 统计指标 对血清和呼气冷凝液中SP-D、CCLl8、CCl6水平与年龄、烟龄、肺功能、BMI的关系进行相关性分析。

2 结果

2.1 一般资料比较结果 3组年龄、性别、吸烟状况、体质指数(body mass index，BMI)等数据比较，差异无统计学意义，有可比性；但3组在烟龄、FEV1%预计值、FEV1/FVC(%)方面差异有统计学意义(P<0.01)。见表1。

表1 3组基本资料比较Tab.1 Comparison of basic data in three groups ±s)

*P<0.05，与对照组相比，compared with control group

2.2 急性期、缓解期、对照组患者呼气冷凝液、血清中SP-D、CCL18及血清CC16水平 采用ELISA法检测所有受试者呼气冷凝液和血清中相关指标。检测CC16水平时发现，呼气冷凝液中CC16含量极微，几乎检测不到，故只对呼气冷凝液中SP-D、CCL18含量进行了检测。检测结果显示，急性期呼气冷凝液 SP-D、CCL18含量明显高于缓解期和对照组(P<0.05)，缓解期CCL18含量高于对照组(P<0.05)；急性期血清SP-D、CCL18、CC16含量明显高于缓解期和对照组(P<0.05)，且缓解期SP-D、CCL18、CC16含量高于对照组(P<0.05)。见表2。

表2 3组血清、呼气冷凝液中SP-D、CCL18及血清CC16水平比较Tabl.2 Comparison of SP-D, CCL18 in serum, breath condensate and serum CC16 in the three groups ±s)

*P<0.05，与对照组相比，compared with control group;*P<0.05，与缓解期相比，compared with remission

2.3 COPD急性期患者血清、呼气冷凝液中SP-D、CCL18水平 对COPD急性期患者血清、呼气冷凝液中SP-D、CCL18水平进行比较，结果显示，血清SP-D、CCL18水平明显高于呼气冷凝液(P<0.01)。见表3。

表3 COPD急性期患者血清、呼气冷凝液中SP-D、CCL18水平比较Tab.3 Comparison of SP-D, CCL18 in serum and breath condensate with acute ±s)

*P<0.05，与呼气冷凝液组相比，compared with breath condensate group

2.4 COPD急性期患者治疗前后血清、呼气冷凝液中SP-D、CCL18及血清CC16水平 对治疗前、治疗后COPD急性期患者血清、呼气冷凝液中SP-D、CCL18及血清CC16水平进行比较，结果显示，治疗后，COPD急性期患者血清、呼气冷凝液中SP-D、CCL18及血清CC16水平明显较治疗前降低，差异有统计学意义(P<0.01)。见表4。

表4 COPD急性期治疗前后血清、呼气冷凝液中SP-D、CCL18及血清CC16水平Tab.4 Comparison of SP-D, CCL18 in serum, breath condensate and serum CC16 level in COPD with acute before and after ±s)

*P<0.05，与治疗前比较，compared with before treatment

2.5 COPD急性期患者治疗前各指标与年龄、烟龄、肺功能、BMI的相关性 对COPD急性期患者治疗前呼气冷凝液SP-D、CCL18、血清SP-D、CCL18、CC16指标与年龄、烟龄、肺功能、BMI等因素进行相关性分析，结果显示，呼气冷凝液SP-D与烟龄呈正相关(P<0.05)，与FEV1%预计值、FEV1/FVC(%)呈负相关(P<0.05)；血清SP-D与烟龄呈正相关(P<0.05)，与FEV1%预计值、FEV1/FVC(%)呈负相关(P<0.05)；血清CC16与FEV1%预计值、FEV1/FVC(%)负相关(P<0.05)；其他指标与年龄、烟龄、肺功能、BMI等因素无明显相关性。见表5。

表5 各指标与年龄、烟龄、肺功能、BMI的相关性分析Tab.5 Correlation analysis between the indexes and age, smoking history, pulmonary function, BMI

