青苹果蔓绿绒的组织培养和移栽上盆

何文杰

摘 要 用3%链霉素的MS溶液处理茎段，可较好地降低污染率，对内生菌起到抑制的作用。青苹果蔓绿绒启动培养基为MS+BA5.0 mg/L+NAA 0.2 mg/L时，效果最好。增殖培养基为MS+BA0.3 mg/L+NAA 0.01 mg/L时，效果最好。

关键词 青苹果蔓绿绒；组织培养；移栽

中图分类号：S682.36 文献标志码：A 文章编号：1673-890X（2015）09-008-02

青苹果蔓绿绒（Philoendron scandens Subsp）是多年生蔓性观叶植物，叶片大、质地厚而晶莹浓绿[1]。因其清雅飘逸，株形美观大方而深受人们喜爱。生产上用侧芽茎段扦插繁殖率太低，且浪费种源，为此，对青苹果蔓绿绒进行组织培养和快速繁殖，以提高其成活率[2]。

1 材料与方法

1.1 试验材料

花卉市场上购买的健壮盆栽，株高1.2 m。购入后放在水帘大棚内，待连续晴天时，截取约3 cm带腋芽的茎段作为外植体。

1.2 试验方法

1.2.1 外植体预处理

选用健壮盆栽植株，切取带腋芽芽茎段，切除叶片及叶柄。将取得的茎段分为两组，每组80个茎段。A组切取约3 cm带腋芽茎段，自来水冲洗30 min，再用洗洁精浸洗2遍，自来水冲洗干净。B组切取6～8cm带腋芽茎段，放在3%链霉素+MS溶液中30 d，每7 d换一次溶液，30 d后取出，再将茎段切成约3 cm长，冲洗30 min，再用洗洁精浸洗2遍，自来水冲洗干净。

1.2.2 无菌系的建立

A、B两组预处理后，转到超净工作台，无菌水冲洗3次，75%酒精浸洗60 s，无菌水冲洗3次，切去茎段两端褐化的切面。之后放入0.2%汞溶液中（加2～3滴吐温-20）消毒20～30 min，无菌水冲洗6～7次。切取1～2 cm带腋芽的茎段，放入启动培养基中，启动培养基为MS培养基，NAA浓度不变，6-BA分为4个浓度阶梯，每个浓度阶梯接种20个茎段，50 d后观察腋芽萌动情况。待腋芽生长点萌发，分化出不定芽后，转到增殖培养基中进行扩繁，增殖培养基为MS培养基，NAA浓度不变，6-BA浓度分为3个浓度阶梯，每个阶梯接种30瓶，40 d观察丛芽生长情况。将较大的苗转到生根培养基中壮苗生根，30 d后可将带1～3条根的健壮苗进行移栽。

1.2.3 培养条件

培养室温度（26±2） ℃，光照强度1 000～2 000 lx，每天光照12 h。

启动培养基：MS+6-BA 2.0～5.0mg/L +NAA0.2mg/L；增殖培养基：MS+6-BA 0.5～1.0mg/L+NAA0.01mg/L；壮苗和生根培养基：1/2MS+IBA0.5mg/L+NAA0.2mg/L+蔗糖20g/L+活性炭2g/L。

以上启动培养基和增殖培养基中均添加3%白砂糖和0.58%卡拉胶，pH为5.8，壮苗生根培养基中添加2%白砂糖和0.68%卡拉胶，pH为5.8。

1.2.4 试管苗壮苗培养与移栽上盆

将生根瓶苗移出玻璃瓶，用清水洗净附着的培养基，在 1 000倍多菌灵溶液中浸泡1 min，然后移栽至泥炭土和珍珠岩（5∶l）的混合基质中，用遮阴棚覆盖，光照保持在5 000 lx以下，30 d后光照逐渐增强，保持在8 000 lx以下。进行正常的肥、水管理，相对湿度保持在80%～90%，温度为20～25 ℃。

