某院尿路感染病原菌分布及耐药性分析

廖国林，李江萍，吴 真，孙 沛，王海红，娄良文

·药敏分析·

某院尿路感染病原菌分布及耐药性分析

廖国林，李江萍*，吴 真，孙 沛，王海红，娄良文

目的 研究尿路感染病原菌的分布及其耐药性，为临床使用抗菌药物提供依据。方法 收集2011年1月至2014年6月尿培养阳性菌株，应用MicroScan WalkAway40细菌鉴定及药敏分析系统对分离菌进行鉴定及药敏测定，根据CLSI 2014版标准判断药敏结果，用WHONET 5.6软件进行数据分析。结果 共分离出2 028株病原菌，革兰阴性杆菌占65.3%，革兰阳性球菌占22.1%，真菌占12.6%。革兰阴性杆菌对亚胺培南、美洛培南、哌拉西林/他唑巴坦、头孢哌酮/舒巴坦较敏感。屎肠球菌对所测试抗菌药物耐药率显著高于其他肠球菌，未发现耐万古霉素、利奈唑胺的革兰阳性球菌。结论 尿路感染病原菌分布广泛，仍以革兰阴性杆菌为主，细菌耐药谱有较大差异，建议临床医生根据病原学监测资料有针对性地选择抗菌药物。

尿路感染；病原菌；耐药性；抗菌药物

0 引言

尿路感染是临床常见的感染性疾病之一，发病率约占人口的2%，仅次于呼吸系统感染[1-3]。由于广谱抗菌药的广泛使用，越来越多的细菌出现了耐药性，从而增加了临床对尿路感染患者的治疗难度。随着微生物检测技术的不断提高，从尿液中检出的菌株种类越来越多。为了解我院尿路感染病原菌分布及其耐药性，笔者对临床送检尿标本中培养出的2 028株病原菌的分布及其药敏结果进行回顾性分析，现报道如下。

1 材料与方法

1.1 标本来源 收集2011年1月至2014年6月我院住院及门诊尿路感染患者的清洁中段尿、引流尿或术中抽取的尿液标本。

1.2 培养及鉴定方法 将收集的合格尿标本按定量接种法[4]立即接种血平板、CLED平板，计数菌落数，符合尿路感染诊断标准[5]的菌株用MicroScan WalkAway40全自动细菌鉴定及药敏检测系统进行鉴定与药敏测定，药敏结果按美国CLSI 2014版[6]的标准进行判定。

1.3 超广谱β-内酰胺酶的检测 采用CLSI[6]推荐的纸片筛选与表型确证试验检测。

1.4 碳青霉烯酶的检测 采用改良Hodge试验[6]检测。

1.5 质量控制 用标准菌株大肠埃希菌ATCC25922、金黄色葡萄球菌ATCC25923、铜绿假单胞菌ATCC27853、肺炎克雷伯菌ATCC700603进行质量控制。

1.6 统计分析 用WHONET 5.6软件进行统计与细菌耐药性分析。

2 结果

2.1 病原菌分布

2.1.1 菌种分布 共分离出非重复菌2 028株，其中从男、女性患者分别分离出932株(46%)和1 096株(54%)。2 028株病原菌中革兰阴性菌1 325株，占65.3%；革兰阳性菌448株，占22.1%；真菌255株(均为念珠菌)，占12.6%。各菌种分布及构成比见表1。

表1 2 028株病原菌分布构成比

2.1.2 病区分布 2 028株病原菌主要分离自泌尿外科，占37.4%；其他病区依次为重症医学科、肾内科、神经内科、神经外科、内分泌科等，见表2。

2.2 2 028株病原菌对各类抗菌药物的耐药率

2.2.1 主要革兰阴性菌 2 028株尿路分离病原菌中，G-菌排前5位的依次为：大肠埃希菌、肺炎克雷伯菌、铜绿假单胞菌、变形杆菌属、肠杆菌属。大肠埃希菌和肺炎克雷伯菌ESBLs发生率分别为47.6%(410/862)和25.0%(28/112)。检测出产碳青霉烯酶大肠埃希菌和产气肠杆菌各1株，主要G-菌对常用抗菌药物的耐药性见表3。

2.2.2 主要革兰阳性菌 2 028株尿路分离病原菌中G+排前5位的依次为：粪肠球菌、屎肠球菌、凝固酶阴性葡萄球菌(CNS)、肠球菌属和金黄色葡萄球菌。MRSA发生率为4%(1/25)，未发现耐万古霉素和利奈唑胺革兰阳性球菌。主要G+对常用抗菌药物的耐药性见表4。

2.2.3 真菌 共分离到255株念珠菌，尿液中念珠菌主要为热带念珠菌，其次为白色念珠菌。念珠菌对抗真菌药物均较敏感，对氟康唑、伊曲康唑、酮康唑、制霉菌素的敏感率分别为92.3%、93.0%、94.0%、99.3%。

3 讨论

本研究显示，引起尿路感染的病原菌菌种繁多，主要为革兰阴性杆菌(65.3%)，其次为革兰阳性菌(22.1%)和念珠菌属(12.6%)。革兰阴性杆菌检出率远低于深圳钟馥霞等[7]报道的81%，与海口市吴多荣等[8]报道的61.8%一致，表明地区之间病原菌存在差异。分离出的病原菌多系肠道菌群，女性感染率高于男性(54∶46)，女性尿道短而直，会阴部常有大量细菌存在，只要有感染的诱因存在，都可能导致上行感染。本院尿液中分离的2 028株病原菌主要来源于泌尿外科(37.4%)，其他病区依次为重症医学科、肾内科、神经内科、神经外科，这些病区患者多为危重患者且长时间留置导尿管、长时期使用抗菌药物，这些侵袭性操作和不规范使用抗菌药物是引起医院内获得性尿路感染的主要危险因素。

