趋化因子Fractalkine及其受体CX3CR1预测重型急性胰腺炎的价值研究

孟锐，黄李雅，刘雅琦，吴阳

·论著·

趋化因子Fractalkine及其受体CX3CR1预测重型急性胰腺炎的价值研究

孟锐，黄李雅，刘雅琦，吴阳

目的检测重型急性胰腺炎(SAP)患者血浆中趋化因子Fractalkine(FKN)及其受体CX3CR1的表达水平，判断其能否作为SAP的预测指标。方法选取2012年12月—2014年9月宁夏医科大学总医院收治的因急性上腹痛起病，症状出现在3 d以内，依据2013年《中国急性胰腺炎诊治指南》诊断为急性胰腺炎的患者65例为研究对象，其中轻型急性胰腺炎(MAP)20例(30．8%)，中型急性胰腺炎(MSAP)25例(38．4%)，SAP 20例(30．8%)，应用酶联免疫吸附试验(ELISA)法检测患者血浆中FKN及其受体CX3CR1表达水平。比较不同病情程度急性胰腺炎患者FKN及其受体CX3CR1表达水平，绘制受试者工作特征曲线(ROC曲线)，计算ROC曲线下面积(AUC)，判定预测SAP的最佳截点及其灵敏度、特异度、正确率。结果不同病情程度急性胰腺炎患者FKN及其受体CX3CR1表达水平比较，差异均有统计学意义(P＜0．05);其中SAP患者FKN及其受体CX3CR1表达水平高于MAP、MSAP患者(P＜0．05)。FKN及其受体CX3CR1预测SAP的AUC分别为0．865、0．897，最佳截点分别为2．08μg/L和38μg/L，灵敏度分别为86．96%、90．91%，特异度分别为76．27%、88．24%，正确率分别为79．27%、89．04%。结论SAP患者FKN及其受体CX3CR1表达水平高于MAP、MSAP患者，FKN及其受体CX3CR1可作为预测急性胰腺炎严重程度的有效指标之一，值得进一步深入研究。

胰腺炎;Fractalkine;受体，趋化因子;预测

孟锐，黄李雅，刘雅琦，等．趋化因子Fractalkine及其受体CX3CR1预测重型急性胰腺炎的价值研究［J］．中国全科医学，2015，18(36):4433－4436．［www．chinagp．net］

Meng R，Huang LY，Liu YQ，et al．Value of chemokine Fractlkine and its receptor CX3CR1 in the prediction of severe acute pancreatitis［J］．Chinese General Practice，2015，18(36):4433－4436．

急性胰腺炎是多种原因导致胰酶在胰腺内激活，以胰腺、胰周的炎症为主要特征，伴有或不伴有其他器官功能的改变［1－2］。约20%的急性胰腺炎患者会进展为重型急性胰腺炎(severe acute pancreatitis，SAP)，继发严重的局部并发症如胰腺坏死、胰腺脓肿和全身并发症，最终导致患者死亡［3－4］。目前多种评分系统、血清学指标及放射学方法用于对SAP的预测。各种评分系统需要较多临床指标，评价繁琐，预测能力各有不同。血清学指标，如最常使用的C反应蛋白(CRP)，虽然在胰腺坏死、SAP的预测上体现了一定的诊断价值，但对采集的时间过分依赖，影像学指标虽然可以确定有无局部并发症，但却无法预测器官功能衰竭［5］。因此，寻找有效、简单的早期预测SAP及其严重并发症的指标，对降低SAP的病死率、改善预后具有重大意义。研究已经证实，趋化因子Fractalkine(FKN)及其受体CX3CR1参与炎症的发生、诱导和活化，导致组织损伤［6］。但FKN及其受体CX3CR1在SAP的研究，国内外均未见报道。本课题组前期在大鼠急性胰腺炎模型中发现FKN及其受体CX3CR1在大鼠血清、胰腺组织内均高表达，提示其与急性胰腺炎的发生、发展有关［7］。本研究的目的在于观察SAP患者FKN及其受体CX3CR1表达水平的改变，判断其是否能够作为预测SAP的有效指标。

1资料与方法

1．1临床资料选取2012年12月—2014年9月宁夏医科大学总医院收治的因急性上腹痛起病，症状出现在3 d以内，依据2013年《中国急性胰腺炎诊治指南》［8］诊断为急性胰腺炎的患者65例为研究对象，其中男39例，女26例;年龄26～76岁，平均年龄(49．5 ±15．6)岁;体质指数(BMI)(24．6±3．0)kg/m2;汉族52例，回族13例;病因:胆源性22例(33．8%)，高脂血症性5例(7．7%)，乙醇性2例(3．1%)，未知36例(55．4%);轻型急性胰腺炎(MAP)20例(30．8%)，中型急性胰腺炎(MSAP)25例(38．4%)，SAP 20例(30．8%)。排除逆行胰胆管造影术后、怀疑胰腺肿瘤或胆管炎症、由胰腺外的感染继发胰腺炎，有免疫缺陷的病史和资料不全的患者。

