纳米银对烟草花叶病的田间防效试验

王莹+徐翠莲+赵铭钦+刘玲玲+杜林洳+孙翠红

摘要：为了寻找对烟草花叶病具有较好防治效果的药剂，研究了100 μg/mL壳寡糖、2%宁南霉素300倍液、席夫碱纳米银200倍液、席夫碱纳米银100倍液对烟草花叶病的防治效果。试验结果显示，以上药剂对烟草花叶病均具有一定的防治效果，其中席夫碱纳米银100倍液的防治效果较好，其防效达到67.68%;100 μg/mL壳寡糖防治效果最差，为3637%;研究发现各药剂对烟株的生长均具有一定的促进作用。

关键词：烟草花叶病;纳米银;壳寡糖;宁南霉素;防效

中图分类号： S435.72 文献标志码： A

文章编号：1002-1302（2015）04-0173-02

收稿日期：2014-07-28

基金项目：河南省烟草公司项目（编号：HYKJ201015）。

作者简介：王 莹（1987—），女，河南商丘人，硕士研究生，研究方向为烟草抗病性物质的合成与应用。E-mail：wying666@163.com。

通信作者：徐翠莲，博士，教授，研究方向为烟草化学。E-mail：xucuilian666@126.com。

烟草花叶病是烟草生产上的重要病害之一，流行年份田间发病率可达到50%以上，在我国各种植烟区均有发生[1-6]。该病不仅使烟叶产量受到影响，还使中上等烟比例下降，外观质量及内在品质也受到影响，常造成巨大的经济损失，成为优质烟叶生产的重要制约因素之一[7]。研究和防治烟草花叶病一直是烟草生产中的重大课题，在对烟草花叶病的防治方面，国内外已经做了大量的研究，在一定程度上遏制了该病的发生与蔓延[3]。

化学药剂对烟草花叶病毒抑制作用的好坏，直接影响烟草花叶病病害的流行危害和控制效果，因而寻找对烟草花叶病具有有效防治效果的药剂是防治烟草花叶病的重要途径之一。已有的化学农药对烟草花叶病具有一定的防治效果，但是随着化学农药在植物体内积累、残留问题的日益严重，寻找其他更为有效的防控措施成为了烟草生产面临的主要问题[8]。已有相关报道显示，纳米银对烟草花叶病毒具有一定的防治效果[9]。随着纳米材料和纳米技术的发展，纳米技术已经应用在植物保护剂的研究方面，农药研究者开始在传统农药剂型的基础上开发新型农药——纳米农药。纳米材料在病虫害防治中的应用显示出比传统杀虫剂更好的效果[10]，现在纳米技术的应用使古老的银重放异彩[11]，纳米银作为金属银的一种特殊的形态，由于量子效应、小尺寸效应和具有极大的比表面积，使其具有超强的活性及渗透性。作为一种新型的抗菌剂，纳米银具有强大的抑菌、杀菌作用及广谱的抗菌活性，具有传统无机抗菌剂无法比拟的抗菌效果，且无耐药性，安全性高[8];纳米银除了具有高效的抗菌特性，还具有一定的广谱抗病毒作用[12]。

本试验主要研究了以席夫碱[13]为还原剂制备的纳米银对烟草花叶病的田间控制作用以及对烟草农艺性状的影响，以期对有效控制烟草花叶病的发生、流行，取得较高的社会效益、经济效益起到一定的指导作用。

1 材料与方法

1.1 材料与药剂

供试烟品种为k326，由江西省赣州市烟草公司宁都县分公司提供。

供试药剂主要有：壳寡糖，相对分子质量<3 000，脱乙酰度>90%，山东奥康生物科技有限公司;2%宁南霉素水剂，黑龙江强尔生化技术开发有限公司;纳米银（1 mg/mL）由河南农业大学的徐翠莲教授提供。

1.2 试验地点

试验选择在赣州市宁都县黄陂镇樟坊村进行。试验地点通风向阳、土壤肥沃、地势平坦、土质较好，土壤质地为黄壤，试验田施药前未施用其他抗病毒药剂。

1.3 试验设计

试验共设处理Ⅰ：清水对照;处理Ⅱ：100 μg/mL壳寡糖;处理Ⅲ：2%宁南霉素300倍液;处理Ⅳ：席夫碱纳米银200倍液;处理Ⅴ：席夫碱纳米银100倍液等5个处理。于2011年3月6日进行移栽，株行距120 cm×55 cm，每个处理（小区）面积 0.033 hm2，裂区试验设计，重复3次，四周设保护行。苗期的管理、日常施肥、病虫害防治、除草灌溉等均与大田管理一致。