表2 2 028株病原菌在各病区的分布构成比

表3 主要革兰阴性菌对常用抗菌药物的耐药率(%)

注：“—”为无数据

表4 主要革兰阳性菌对常用抗菌药的耐药率(%)

注：“—”为无数据；“*”不包括粪肠球菌和屎肠球菌

革兰阴性杆菌以大肠埃希菌最多见，占所分离的革兰阴性杆菌的65.1%(862/1 325)，这与大肠埃希菌的侵袭性有关。研究发现，大肠埃希菌表面的伞状物和菌毛可与尿路上皮细胞牢固结合，使输尿管蠕动减弱并扩张，尿液不能冲走细菌，细菌的黏附性是导致大肠埃希菌逆行感染的重要原因[9-11]。其他革兰阴性杆菌依次为肺炎克雷伯菌、铜绿假单胞菌、变形杆菌属等，与文献[12]报道一致。大肠埃希菌ESBLs发生率(47.6%)较高，其对青霉素类、头孢类抗菌药物的耐药率较高；肺炎克雷伯菌对青霉素类、呋喃妥因、氨苄西林/舒巴坦、复方新诺明的耐药率高达39%以上；变形杆菌属对氨苄西林、呋喃妥因、复方新诺明的耐药率高达50%～97%；肠杆菌属高产AmpC酶，主要表现为对青霉素类、头孢类抗菌药的耐药率较高。监测到少许肠杆菌科细菌产碳青霉烯酶，虽不建议对肠杆菌科细菌常规检测碳青霉烯酶，但可从流行病学角度检测是否存在碳青霉烯酶。铜绿假单胞菌对所监测的抗菌药物均较敏感。

革兰阳性菌以肠球菌属最为多见，肠球菌属表达一种表面蛋白，属于黏附素，其有利于肠球菌属定植和延长肠球菌属在膀胱内的停留时间。屎肠球菌对所测试抗菌药物的耐药率显著高于其他肠球菌，与笔者前期报道一致[13]；葡萄球菌属对呋喃妥因、复方新诺明敏感率大于70%；未发现耐万古霉素、利奈唑胺的革兰阳性球菌。在临床治疗过程中，在未做细菌培养和药敏试验前，若使用抗革兰阴性菌药物无效时，可考虑抗肠球菌药物治疗。同时亦分离到一些少见革兰阳性菌，例如：无乳链球菌、解脲棒杆菌等。无乳链球菌对成人侵袭力较弱，肾盂肾炎、子宫内膜炎、糖尿病、泌尿生殖道功能失调、肿瘤和免疫机能低下者易受其感染。解脲棒杆菌在血琼脂平板培养基上生长缓慢，形成细小菌落而容易被忽视，因而应延长培养时间，提高检出率；该菌为革兰阳性细小棒杆状，脂酶、尿酶阳性，不难鉴别。

念珠菌是引起尿路感染的常见真菌，文献报道多以白色念珠菌为主[14-15]，但本院所分离到的主要为热带念珠菌，其次为白色念珠菌，与吴旭丽等[16]报道一致。本院尿液中分离到的念珠菌对氟康唑、伊曲康唑、酮康唑、制霉菌素的敏感率均大于90%，只要规范、合理使用抗真菌药物，治疗效果应该较理想。

综上所述，尿路感染病原菌分布广泛，仍以革兰阴性杆菌为主，细菌耐药谱有较大差异，合理使用抗菌药物，严格规范无菌操作是预防医院内获得性尿路感染的重要措施，建议临床医生根据病原学监测资料有针对性地选择抗菌药物。

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Analysis of the distribution and drug resistance of pathogenic bacteria causing urinary tract infection in our hospital

LIAO Guo-lin,LI Jiang-ping*,WU Zhen,SUN Pei,WANG Hai-hong,LOU Liang-wen

(Department of Clinical Laboratory,Wuhan Puren Hospital,Wuhan 430081,China)

Objective To investigate the distribution and drug resistance of pathogenic bacteria causing urinary tract infection,in order to further provide the reference for rational use of antibacterial agents.Methods The strains isolated from the urine in our hospital from January 2011 to June 2014 were collected,the identification and antimicrobial susceptibility were performed by MicroScan WalkAway40.Drug resistance was judged according to CLSI 2014 and WHONET 5.6 software was used to analyze the data.Results A total of 2 028 bacterial strains were isolated.Gram-negative bacilli,Gram-positive cocci and Fungus accounted for 65.3%,22.1%and 12.6%,respectively.The susceptible rate of Gram-negative bacilli was higher to imipenem,meropenem,piperacillin/tazobactam,cefoperazone/sulbactam.The resistance rate ofE.faeciumto most of the drugs tested was significantly higher than otherenterococci.No Gram-positive cocci was resistant to vancomycin or linezolid.Conclusion Urinary tract infection pathogens are widely distributed.The main pathogen is still Gram-negative bacilli and bacterial resistance patterns are quite different.Doctors should select the antibiotics based on the etiology of monitoring data.

Urinary tract infection;Pathogenic bacteria;Drug resistance;Antibacterial agents

2014-08-10

武汉市普仁医院检验科，武汉 430081

*通信作者

10.14053/j.cnki.ppcr.201503022