烟叶唇柱苣苔组培苗的生根与移栽技术研究

潘梅+王景飞+戚华莎+黄赛+吕德任+姜殿强

摘要：以烟叶唇柱苣苔无菌芽苗为试材，研究基本培养基、糖浓度和不同生长素对其根系分化及移栽基质对组培苗移栽成活率的影响。结果表明，生根培养基为MS+NAA 0.5 mg/L+蔗糖30 g/L时，组培苗生根率高达100%，生根数多;在珍珠岩基质中栽培的生根苗，成活率高，生长状况好，是烟叶唇柱苣苔组培苗移栽的合适基质。

关键词：烟叶唇柱苣苔;叶片;离体培养;生根;移栽;培养基

中图分类号： Q943.1 文献标志码： A

文章编号：1002-1302（2015）04-0206-02

收稿日期：2014-06-06

基金项目：海南省科学事业费项目（编号：琼财预[2013]131号）。

作者简介：潘 梅（1962—），女，广西隆安人，高级园艺师，从事植物组织培养与开发利用研究。Tel：（0898）65380711;E-mail：panmei200@sina.com。

通信作者：姜殿强，硕士，副研究员，从事药用植物资源开发与利用研究。Tel：（0898）65393907;E-mail：dqjiang2004@163.com。

烟叶唇柱苣苔（Chirita heterotricha Merr.）是苦苣苔科唇柱苣苔属多年生草本植物，是海南特有珍稀苦苣苔科植物，分布于海南的琼中、琼海、保亭、三亚、白沙、东方，生长于海拔约430 m的山谷林中或溪边石上[1]。烟叶唇柱苣苔根状茎粗约1.5 cm，顶部节间长1.0～2.2 cm;叶对生或簇生，椭圆或长椭圆形;花序腋生，不分枝或2～3回分枝，有花2～15朵;花冠淡紫色或白色，花期长达6个月，是一种适合观赏和园艺的野生花卉，尚无人工栽培。烟叶唇柱苣苔可种子繁殖或叶片扦插繁殖，但受季节限制或繁殖系数低、繁殖速度慢，离体培养是种苗快速繁殖最为有效的方法。 组培苗的生根与移栽是组培快繁中最为关键的一环，关系到工厂化育苗能否成功。目前，关于烟叶唇柱苣苔组织培养的研究极少[2]，组培生根培养及出瓶移栽方面的研究更为有限。本试验针对烟叶唇柱苣苔生根阶段的培养基配方选择和移栽基质的优化进行探讨，旨在提供一套科学的生根移栽技术，为烟叶唇柱苣苔种苗快繁提供依据。

1 材料与方法

1.1 试验材料

无菌烟叶唇柱苣苔芽苗，由海南省农业科学院园林花卉研究所组培繁殖。

1.2 不同培养基配方对小苗生根的影响

除试验项外，所有培养基中均添加蔗糖30 g/L、卡拉胶9.0 g/L，灭菌前pH值为6.0。取高约1.2 cm的小苗接入各生根培养基中，每袋接种3株，每处理均接种8袋，重复3次;接种后，在光照度1 500 lx、光照时间9 h/d、温度（26±2） ℃条件下培养;接种30 d后统计生根率、生根数及株高。

1.2.1 基本培养基对小苗生根的影响 以1/4MS、1/2MS 、3/4MS、MS作为基本培养基，各添加NAA 0.5 mg/L。

1.2.2 糖浓度对小苗生根的影响 以MS+NAA 0.5 mg/L为基本培养基，蔗糖浓度分别设置为10、20、30、40、50 g/L共5种处理。

1.2.3 生长素种类对小苗生根的影响 以MS为基本培养基，分别添加NAA、IBA、IAA各0.5 mg/L，以不添加任何生长素的MS培养基作为对照。

1.3 移栽基质对组培苗成活率的影响

无根苗在生根培养基中培养30 d时，根系发达、有6～8张叶片，将其移入拱棚内炼苗7 d即可移栽。将苗从培养袋中取出，洗净根部培养基，注意不要伤到根系和叶片，分别栽种到珍珠岩、河沙、表土和珍珠岩+河沙+表土配比为 1 ∶ 1 ∶ 1 的4种基质中，每种基质栽种35株，浇透定根水，用透明塑料薄膜覆盖保湿，遮阳网遮阴，30 d后统计成活率。

