艾迪莎联合益生菌胶囊对溃疡性结肠炎模型大鼠的治疗及炎性细胞因子表达影响①

颜 玉，任秀英，鲍秀琦，姜 威，罗 兰，郑 强，王 雪，薛 勇

(1.佳木斯大学附属第一医院消化一科，黑龙江 佳木斯 154003；2.佳木斯大学生命科学学院，黑龙江 佳木斯 154007)

艾迪莎联合益生菌胶囊对溃疡性结肠炎模型大鼠的治疗及炎性细胞因子表达影响①

颜 玉1，任秀英1，鲍秀琦1，姜 威1，罗 兰1，郑 强1，王 雪1，薛 勇2

(1.佳木斯大学附属第一医院消化一科，黑龙江 佳木斯 154003；2.佳木斯大学生命科学学院，黑龙江 佳木斯 154007)

目的：观察艾迪莎联合益生菌胶囊对溃疡性结肠炎大鼠肠组织中白细胞介素-8(IL-8)与肿瘤坏死因子-α(TNF-α)的表达情况及结肠粘膜病理学检查比较。方法：清洁级健康Wistar大鼠60只随机分为Ⅰ(对照组)、Ⅱ(模型组)、Ⅲ(艾迪莎组)、Ⅳ(益生菌胶囊组)、Ⅴ(艾迪莎联合益生菌胶囊组)，每组12只。将60只清洁级健康Wistar大鼠在48h内禁食不禁水，然后将其麻醉，麻醉药用乙醚，其中将Ⅰ(对照组)组大鼠用2mL生理盐水进行灌肠，其余各组用5%乙酸1.0mL灌肠制备溃疡性结肠炎的模型。应用双抗体一步夹心法酶联免疫吸附法和双抗夹心酶联免疫吸附法观察各组大鼠肠组织中IL-8和TNF-α的表达情况。结果：①大鼠各个治疗组IL-8、TNF-α表达均低于模型组，差异性显著(P<0.05)。②联合用药组与艾迪莎组和益生菌胶囊组相比差异性显著(P<0.05)，与对照组相比差异性不显著(P>0.05)，表明联合用药治疗效果好于单独用药。③益生菌胶囊组与艾迪莎组相比IL-8和TNF-α表达差异性不显(P>0.05)，表明治疗效果相当。结论：说明益生菌胶囊和艾迪莎均有抑制IL-8和TNF-α活性抗炎治疗作用, 联合用药有更佳效果。

艾迪莎；益生菌胶囊；溃疡性结肠炎；细胞因子

溃疡性结肠炎(Ulcerativecolitis，UC)是炎症性肠病(Inflammatoryboweldisease，IBD)中的一种，溃疡性结肠炎在结肠黏膜与黏膜下层发病，乙状结肠及直肠多病变，还可以延至降结肠甚至全结肠，溃疡性结肠炎病程非常漫长且反复发作[1]。目前溃疡性结肠炎病因不明，认为主要是遗传与环境及细菌协同作用，而肠道细菌是引起溃疡性结肠炎发病主要原因[2]。本研究通过观察艾迪莎联合益生菌胶囊对溃疡性结肠炎模型大鼠治疗和白细胞介素-8(IL-8)与肿瘤坏死因子-α(TNF-α)变化，探讨艾迪莎联合益生菌胶囊治疗溃疡性结肠炎模型大鼠效果和细胞因子变化。

1 材料与方法

1.1 试验动物模型的制备

选用清洁级健康Wistar大鼠60只，体重(200±20)g，雌雄各30只，由佳木斯大学动物实验中心提供,随机将60只大鼠分为5组，其中Ⅰ(对照组)、Ⅱ(模型组)、Ⅲ(艾迪莎组)、Ⅳ(益生菌胶囊组)、Ⅴ(艾迪莎联合益生菌胶囊组)，每组12只。试验Wistar大鼠全部48h禁食不禁水，然后用乙醚进行麻醉，Ⅰ组(对照组)大鼠用2mL生理盐水进行灌肠，其余4组实验组用5%乙酸1.0mL灌肠。Ⅰ(对照组)和Ⅱ(模型组)试验大鼠48h后用生理盐水2mL/d灌胃；Ⅲ(艾迪莎组)用艾迪莎溶液2.5mL灌胃1次/d浓度0.5g/kg体重；Ⅳ(益生菌胶囊组)用益生菌胶囊溶液2.5mL灌胃1次/d浓度12.5g/kg体重；Ⅴ(艾迪莎联合益生菌胶囊组)用相同浓度艾迪莎和益生菌胶囊溶液灌胃1次/d，正常喂养7d后禁食24h，将试验大鼠抽取血清后处死，剖开大鼠腹部选取结肠部分病变最严重部位作为标本，置入福尔马林溶液中固定待检。

1.2 白细胞介素-8(IL-8)和肿瘤坏死因子-α(TNF-α)检测

双抗体一步夹心法酶联免疫吸附法检测白细胞介素-8(IL-8)，样品收集：血清和红细胞分离→取血浆→取细胞上清液(去除颗粒和聚合物)→组织匀浆→保存，大鼠白细胞介素8(IL-8)ELISA检测试剂盒按说明书进行，实验中使用ELISA检测试剂盒购自上海逸峰生物科技有限公司。双抗夹心酶联免疫吸附法检测肿瘤坏死因子-α(TNF-α)，试剂盒定量检测大鼠血清或血浆中TNF-a浓度操作步骤严格按说明书进行，实验中使用大鼠TNF-aELISA试剂盒检测试剂盒购自上海富众生物科技发展有限公司。