1.4 施药方法

分别在烟苗移栽后的20、30、40 d用16型背负式喷雾器进行喷药处理，共施药3次。喷药量以药液在叶面饱和、无下滴为限。

1.5 结果调查

在喷施第3次药剂后当天以及喷药后10、20、30 d观察发病情况，记录发病级别，计算病情指数、防治效果，并在每次施药后观察是否有药害产生。对于农艺性状采取固定株跟踪调查，每小区选取5株，具体方法参阅YC/T 142—1998《烟草农艺性状调查方法》。烟草花叶病的分级标准见表1。

表1 烟草花叶病的分级标准

级别 症状

0 全株无病

1

新叶脉透明或轻微花叶，或上部1/3叶片花叶但不变形，植株无明显矮化

2

1/3～1/2叶片花叶，或少数叶片变形，或主脉变黑，植株矮化为正常株高的2/3以上

3

1/2～2/3叶片花叶，或变形或主侧脉坏死，或植株矮化为正常株高的1/2～2/3

4

全株叶片花叶，严重变形或坏死，病株矮化为正常株高的1/3～1/2

根据表1的分级，病情指数等相关数据的计算公式如下：

病情指数=∑（各级病株数×发病株各级代表值）调查总株数×最重级数值×100%;

发病率=发病株数调查总株数×100%;

防治效果=对照区病情指数-处理区病情指数对照区病情指数×100%。

2 结果与分析

2.1 小区防效调查endprint

从表2可以看出，各药剂对烟草花叶病均具有一定的防治效果，但不同的药剂处理防效有差异。席夫碱纳米银100倍液药效最好，3次调查发现，其对烟草花叶病的相对防效分别是66.51%、68.71%、67.84%;其次是席夫碱纳米银200倍液，3次调查防效分别是51.66%、57.13%、61.37%;2%宁南霉素300倍液的3次调查防效分别是45.16%、51.73%、5127%;100 μg/mL壳寡糖对烟草花叶病的防治效果最差，3次调查防效分别是33.62%、36.70%、38.79%。

从表3可以看出，各药剂对烟草花叶病均具有一定的防治效果。其中席夫碱纳米银100倍液的防效最高，平均为6768%;其次为席夫碱纳米银200倍液，平均防效为56.72%;

表2 不同调查时间不同药剂处理对烟草花叶病的田间防治效果

处理

4月26号 5月6号 5月16号

病情

指数 相对防

效（%） 病情

指数 相对防

效（%） 病情

指数 相对防

效（%）

Ⅰ 8.211 10.750 12.556 4

Ⅱ 5.450 33.62 6.804 36.70 7.687 0 38.79

Ⅲ 4.503 45.16 5.188 51.73 6.120 0 51.27

Ⅳ 3.969 51.66 4.608 57.13 4.851 0 61.37

Ⅴ 2.750 66.51 3.363 68.71 4.039 0 67.84

表3 各处理防效比较结果

处理 病情指数平均值 平均相对防效

（%）

Ⅰ 8.883aA

Ⅱ 6.124bB 36.37

Ⅲ 4.847cC 49.39

Ⅳ 4.205dC 56.72

Ⅴ 2.037cdC 67.68

注：同列数据后标有不同小写、大写字母分别表示差异显著（P<0.05）、极显著（P<0.01）。表4同。

2%宁南霉素300倍液的平均防效为49.39%;100 μg/mL 壳寡糖的平均防效为36.37%。

2.2 小区农艺性状调查

从表4可知，与对照（处理Ⅰ）相比，所有药剂都促进了烤烟株高、叶面积、节距、茎围的生长。从3次调查中可以看出，总体来说，不同的药剂对烟株株高、叶面积、节距、茎围的促进作用大致表现为：席夫碱纳米银100倍液>席夫碱纳米银200倍液>2%宁南霉素300倍液>100 μg/mL壳寡糖。席夫碱纳米银100倍液和席夫碱纳米银200倍液差异不明显，2%宁南霉素300倍液和席夫碱纳米银200倍液差异不显著，部分日期2%宁南霉素300倍液与席夫碱纳米银100倍液具有显著性差异（P<0.05）。

表4 不同时间的农艺性状调查结果

处理

4月26日 5月6日 5月16日

株高

（cm） 叶面积

（cm2） 节距

（cm） 茎围

（cm） 株高

（cm） 叶面积

（cm2） 节距

（cm） 茎围

（cm） 株高

（cm） 叶面积

（cm2） 节距

（cm） 茎围

（cm）

Ⅰ 52.7a 553.0a 5.0a 6.6a 65.9a 734.0a 5.1a 6.3a 80.9a 1 060.1a 5.1a 9.7a

Ⅱ 54.1ab 570.5ab 5.2ab 6.9ab 69.5b 795.1ab 5.7ab 6.6ab 84.5b 1 120.8ab 5.7ab 9.9ab