1．2诊断标准MAP:具备急性胰腺炎的临床表现和生物化学改变，不伴有器官功能衰竭及局部或全身并发症。MSAP:具备急性胰腺炎的临床表现和生物化学改变，伴有一过性的器官功能衰竭(48 h内可自行恢复)，或伴有局部或全身并发症而不存在持续性的器官功能衰竭(48 h内不能自行恢复)。SAP:具备急性胰腺炎的临床表现和生物化学改变，须伴有持续的器官功能衰竭(持续48 h以上、不能自行恢复呼吸系统、心血管或肾脏功能衰竭，可累及1个或多个器官)。

1．3研究方法

1．3．1血清样本的采集收集患者清晨空腹外周静脉血5 ml，采用离心机以3 000 r/min离心15 min(离心半径10 cm)，提取上清液800μl，分装于4个EP管中(每个EP管中200μl)，于－80℃冰箱中保存待测。

1．3．2 FKN及其受体CX3CR1表达水平检测酶联免疫吸附试验(ELISA)试剂盒均由上海悦晟生物科技有限公司提供，采用双抗体夹心ABC－ELISA法，使用酶标仪，在450 nm处检测吸光度(OD值)，通过绘制标准曲线求出样本中相应的浓度。严格按照仪器和试剂使用说明书进行操作。

1．4统计学方法采用SPSS18．0统计学软件进行数据处理，计量资料符合正态分布以(x±s)表示，多组间比较采用单因素方差分析，组间两两比较采用q检验;绘制受试者工作特征曲线(ROC曲线)，计算ROC曲线下面积(AUC)，选择最佳截点，计算其预测SAP的灵敏度、特异度、正确率。以P＜0．05为差异有统计学意义。

2结果

2．1不同病情程度急性胰腺炎患者FKN及其受体CX3CR1表达水平比较不同病情程度急性胰腺炎患者FKN及其受体CX3CR1表达水平比较，差异均有统计学意义(P＜0．05);其中SAP患者FKN及其受体CX3CR1表达水平高于MAP、MSAP患者，差异均有统计学意义(P＜0．05，见表1)。

表1不同病情程度急性胰腺炎患者FKN及其受体CX3CR1表达水平比较(±s，μg/L)Table 1 Comparison of the expression levels of serum FKN and its receptor CX3CR1 among SAP patients with different disease degrees

表1不同病情程度急性胰腺炎患者FKN及其受体CX3CR1表达水平比较(±s，μg/L)Table 1 Comparison of the expression levels of serum FKN and its receptor CX3CR1 among SAP patients with different disease degrees

注:MAP=轻型急性胰腺炎，MSAP=中型急性胰腺炎，SAP=重型急性胰腺炎，FKN=Fractalkine;与MAP患者比较，aP＜0．05;与MSAP患者比较，bP＜0．05

病情程度例数FKN CX3CR1 MAP 20 0．53±0．12 49±63 MSAP 25 2．31±0．26 34±17 SAP 20 6．88±1．11ab172±87abF 值＜0．001＜0．001 26．29 32．70 P值

2．2 FKN及其受体CX3CR1预测SAP的价值FKN及其受体CX3CR1预测SAP的AUC分别为0．865、0．897; FKN及其受体CX3CR1预测SAP的最佳截点分别为2．08μg/L和38μg/L;FKN及其受体CX3CR1预测SAP的灵敏度、特异度、正确率分别为86．96%、76．27%、79．27%，90．91%、88．24%、89．04%(见图1)。

图1 FKN及其受体CX3CR1预测SAP的ROC曲线Figure 1 ROC curves of FKN and CX3CR1 predicting SAP

3讨论

SAP是伴有脏器功能不全或衰竭、代谢功能紊乱或出现胰腺坏死、脓肿或假性囊肿等局部并发症的急性胰腺炎症，是病情凶险、并发症多、病死率较高的急腹症，占整个急性胰腺炎的20%左右［9］。虽然诊治技术逐渐提高，但病死率仍在20%左右。近年来国内外对急性胰腺炎进行了重新划分，将短暂的器官功能衰竭和/或局部并发症从以前的SAP中区分出来，成为MSAP［8］。基于近年来对急性胰腺炎病死率的回顾分析，Buter等［10］研究表明，胰腺坏死、胰腺感染与器官功能衰竭和病死率明显相关，可作为急性胰腺炎严重程度的两个决定因素。在临床上，各种评分系统、血清学标志物及影像学检测方法用于急性胰腺炎的评价。在评分系统中，急性生理学及慢性健康状况评分系统Ⅱ(APACHEⅡ评分)、Ranson评分、急性胰腺炎严重程度床旁指数(BISAP)评分较为常见。其中Ranson评分需要前后两次评价，需要在48 h内获得全部数据。APACHEⅡ评分需要统计14项指标，有研究表明，APACHEⅡ评分与ICU住院天数明显相关，预测SAP的特异度不高［11］。BISAP评分虽然评估简单，但其诊断能力的差异很大。血清中CRP水平升高也非特异的，其是由肝细胞合成，白介素1和白介素6介导产生，血清学指标升高具有明显差异，需要在症状出现72 h以后采集［12］。因此寻找有效的、简单的生物学标志物预测SAP及其严重并发症，可以明显改善预后，降低病死率。

