表面活性剂对阿托伐他汀钙片溶出度的影响*

冯锁民，翟西峰，陈 程，景亚莉，李惠民，周范莉，王 帅

(1.西安医学院 药学院，陕西 西安 710021；2.商洛职业技术学院，陕西 商州 726000)

阿托伐他汀钙是他汀类药物中最常用的降低胆固醇药物。除降脂外，还能改善内皮细胞功能、稳定斑块、抗凝、改善微循环，广泛用于心脑血管疾病的预防和治疗[1]。但由于阿托伐他汀钙难溶于水，限制了其口服制剂生物利用度的发挥[2]。作者通过加入不同种类的表面活性剂——十二烷基硫酸钠、泊洛沙姆188、吐温-80，采用粉末直接压片的方法，使用高效液相色谱法测定不同时间片剂中阿托伐他汀钙的溶出度并进行比较，筛选出增溶效果最好的表面活性剂。

1 实验部分

1.1 试剂与仪器

阿托伐他汀钙原料药：批号130801,质量分数101%，湖南迪诺制药有限公司；阿托伐他汀钙对照品：批号100808-201203，质量分数95.3%，中国食品药品鉴定研究院；微晶纤维素(MCC)、CMS-Na、硬脂酸镁:上海山浦化工有限公司；乳糖、泊洛沙姆188(F68)：沈阳药科大学制药厂；吐温-80:东光县光大油脂有限公司；十二烷基硫酸钠:天津市天力化学试剂有限公司,以上均为药用级。甲醇、乙腈：色谱纯，磷酸氢二钠、磷酸二氢钾、醋酸铵：分析纯，天津市科密欧化学试剂有限公司。

高效液相色谱系统1260型、Agilent HC-C18柱(250 mm×4.6 mm，5 μm)：美国安捷伦Agilent科技有限公司；单冲压片机：上海天凡药机制造厂；FA1004B型电子天平：上海越平科学仪器有限公司；赛多利斯酸度计PB-10：上海皖宁精密科学仪器有限公司；D-800LS智能药物溶出仪：天津市天大天发科技有限公司。

1.2 HPLC测定阿托伐他汀钙含量方法的建立

1.2.1 色谱条件

Kromasil C18色谱柱(250 mm×4.6 mm，5 μm)；流动相：醋酸铵缓冲溶液(称取醋酸铵0.77 g，置500 mL水中，超声使溶解，用冰醋酸调节pH至4.5±0.05)-乙腈(体积比55∶45)，流速1.0 mL/min，检测波长244 nm，进样量20 μL，柱温35 ℃。

1.2.2 溶液的制备

1.2.2.1 对照品溶液的制备

精密称取阿托伐他汀钙对照品10.01 mg，置于5 mL棕色量瓶中，用甲醇溶解稀释至刻度，配制成1.908 mg/mL的对照品储备液。

1.2.2.2 供试品溶液的制备

精密称取阿托伐他汀钙原料药0.100 3 g，用甲醇溶解配成0.040 12 mg/mL的供试品溶液。

1.2.3 方法学考察

1.2.3.1 线性关系

精密量取“1.2.2.1”项下阿托伐他汀钙对照品储备液，依次用甲醇稀释成质量浓度为0.005、0.01、0.02、0.04、0.08、0.16 mg/mL的标准液系列。分别吸取上述各溶液20 μL，按“1.2.1”项下色谱条件，进样测定。

1.2.3.2 精密度实验

取浓度为0.04 mg/mL的对照品溶液，按“1.2.1”项下色谱条件重复进样6次。

1.2.3.3 重复性实验

取浓度为0.040 12 mg/mL的供试品溶液，按“1.2.1”项下色谱条件连续进样6次。

1.2.3.4 稳定性实验

取浓度为0.04 mg/mL的对照品溶液一份，室温下放置，按“1.2.1”项下色谱条件，在0、2、4、6、8、10 h各个时刻段分别进样。

1.2.3.5 加样回收率实验

精密量取浓度为0.04 mg/mL的阿托伐他汀钙原料药3份，每份120 μL，分别加入浓度为0.04 mg/mL的阿托伐他汀钙对照品溶液80、100、120 μL，摇匀，按“1.2.1”项下色谱条件测定峰面积，各样品重复测定3次，计算含量。

1.2.4 阿托伐他汀钙原料药含量测定

精密称取阿托伐他汀钙原料药，配成浓度为0.04 mg/mL，连续进样6次,测定峰面积,计算样品平均含量100.8%，与湖南迪诺制药的药检报告101%接近。

1.2.5 阿托伐他汀钙片剂的制备

设计的阿托伐他汀钙片处方组成见表1。将主药与辅料按等量递加法混合均匀，选直径7 mm的模具，用单冲压片机，采用粉末直接压片的方法，每个处方压制100片。

表1 阿托伐他汀钙片处方组成 m/mg

1.2.6 片剂含量测定

取各处方药品10片，精密称重，研细混匀，分别称取相当于阿托伐他汀钙25 mg的粉末，于25 mL容量瓶中，用甲醇溶解摇匀，过滤，精密量取续滤液1 mL，置于10 mL容量瓶中用甲醇稀释。各取20 μL，按“1.2.1”项下色谱条件进样，记录峰面积，按外标法计算含量。