3 讨论

COPD是一种慢性全身性疾病，发病原因复杂，与多种因素相关，如老龄、遗传、炎症等因素均可引起COPD[7]。COPD以气流受限为特征，同时伴有气道、肺组织等呼吸系统慢性炎症反应，因此C反应蛋白、白细胞介素等炎性介质可作为COPD诊断、治疗的参考指标，但上述指标在评判COPD严重程度方面效果欠佳[8-11]。新近的研究发现，SP-D、CCL18、CCL16等指标在COPD发病机制中起重要作用，与COPD的发病、进展及严重程度相关[12-16]。Kelly等[2]研究发现，与健康人群相比，COPD患者血清CCL18水平明显较高，且COPD急性加重期患者血清CCL18表达明显增强。本研究显示，COPD患者血清CCL18含量高于健康人群，且COPD急性加重期患者血清CCL18水平高于COPD缓解期患者，检测呼气冷凝液中CCL18含量亦有相似发现，与相关文献[3]基本一致。提示CCL18在不同严重程度COPD患者呼气冷凝液及血清中表达状况存在差异，因此可以作为COPD严重程度及预后评判的参考指标。

SP-D为肺源性的胶原凝素，近年来研究发现其在一些慢性疾病的发病及进展中起重要作用[11-15]。Liu等[11]研究发现，COPD患者血清中SP-D表达水平明显高于健康人群，且COPD在急性加重时SP-D表达水平可明显增强。Güzel等[12]报道，COPD患者血清SP-D比基线水平高出95%以上时，COPD急性加重的发病风险明显增加。本研究显示，COPD患者血清、呼气冷凝液中SP-D水平明显高于健康人群，且在COPD急性加重期，SP-D在血清、呼气冷凝液中的表达强度高于COPD缓解期。与相关文献[11-12]报道基本一致。提示血清、呼气冷凝液中SP-D可作为COPD急性加重风险的预测指标。COPD急性加重时血清、呼气冷凝液中SP-D表达增强主要与COPD急性加重期患者炎症反应加重、缺氧反应明显、肺泡毛细血管通透性增强等因素有关，上述因素可引起机体血清、呼气冷凝液中SP-D表达增强。

CC16可抑制炎症介质的表达，因此具有较强的抗炎作用，且可拮抗外源性蛋白的抗原性。MacNee等[5]研究发现，COPD患者血清CC16检测含量明显高于正常人群，且COPD病情恶化时机体血清CC16水平明显升高，即血清CC16含量与COPD病情严重程度密切相关。本研究显示，COPD患者血清、呼气冷凝液中CC16含量均明显高于健康人群，且在COPD急性加重时，血清、呼气冷凝液中CC16水平亦明显上升，与文献[5]报道基本一致。COPD急性加重期患者受炎症、氧化应激、感染等因素影响，机体肺泡-毛细血管通透性明显加强，进而导致CC16表达增强，并释放入血液及其他组织中，继而引起机体血清、呼气冷凝液中CC16水平明显升高。

本研究对呼气冷凝液SP-D、CCL18，血清SP-D、CCL18、CC16指标与年龄、烟龄、肺功能、BMI等因素进行相关性分析，结果显示，呼气冷凝液、血清中SP-D与烟龄呈正相关(P<0.05)，与肺功能呈负相关(P<0.05)；血清CC16与肺功能呈负相关(P<0.05)。吸烟是COPD病情恶化的危险因素，肺功能可反应COPD病情及预后情况，因此呼气冷凝液、血清中SP-D、血清CC16与肺功能的相关性结果表明，上述指标对监测COPD病情具有重要意义。