急性胰腺炎的产生是由于各种原因导致的胰蛋白酶激活，继而激活炎性细胞释放炎性因子，级联下游炎性细胞的进一步释放，导致组织损伤，继发全身并发症，如全身炎性反应综合征(SIRS)、多器官功能障碍综合征(MODS)［13］。FKN属于趋化因子CX3C亚家族目前已知的唯一成员，既具有趋化因子的活性，又能发挥黏附因子的作用，这使得其在炎症的趋化、活化、发展中发挥着独特的生物学作用［14－15］。FKN是否参与SAP的发生与发展，国内外均未见报道。本课题组前期研究发现，SAP大鼠动物模型的血清和胰腺组织中，FKN均过度表达。同时，也在SAP胰腺外的损伤器官肺脏和肾脏组织中发现了FKN的过度表达［7］。

本研究结果显示，不同病情程度急性胰腺炎患者均有FKN及其受体CX3CR1表达，且SAP患者FKN及其受体CX3CR1表达水平高于MAP、MSAP患者，进一步通过ROC曲线进行评价，提示FKN及其受体CX3CR1均有良好的预测SAP的能力。本文的不足是未在相同的时刻进行采血，未进行连续的监测，需要后期进一步评估。

本研究结果初步提示，FKN及其受体CX3CR1与急性胰腺炎的发生、发展密切相关，但具体的机制还有待进一步研究。FKN及其受体CX3CR1可能成为预测SAP的有效指标之一，为临床早期诊断SAP提供有效可靠工具。

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(本文编辑:陈素芳)

·世界全科医学工作瞭望·

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·Elbow pain:a guide to assessment and management in primary care

肘部疼痛:初级医疗评估与管理指南

(详细内容见http://bjgp．org/content/65/640．toc)

(本刊编辑部整理)

Value of Chemokine Fractlkine and Its Receptor CX3CR1 in the Prediction of Severe Acute Pancreatitis

MENG Rui，HUANG Li－ya，LIU Ya－qi，et al．Ningxia Medical University，Yinchuan 750004，China

ObjectiveTo detectexpression levels of serum Fractalkine(FKN)and its receptor CX3CR1 of patients with severe acute pancreatitis(SAP)and evaluate whether they could be used as the predictive indicators for SAP．M ethods

Enrolled 65 AP patientswho had onsetwith acute epigastric pain in the last3 days and were definitely diagnosed according to2013 China guideline for AP treatment and admitted into Ningxia Medical University from December 2012 to September 2014．Among the patients，20(30．8%)had mild acute pancreatitis(MAP)，25(38．4%)had moderately severe acute pancreatitis (MSAP)，and 20(30．8%)had SAP．The expression levelsof serum FKN and its receptor CX3CR1 were detected using enzyme linked immunosorbentassay(ELISA)．Comparison wasmade in the expression levels of serum FKN and CX3CR1 among patients with different illness degrees．ROC curvesweremade，and the optimum cutoff points，sensitivity，specificity and accuracy were calculated．Results Patients with different illness degrees were significantly different in the expression levels of FKN and CX3CR1(P＜0．05);SAP patients were higher than MAP patients and MSAP patients in the expression levels of FKN and CX3CR1(P＜0．05)．The AUC of the prediction of SAPwas0．865 for FKN and 0．897 for CX3CR1，and the optimum cut－off pointwas2．08μg/L for FKN and 38μg/L for CX3CR1．The values of sensitivity for FKN and CX3CR1 were 86．96%and 90．91%，the values of specificity were 76．27%and 88．24%，and the accuracy valueswere79．27%and 89．04%．Conclusion

SAP patients are higher than MAP and MSAP patients in the expression levels of FKN and its receptor CX3CR1．The two indicators could be used to effectively predict the severity of AP，which isworth further study．

Pancreatitis;Fractalkine;Receptors，chemokine;Forecasting

R 576．1

A

10．3969/j．issn．1007－9572．2015．36．007

2015－06－05;

2015－11－18)

国家自然科学基金资助项目(81260086)

750004宁夏银川市，宁夏医科大学(孟锐，刘雅琦，吴阳);宁夏医科大学总医院消化内科(黄李雅)

黄李雅，750004宁夏银川市，宁夏医科大学总医院消化内科;E－mail:txmbw@126．com