2 结果与分析

2.1 不同培养基配方对小苗生根的影响

2.1.1 不同基本培养基对小苗生根的影响 由表1可见，在4种基本培养基中，组培苗生根率均达100%，但平均根数、株高及生长状况有差异。在MS培养基中，平均生根数最多，达22.78条，与其他处理差异极显著，株高最高，为 2.18 cm，植株生长状况好，植株健壮，叶色深绿;1/2MS和3/4MS培养基诱导生根效果次之，二者的平均生根数和株高接近，平均根数分别为19.39、19.84条，株高分别为2.06、2.07 cm，两者之间差异极不显著，植株较健壮;1/4MS培养基生根数最少，只有17.08条，且植株矮小、细弱，株高仅 1.57 cm。烟叶唇柱苣苔小苗生根最适宜的基本培养基是MS。

表1 不同基本培养基对烟叶唇柱苣苔小苗生根的影响

基本培养基 生根率

（%） 根数

（条） 株高

（cm） 生长状况

1/4MS 100A 17.00C 1.57B 较弱、叶绿

1/2MS 100A 19.39B 2.06A 较壮、叶绿

3/4MS 100A 19.84B 2.07A 健壮、叶深绿

MS 100A 22.78A 2.18A 健壮、叶深绿

2.1.2 不同糖浓度对小苗生根的影响 由表2可见，最低浓度和最高浓度的蔗糖生根效果均相对较差，10 g/L蔗糖时烟叶唇柱苣苔生根率和生根数最低，分别为74.6%和11.22条，其株高最高，为2.28 cm，植株细弱，叶片淡黄色，蔗糖为50 g/L时的生根率也较低，为90.0%，其生根数16.94条，植株矮小，叶色黄绿，茎基部膨大;蔗糖为 20、30、40 g/L时的生根率均达到100%，其中，30 g/L时的生根数最多，达到2022条，极显著高于其他处理，其株高为2.14 cm，与10 g/L时的株高差异不显著，且植株健壮，叶深绿色。烟叶唇柱苣苔小苗生根培养基的蔗糖浓度宜选用30 g/L。endprint

表2 不同蔗糖浓度对烟叶唇柱苣苔小苗生根的影响

蔗糖浓度

（g/L） 生根率

（%） 根数

（条） 株高

（cm） 生长状况

10 74.6C 11.22D 2.28A 细弱、叶淡黄

20 100A 14.06C 2.09AB 较壮、叶大而绿

30 100A 20.22A 2.14AB 健壮、叶深绿

40 100A 13.17C 1.96B 健壮、叶深绿、茎基少量愈伤

50 90.0B 16.94B 1.95B 矮小、叶黄绿、茎基膨大

2.1.3 不同生长素种类对小苗生根的影响 由表3可见，IBA、IAA和NAA对烟叶唇柱苣苔小苗生根都有促进作用，生根率、根数和株高均高于对照;NAA生根效果最好，生根率达到100%，根粗，平均生根数19.95条，均极显著高于IBA和IAA出来，植株健壮（图1）;其次是IBA，生根率为94.74%，诱导的根细长，平均生根数9.94条，植株较弱，叶微黄;IAA诱导生根效果最差，生根率偏低，只有80.95%，根细，平均根数9.67条，植株矮小。因此，烟叶唇柱苣苔组培苗的生根培养基宜选用MS+NAA 0.5 mg/L+蔗糖30 g/ L。