1.3 统计学方法

2 结果

2.1 大鼠Ⅰ(对照组)、Ⅱ(模型组)、Ⅲ(艾迪莎组)、Ⅳ(益生菌胶囊组)、Ⅴ(艾迪莎联合益生菌胶囊组)五组一般状况

大鼠Ⅰ(对照组)、Ⅱ(模型组)、Ⅲ(艾迪莎组)、Ⅳ(益生菌胶囊组)、Ⅴ(艾迪莎联合益生菌胶囊组)五组一般状况，见表1。

2.2 白细胞介素-8(IL-8)与肿瘤坏死因子-α(TNF-α)水平变化

大鼠Ⅰ(对照组)、Ⅱ(模型组)、Ⅲ(艾迪莎组)、Ⅳ(益生菌胶囊组)、Ⅴ(艾迪莎联合益生菌胶囊组)五组大鼠白细胞介素-8(IL-8)与肿瘤坏死因子-α(TNF-α)水平变化，见表2。

表1 五组大鼠一般状况比较

表2 五组大鼠IL-8及TNF-α的变化

注：与正常组比较△P<0.05；与模型组比较☆P<0.05。

①3个治疗组IL-8、TNF-α表达均低于模型组，差异性显著(P<0.05)，说明艾迪莎、益生菌胶囊及联合用药IL-8和TNF-α表达均有效降低。②联合用药组与艾迪莎组和益生菌胶囊组相比差异性显著(P<0.05)，与对照组相比差异性不显著(P>0.05)，表明联合用药治疗效果好于单独用药。③益生菌胶囊组与艾迪莎组相比IL-8和TNF-α表达差异性不显著(P>0.05)，表明治疗效果相当。

3 讨论

溃疡性结肠炎(Ulcerativecolitis，UC) 发病机制主要由免疫反应介导引起是目前普遍认可的原因，认为主要是遗传与环境及细菌协同作用，而肠道细菌是引起溃疡性结肠炎发病主要原因。溃疡性结肠炎(Ulcerativecolitis，UC)中细胞因子白细胞介素-8(IL-8)与肿瘤坏死因子-α(TNF-α)的功能主要表现在对中性粒细胞有细胞趋化作用与很强的促血管生成作用而实现其对炎症反应的调节。此次实验研究发现患了溃疡性结肠炎的试验大鼠体内的IL-8及TNF-α表达显著增加，与对照组相比较具有显著性差异(P<0.05)，这就表明IL-8可以引起肠道炎症，多年来在溃疡性结肠炎研究过程中，研究人员已经注意到肠道菌群在发病中的重要作用。因此肠道黏膜的共生菌群的改变也将备受广大医务人员的重视，甚至有一些学者大胆地提出临床用药可以用益生菌及其产物来治疗溃疡性结肠炎。 本实验结果论证了试验大鼠应用益生菌胶囊后，大鼠的一般状况发生了明显的改变，试验大鼠的肠黏膜发生的炎症水肿与充血及溃疡得到了显著的减轻，大鼠体内的IL-8及血清中TNF-α表达减少明显，与对照组大鼠比较具有性显著差异(P<0.05)，经艾迪莎联合益生菌胶囊用药治疗后，试验大鼠腹泻症状改善明显，肠黏膜病理损害减轻明显，肠黏膜IL-8及血清中TNF-α表达减少明显，与对照组相比差异性不显著，说明益生菌胶囊和艾迪莎对溃疡性结肠炎治疗均有效，联合用药有更佳效果。

[1]姜威，颜玉，郑强，等. 溃疡性结肠炎Toll样受体表达和NF-κB变化及益生菌的作用研究[J]. 黑龙江医药科学，2013，36(5)：34-35

[2]颜玉，郑强，姜威，等.溃疡性结肠炎大鼠NF-B及TNF-α的变化及益生菌的作用研究[J]. 黑龙江医药科学，2012，35(6)：5-6

[3]刘卓勋，颜玉，薛宇，等.贝飞达联合美沙拉嗪对溃疡性结肠炎大鼠IL-10表达的影响[J]. 黑龙江医药科学，2012，35(1)：38-39

[4]薛宇，颜玉. 益生菌对大鼠溃疡性结肠炎作用的实验研究[J]. 黑龙江医药科学，2011，34(5)：7-8

[6]姜威，颜玉. 生长抑素对重症胰腺炎的疗效及TNF-α的影响[J]. 中国现代医生，2011，49(8)：34-36

[7]罗南，颜玉. 美沙拉嗪对大鼠溃疡性结肠炎NF-κB和TGF-β表达和影响[J]. 黑龙江医药科学，2010，33(4)：11-12

[8]姜威，任秀英，颜玉，等. 溃疡性结肠炎的药物灌肠的临床疗效观察 [J]. 黑龙江医药科学，2005，28(3)：113-113

佳木斯大学科学技术重点课题，编号：Sjz2012-15。

颜玉(1963～)女，黑龙江佳木斯人，硕士，主任医师，教授，硕士研究生导师。

薛勇(1962～)男，黑龙江佳木斯人，学士，教授，硕士研究生导师。E-mail:hljxueyong@163.com。

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1008-0104(2015)02-0056-02

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