2 结果与分析

2.1 不同预处理对无菌系建立的影响

根据两种不同的预处理方法，探索预处理措施对降低污染率的作用。由表1可知，B组的污染率比A组低，青苹果蔓绿绒的内生菌污染比较严重，用3%链霉素的MS溶液处理30 d的茎段，污染率有所降低，3%链霉素的MS溶液对内生菌起到抑制的作用。

2.2 启动培养基的筛选

根据茎段在启动培养基上的生长表现，筛选出最佳细胞分裂素浓度水平。由表2可知，培养50 d后，6-BA浓度为2.0 mg/L时，腋芽萌发率最低，为12%，6-BA浓度为5.0 mg/L时，腋芽萌发率最高，为52%。腋芽萌发率在6-BA浓度为2.0～5.0 mg/L的范围内，随6-BA浓度增大而增大。

2.3 增殖培养基的筛选

根据丛生芽在增殖培养基上的生长情况，筛选出最有利丛生芽生长的细胞分裂素浓度水平。由表3可知，6-BA浓度在0.3～1.0 mg/L的范围内，随浓度增大，丛生芽越多，小苗叶片越小，叶片颜色越浅，愈伤团块越大，愈伤团块玻璃化趋势越明显，当6-BA浓度为0.3 mg/L时，丛生芽小苗生长状况最健壮；当-BA浓度为1.0mg/L时，丛生芽小苗弱小，愈伤团块生长迅速，有玻璃化趋势。

2.4 试管苗壮苗培养与移栽上盆

将生长健壮的小苗接种在1/2MS+IBA0.5mg/L+NAA0.2 mg/L+蔗糖20 g/L+活性炭2 g/L的培养基中，30 d后可长出新根，生根率为92%。将生根瓶苗移出玻璃瓶，用清水洗净附着的培养基，在1 000倍多菌灵溶液中浸泡1 min，然后移栽至泥炭土和珍珠岩（5∶l）的混合基质中，用遮阴棚覆盖，光照保持在5 000 lx以下，30 d后光照逐渐增强，保持在8000 lx以下。进行正常的肥、水管理，相对湿度保持在80%～90%，温度为20～25℃，成活率可达95%以上。

3 结论与讨论

青苹果蔓绿绒外植体预处理，用3%链霉素的MS溶液处理茎段，可较好地降低污染率，对内生菌起到抑制的作用。每7 d应更换一次新鲜溶液，防止茎段腐烂，处理30 d后茎段的腋芽可观察到萌动，腋芽生长膨胀。

青苹果蔓绿绒最佳启动培养基为MS+BA5.0 mg/L+NAA 0.2 mg/L，50 d后，腋芽萌发率达52%。6-BA的浓度越高，腋芽萌发得越早，在萌发后一段时间内，持续使用高浓度的细胞分裂素，愈伤团块生长旺盛，芽点增多，可提高增殖速率[3]。

青苹果蔓绿绒最佳增殖培养基为MS+BA0.3 mg/L+NAA 0.01 mg/L ，当使用高浓度细胞分裂素一段时间后，应适当降低细胞分裂素浓度，丛生芽在低浓度细胞分裂素的条件下，才可生长出健壮的小苗，愈伤团块不出现玻璃化现象[4]。

生根培养基为1/2MS+IBA0.5mg/L+NAA0.2 mg/L+蔗糖20 g/L+活性炭2 g/L，瓶苗生根率92 %。组培苗按移栽程序移栽，成活率达95%以上。

参考文献

[1]朱根发，张远能.花叶万年青的组织培养和快速繁殖[J].热带亚热带植物学报，1999，7（3）：243-247.

[2]莫饶，邓小江.蔓绿绒的离体繁殖[J].植物生理学通讯，1996（5）：359.

[3]朱根发.蔓绿绒属观赏植物的组织培养快速繁殖技术[J].植物学通报，2003（3）：342-345

[4]魏翠华，蔡宣梅.圆叶蔓绿绒快速繁殖条件的优化[J].亚热带植物通讯，2000，29（1）：26-30.

（责任编辑：赵中正）