1.2.7 阿托伐他汀钙片的溶出度测定

分别取处方A、B、C的阿托伐他汀钙5片，照中国药典溶出度测定方法中的桨法[3]，以磷酸盐缓冲液为溶出介质，转数100 r/mim，每5、10、15、30、45、60 min时取样5 mL(同时补充空白介质5 mL)，用微孔滤膜过滤，取滤液20 μL，按“1.2.1”项下色谱条件进样，记录阿托伐他汀钙峰面积，计算累积溶出度。

2 结果与讨论

2.1 结果

2.1.1 方法学考察结果

线性关系中测定的峰面积分别为107、350、725、1 132、2 347、4 691，回归方程为：A=30 698c-4.987 9，r=0.999 7，表明阿托伐他汀钙在0.005～0.16 mg/mL线性良好。对照品的HPLC色谱图见图1。

精密度中测得的峰面积分别为1 291、1 299、1 287、1 280、1 297、1 289，RSD为0.53%，表明精密度良好。

t/min图1 阿托伐他汀钙对照品的HPLC图

重复性实验测得阿托伐他汀钙峰面积分别为1 387、1 381、1 390、1 376、1 383、1 372，计算含量的RSD=0.49%，表明重复性良好。样品的HPLC色谱图见图2。

t/min图2 阿托伐他汀钙原料的HPLC图

稳定性实验中测得的峰面积分别为2 231、2 226、2 221、2 217、2 212、2 208，RSD=0.39%，表明溶液在10 h内稳定。

回收率实验中测得的结果见表2。平均回收率100.06%，RSD为0.87%。

表2 加样回收率实验(n=9)

2.1.2 片剂含量测定结果

3个处方中阿托伐他汀钙的含量测定结果见表3。片剂A的样品色谱图见图3，片剂阴性对照色谱图见图4。

表3 片剂中w(阿托伐他汀钙)测定结果

t/min图3 阿托伐他汀钙A处方的HPLC图

t/min图4 阿托伐他汀钙片空白辅料的HPLC色谱图

2.1.3 溶出度测定结果

A、B、C 3个处方溶出度测定结果见表4。

表4 阿托伐他汀钙片的溶出度测定结果(x±SD,n=5) 溶出度/%

2.2 讨论

2.2.1 流动相筛选

实验参照阿托伐他汀钙国家药品标准[4]和相关文献[5-6]，经摸索流动相采用V(醋酸铵缓冲液)∶V(乙腈)=55∶45比较合适。该比例不仅能实现主成分峰及各杂质峰之间较好分离，而且组成简单。

2.2.2 溶出度测定方法的选择

参照文献[7-8]方法，结合实际，溶出度测定方法采用浆法，以pH=6.8磷酸盐缓冲液为溶出介质，转数100 r/min。该方法能较好的反映阿托伐他汀钙片的溶出行为。

3 结 论

在主药和其它辅料相同的情况下，分别用3种不同的表面活性剂(泊洛沙姆188、吐温-80、十二烷基硫酸钠)作为单因素，设计3个处方进行片剂制备，通过测定溶出度进行比较，从表4可以看出，加有表面活性剂十二烷基硫酸钠的处方C在各个时刻段的溶出度明显高于处方A和B，因此3种表面活性剂中十二烷基硫酸钠对阿托伐他汀钙的增溶效果最好。

[ 参 考 文 献 ]

[1] 姜远英.临床药物治疗学[M].北京:人民卫生出版社,2013:220,245.

[2] 沈海蓉,李中东,钟明康.阿托伐他汀钙自微乳释药系统的制备和评价[J].药学学报,2005,40(11):982-987.

[3] 国家药典委员会.中华人民共和国药典二部[S].北京:中国医药科技出版社,2010：85-86.

[4] 国家食品药品监督管理局.国家药品标准新药转正标准阿托伐他汀钙，第36册(西药部分)[S].北京：人民卫生出版社，2009：198.

[5] 汪秋兰,王文清,施春阳,等.高效液相色谱法测定阿托伐他汀钙片中阿托伐他汀钙的含量[J].医药导报,2013,32(3):366-368.

[6] 李文莉,钟庆元,文庆.HPLC法测定阿托伐他汀钙胶囊的含量及有关物质[J].药物分析杂志，2007,27(2)：267 -269．

[7] 范松华.高效液相色谱法测定阿托伐他汀钙片的溶出度[J].上海医药,2013,34(1):53-56.

[8] 魏农农,王霞,苏敏.药物溶出度试验方法研究进展[J].中国新药杂志,2013,22(10):1119-1124.