Ⅲ 55.8abc 577.7ab 5.5abc 7.0b 72.0b 821.4bc 5.7ab 7.1ab 85.0b 1 162.9bc 5.8ab 10.5bc

Ⅳ 59.7c 610.2bc 5.4bc 7.1b 70.8bc 880.0c 6.0b 7.4ab 87.9bc 1 225.5c 6.0b 10.7c

Ⅴ 59.1bc 635.8c 5.6c 7.2b 74.1c 968.7d 6.2b 7.6b 89.1c 1 339.6d 5.9b 11.8d

3 小结与讨论

田间小区试验表明：100 μg/mL壳寡糖、2%宁南霉素300倍液、席夫碱纳米银200倍液、席夫碱纳米银100倍液对烟草花叶病均具有一定的防治效果，其中席夫碱纳米银100倍液对烟草花叶病的防治效果最好，有望在烤烟生产中防治烟草花叶病方面进行推广使用。

（席夫碱纳米银是一种安全、无毒害、对环境无污染的新型生物源药剂，能够有效诱导烟草产生抗病反应，调节烟草生理活性，使用方便，不污染环境，符合我国生态农业的要求，有关其诱导机理仍须进一步研究。

目前烟草花叶病仍没有很好的单一防治措施[14-17]，在病害发生后也缺少有效的治疗方法。对烟草花叶病的防治要坚持以“预防为主，综合防治”的植保方针，早施药，早预防，消除病毒的侵染、传播和蔓延途径。提倡卫生栽烟，强化农业栽培措施，提高烟株抗性。

参考文献：

[1]王瑞平，李荣芳，贺 坚，等. 烟草花叶病的发生规律与综合防治[J]. 甘肃农业，2010（2）：84.

[2]许美玲，赵立红，段玉琪，等. 抗TMV烟草种质资源材料的筛选和综合评价[J]. 植物遗传资源学报，2004，5（2）：142-146.endprint

[3]刘 旭，万宣伍，刘国军，等. 3种药剂对烟草花叶病的控制作用及农艺性状的影响[J]. 西南师范大学学报：自然科学版，2010，35（1）：101-104.

[4]张满让，成巨龙，安德荣. 影响陕西烟草蚜传病毒病发生因子的研究[J]. 中国烟草学报，2000，6（3）：28-32.

[5]蔡健和，周兴华，黄福新，等. 广西烟草病毒病发生相关因素分析及综合防治研究[J]. 广西农业科学，2009，40（2）：159-163.

[6]翟梅枝，高芳銮，沈建国，等. 抗TMV的植物筛选及提取条件对抗病毒物质活性的影响[J]. 西北农林科技大学学报：自然科学版，2004，32（7）：45-49.

[7]McGrath M T，Shishkoff N.Evaluation of biocompatible products for managing cucurbit powdery mildew[J]. Crop Protection，1999，18（7）：471-478.

[8]杨海艳，谢雪梅，王 波，等. 纳米银对烟草病毒的体外抑制作用[J]. 贵州农业科学，2011，39（11）：112-114.

[9]杨海艳，王福超，王浩华，等. 纳米银对烟草花叶病毒的抑制作用及烟草酶活性的影响[J]. 江苏农业科学，2012，40（2）：87-89.

[10]江 兰，郑 飞，冷鹏飞，等. 纳米农药的研究进展[J]. 广东农业科学，2010，37（5）：97-100.

[11]薛玉英，唐 萌. 纳米银生物学效应研究进展[J]. 东南大学学报：自然科学版，2009，39（6）：1315-1320.

[12]向冬喜，郑丛龙. 纳米银抗病毒作用的研究进展[J]. 大连医科大学学报，2009，31（6）：716-719.

[13]杨 楠，徐翠莲，杨国玉，等. 壳寡糖希夫碱金属配合物的合成及其对烟草花叶病毒的抑制活性[J]. 农药学学报，2010，12（1）：31-36.

[14]饶荣莲. 浅析烟草花叶病的综合防治技术[J]. 福建农业科技，2011（2）：51-52.

[15]李 正，解昌盛，向永光，等. 2011年巫溪烟区烟草普通花叶病发生规律及防治研究[J]. 河南农业科学，2012，41（11）：96-99，106.

[16]李学卫，丁 铭，阮红艳，等. 丽江烤烟漂浮育苗烟草花叶病毒检测及发生规律[J]. 云南农业大学学报，2011，26（增刊2）：129-131，138.

[17]汪代斌，辛 静，王 晗，等. 烟草花叶病发生规律及生物源抗病毒研究进展[J]. 湖北农业科学，2011，50（11）：2174-2176，2186.endprint