表3 不同生长素种类对烟叶唇柱苣苔小苗生根的影响

生长素种类

（mg/L） 生根率

（%） 根数

（条） 株高

（cm） 生长状况

CK 60.53D 5.94E 1.43C 细弱矮小、叶淡绿

IBA 94.74B 9.67B 2.13A 较弱、根细长、叶较黄

IAA 80.95C 9.94B 1.93B 较弱、根细、叶绿

NAA 100.00A 19.95A 2.19A 健壮、根粗、叶深绿

2.2 不同移栽基质对组培苗成活率的影响

由表4可见，不同基质移栽的烟叶唇柱苣苔组培苗成活率不同，处理间差异极显著，以珍珠岩作为基质移栽成活率最高，为94.29%（图2）;其次是河沙，为77.14%;最低的是表土，为22.86%，这可能是由于表土通透性较差，不利于根系生长;V珍珠岩 ∶ V河沙 ∶ V表土=1 ∶ 1 ∶ 1是在表土基质中加入了等体积的珍珠岩和河沙，基质的通透性有所改善，但成活率仍然较低，为37.14%，这可能与表土较为黏连有关。因此，选用珍珠岩作为基质移栽烟叶唇柱苣苔组培幼苗较好。

表4 不同移栽基质对烟叶唇柱苣苔组培苗生长的影响

基质 移栽株数

（株） 成活株数

（株） 成活率

（%）

珍珠岩 35 33 94.29A

河沙 35 27 77.14B

表土 35 8 22.86D

V珍珠岩 ∶ V河沙 ∶ V表土=1 ∶ 1 ∶ 1 35 13 37.14C

3 结论

本研究结果表明，使用无机盐减量的MS培养基，其烟叶唇柱苣苔小苗的生根效果较差，全量MS培养基诱导生根效果最好，烟叶唇柱苣苔生根率达100%，生根数和生根率都极显著高于3/4MS和1/2MS基本培养基，植株长势良好;较低和较高浓度的蔗糖对烟叶唇柱苣苔组培苗生根效果较差，表现为生根率低、生根数量少，以30 g/L 蔗糖浓度诱根效果最好，生根率为100%，生根数达20.22条，极显著高于其他处理;生长素IBA、IAA和NAA对烟叶唇柱苣苔培苗生根均有明显的促进作用，极显著高于对照处理，其中，以NAA的生根效果最好，其生根率高，生根数多，且根粗，植株健壮。综合分析结果可知，烟叶唇柱苣苔生根最佳培养基为MS+NAA 0.5 mg/L+蔗糖30 g/L。

在组培苗移栽生根过程中，基质的理化性质起至关重要的作用，其透气性和含水量对移栽成活率的影响较大，并对诱发新根起关键作用[3]。在烟叶唇柱苣苔组培苗移栽过程中，由于表土吸水性和保水性强，比较黏结，通气性差，使组培苗根系的生长受到影响，引起幼苗先萎蔫后死亡;在表土基质中加入等体积的珍珠岩和河沙，基质通透性有所改善，但由于透气性仍较差，成活率仍然较低，可以考虑加大珍珠岩和河沙的比例以增强基质通透性;河沙的透气性好，洁净，但保水性差，所以成活率也较低;珍珠岩吸水和贮水能力均很强，且疏松、通透性好，有利于根系的生长发育，组培苗的成活率相对最高。因此，烟叶唇柱苣苔组培苗的移栽基质以珍珠岩为佳。

参考文献：

[1]史佑海，徐世松，黄觉武. 海南苦苣苔科野生植物资源及其观赏特性评价[J]. 北方园艺，2011（11）：79-82.

[2]汤正辉. 苦苣苔科植物的快速繁殖、离体保存及耐阴性研究[D]. 成都：四川大学，2007.

[3]尹淑莲，郭伟珍，林 艳，等. 基质理化性质对组培苗生根状况的影响[J]. 辽宁林业科技，2005（5）：18-19，24.endprint