与呼气冷凝液比较，血清SP-D、CCLl8、CC16的表达受诸多因素干扰。肝脏、淋巴结等器官组织均可表达SP-D、CCLl8、CC16，因此SP-D、CCLl8、CC16检测结果受肺外器官SP-D、CCLl8、CC16的表达状况影响。而呼气冷凝液中SP-D、CCLl8、CC16随呼出气冷凝而成，检测特异性高，受影响的因素较少，能可靠地反映肺部SP-D、CCLl8、CC16含量的变化，结果更为准确、可靠。本研究中给予COPD急性加重期患者固肾定喘丸进行治疗，患者经治疗后，血清、呼气冷凝液中SP-D、CCL18及血清CC16水平较治疗前显著降低，表明固肾定喘丸具有抑制COPD急性期患者SP-D、CCLl8、CC16等指标表达的功效，固肾定喘丸一定程度上可以通过降低患者血清、呼气冷凝液中SP-D、CCLl8、CC16的水平进而改善临床症状。

综上所述，血清、呼气冷凝液中SP-D、CCL18及血清CC16等指标与COPD急性加重密切相关，监测上述指标可对COPD病情及预后进行监测与判断，固肾定喘丸具有降低COPD急性期患者SP-D、CCLl8、CC16等指标表达的功效。

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(编校：王冬梅)

Effect of Gushen Dingchuan pill on SP-D, CCL18, CC16 in serum and in exhaled breath condensate in the elderly with acute exacerbation of COPD

HU Fen1,XIONG Yin2

(1.The Fifth Department of Internal Medicine, East Lake Hospital of Wuhan City, Wuhan 430070, China;2.Department of Geriatrics, PuAi Hospital of Wuhan City, Wuhan 430030, China)

ObjectiveTo study effect of Gushen Dingchuan pill on SP-D,CCL18,CC16 in serum and in exhaled breath condensate in the elderly with acute exacerbation of COPD.MethodsFrom January 2010 to December 2013,East Lake Hospital of Wuhan City,40 cases of COPD patients with acute aggravating period were selected as the research object,40 patients with COPD remission were selected as disease control, and 40 cases of healthy people were selected as the healthy controls.COPD patients with acute aggravating period were given Gushen Dingchuan pill treatment.patients’ serum and breath condensate,SP-D,CCLl8,CCl6 content were detected,and the index levels of COPD patients with acute aggravating period after treatment were also tested, and the relations between the various indexes and age, smoking, pulmonary function,BMI correlation analysis were made.ResultsAcute group’ exhaled breath condensate,SP-D and CCL18 content were significantly higher than that of stable group and the control group (P<0.05),and the stable groups’ CCL18 levels were higher than that in control group (P<0.05).Acute group’s serum SP-D,CCL18,CC16 content was significantly higher than that of stable group and the control group (P<0.05),and the stable group’s SP-D,CCL18,CC16 levels were higher than that in control group (P<0.05).Serum SP-D,CCL18 levels were significantly higher than those in exhaled breath condensate(P<0.01).After treatment, COPD patients with acute phase SP-D,CCL18 in serum and breath condensate and serum CC16 levels were reduced, and the difference was statistically significant (P<0.01); Exhaled breath condensate and serum SP-D positively associated with smoking age(P<0.05),and showed a negative correlation with FEV1% the expected value,FEV1/FVC (%)(P<0.05); the serum levels of SP-D positively associated with tobacco (P<0.05),and showed a negative correlation with FEV1% the expected value,FEV1/FVC(%)(P<0.05); serum CC16 showed a negative correlation with FEV1% predicted value,FEV1/FVC(%)(P<0.05). ConclusionSP-D,CCL18 in serum, breath condensate, and serum CC16 are closely related with COPD exacerbations, and monitoring the indicators for COPD disease and prognosis monitoring and judgment, and Gushen Dingchuan pill can decrease SP-D,CCL18 in serum, breath condensate, and serum CC16 in COPD patients with acute period.

chronic obstructive pulmonary disease; surfactant protein D; pulmonary activation regulated chemokine; Clara cell protein; Gushen Dingchuan pill

胡芬，女，本科，主治医师，研究方向：老年病内科，E-mail：hf11413@163.com。

R563.9

A

1005-1678(2015)02-0133-04