不同激素对青杞1号枸杞叶片愈伤组织诱导和生长的影响

2015-06-15安焕霞王占林侯宪宽

江苏农业科学 2015年4期

安焕霞+王占林+侯宪宽

摘要：以枸杞品种青杞1号叶片为外植体，比较不同激素浓度和配比对叶片愈伤组织诱导、愈伤组织生长的影响。结果表明，诱导叶片产生愈伤组织最佳的激素浓度与配比是0.7mg/L NAA+0.7mg/L 6-BA;对愈伤组织增殖效果最好的激素浓度与配比是1.0 mg/L 6-BA+0.8 mg/L IBA+0.2 mg/L NAA;对愈伤组织分化效果最好的激素浓度与配比是1.3 mg/L KT+0.02 mg/L NAA。

关键词：青杞1号;枸杞;叶片;激素;愈伤组织诱导

中图分类号： S567.1+90.4 文献标志码： A

文章编号：1002-1302（2015）04-0059-03

收稿日期：2014-12-17

基金项目：国家星火计划重大项目（编号：2012GA870001）。

作者简介：安焕霞（1988—），女，河北邯郸人，硕士研究生，研究方向为森林培育。E-mail：m13086272187@163.com。

通信作者：王占林，研究员，研究方向为森林培育。E-mail：1735105720@qq.com。

枸杞（Lycium barbarum L.）在植物学分类学上属被子植物门双子叶植物纲茄科枸杞亚属。既具有防风固沙、保持水土的作用，又是名贵的中药材，应用前景十分广阔[1-5]。青海省柴达木地区平均海拔2 600～3 000 m，日照时间长，昼夜温差大，空气湿度低，独特的气候条件使得枸杞具有粒大饱满、肉质肥厚、色泽鲜艳且味甘等特性，但枸杞产区存在品种混乱，高产高抗大果型品种匮乏现象，针对此问题，青海省农林科学院经辐射育种培育出枸杞品种青杞1号。在栽培繁殖过程中，须保持枸杞木本优良性状，受繁殖材料限制，采用植物组织培养的方式进行快速繁育，是一种极为经济有效的途径。

植物组织培养建立在植物细胞的全能性、植物的再生作用的基础上[6]，而植物再生主要是离体的细胞、组织或器官恢复分生状态，形成愈伤组织，进而再分化的过程[7]。一般认为，培养环境是能否成功诱导出愈伤组织的重要因素，而在诱导愈伤组织、分化过程中激素是关键[8-9]。

目前，众多学者对枸杞组织培养和快速繁殖进行了研究[10-12]，但还不够系统和完善，本研究以青杞1号枸杞叶片为试验材料，通过设置不同激素浓度和配比，统计分析愈伤组织生长情况，筛选出最佳的激素配比，为青杞1号快速扩繁提供可靠的依据，也可为其他木本植物的相关研究提供技术依据。

1 材料与方法

1.1 材料

为防止材料污染现象发生而影响试验结果，本试验从无菌组培苗（由柴达木枸杞产业升级关键技术开发与示范项目提供）上采集叶片。

1.2 方法

1.2.1 培养条件主要是温度和照度，温度均为（23±1） ℃，光照时间16 h/d，照度1 000～1 600 lx。另外MS培养基为基本培养基，并添加蔗糖30 g/L、琼脂6.0 g/L，调节pH值为5.8～6.0，在容量为 150 mL的三角瓶中装入 50 mL，在手提式高压灭菌锅中，于121 ℃灭菌23 min。

1.2.2 激素配制 1 mg/mL NAA、IBA、6-BA的配制：称取 0.1 g 药粉，加 1 mL蒸馏水，滴入0.1 mol/L NaOH 反复摇晃，再滴入NaOH，一直到药物全部溶解，然后用100 mL容量瓶加水定容，盖塞后摇匀。

1 mg/mL KT 的配制：称取 0.1 g 药粉，加 2～3 mL蒸馏水，滴入0.1 mol/L NaOH 反复摇晃，再滴入NaOH，一直到药物全部溶解，然后用100 mL容量瓶加水定容，盖塞后摇匀。

1.2.3 试验设计

1.2.3.1 叶片愈伤组织诱导将处理好的叶片切成长 1.5 cm、宽0.5 cm左右的小块，置于不同愈伤组织诱导培养基上培养，定期观察其生长情况，叶片愈伤组织诱导培养基溶配比见表1。每瓶接种3块叶片，每处理接种3瓶，重复3次。

表1 叶片愈伤组织诱导

处理

培养基（mg/L）

NAA 6-BA

1 0.2 0.2

2 0.5 0.5

3 0.7 0.7

4 1.0 1.0