尿液标本放置时长对红细胞检测结果的影响

郭晓红

[摘要] 目的 研究尿液标本放置时长对红细胞检测结果的影响。 方法 选取我院2012年1月～2013年1月收集的400例血尿标本作为观察对象，采用流式尿液有形成分分析仪UF-100进行分析。对比不同放置时间对血尿来源鉴别敏感度、红细胞计数以及各参数结果的影响。 结果 标本放置15 min内、2 h、4 h对血尿来源鉴别的敏感度分别为94.97%（189/199）、88.94%（177/199）、83.42%（166/199）；变异型2 h及4 h的RBC计数、RBC-p70Fsc、RBC-Fsc-Dw以及Non-lysed RBC%与15 min相比，差异具有统计学意义（P<0.05）；混合型2 h以及4 h的RBC-p70Fsc以及Non-lysed RBC%与15 min相比，差异具有统计学意义（P<0.05）；均一型2 h及4 h的RBC-Fsc-Dw与15 min相比，差异具有统计学意义（P<0.05）。 结论 在对尿液进行RBC检测时，在条件允许的情况下最好采用新鲜尿液且在2 h内完成检测，以避免出现误诊。

[關键词] 尿液标本；放置时长；红细胞检测；关联性

[中图分类号] R446.12 [文献标识码] B [文章编号] 1673-9701（2015）14-0103-03

[Abstract] Objective To discuss effect of urine specimen placed length on red blood cells detection. Methods Selected 400 cases of blood in the urine specimen from January 2012 to January 2013 as research objects who were analyzed by the current physical composition analyzer urine UF-100. Effect of different placed time on source of hematuria differential sensitivity， RBC and the parameters results were compared. Results Sensitivity identification of the source of hematuria of specimen placed within 15 min， 2 hours， 4 hours were 94.97%（189/199），88.94%（177/199），83.42%（166/199）. RBC，RBC-p70Fsc，RBC-Fsc-Dw and Non-lysed RBC% of variants placed 2 h and 4 h showed significant differences compared with placed placed 15 min（P<0.05）； RBC-p70Fsc and Non-lysed RBC% of mixed type placed 2 h and 4 h showed significant difference compared with placed 15 min（P<0.05）； RBC-Fsc-Dw of isotypy placed 2 h and 4 h showed significant difference compared with placed 15 min（P<0.05）. Conclusion When evaluate the RBC in the urine， if possible， the best use of fresh urine and finish within 2 hours for detecting to avoid misdiagnose.

[Key words] Urine specimen； Placed length； Detection of red blood cells； Correlation

尿液检验（urine liquid examination，ULE）广泛应用于临床，其对于泌尿系统以及其他系统的疾病诊断有重要意义[1]。流式尿液有形成分分析仪对泌尿系统疾病的诊断以及鉴别诊断均具有重要的意义，其除能够进行红细胞计数、白细胞计数外，还能够检测红细胞均一型、非均一型等信息。而尿液检验中红细胞的形态对疾病的判断具有重要的临床意义。有学者认为尿液标本放置时有形成分会发生变化，影响其检测结果，从而影响对疾病的判断，因此尿液标本应尽快给予检查[2]。本文对尿液标本放置时长对其有形成分分析仪红细胞的关联性进行分析。现报道如下。

1资料与方法

1.1 临床资料

选取我院2012年1月～2013年1月收集的400例血尿标本作为观察对象。其中包括肾穿刺活检、泌尿系统检查以及详细病史确诊为肾小球病变145例，非肾小球病变54例，泌尿系统出血原因待查201例。排除非泌尿系疾病患者的尿液标本。

1.2 仪器

日本Sysmex公司生产制造的流式尿液有形成分分析仪UF-100及其配套试剂、质控品；OLYMPUS普通光学显微镜以及相差显微镜。其中UF-100不但能对RBC以及WBC进行计数，还可以给出红细胞均一型、非均一型以及混合型等实用信息。

1.3 检测方法

①先用质控品对UF-100仪器进行质控测定，测定合格之后再测定常规标本。②留取30 mL新鲜尿液分别置于3个试管内，混合均匀，在室温20℃～25℃下检测、存放。分别于15 min内、2 h、4 h测定每份标本，记录RBC计数以及各项参数结果。③留取10 mL新鲜尿液于离心管中，使用标准离心机进行离心5 min，除去上清。残留0.2 mL，将其摇匀，使用相差显微镜进行RBC形态观察，计算RBC的变异百分比。

1.4 观察指标

以肾穿刺活检以及临床诊断结果作为判断标准，对比不同放置时间对血尿来源鉴别敏感度的影响；对比不同放置时间红细胞计数及各参数结果。

1.5 统计学方法

以SPSS13.0软件分析，计量资料采用t检验或F检验，计数资料采用χ2检验，P<0.05为差异有统计学意义。用确切概率法比较敏感度。

2结果

2.1 室温下标本放置时间对血尿来源鉴别的影响

标本放置15 min内、2 h、4 h对血尿来源鉴别的敏感度分别为94.97%（189/199）、88.94%（177/199）、83.42%（166/199）。提示标本放置时间越长对血尿来源鉴别的敏感度越低。见表1。不同放置时间检测结果敏感度比较（χ2=13.708，P<0.01），放置15 min的标本检测结果敏感度最高。

2.2 室温下标本放置时间对RBC计数以及参数的影响

变异型组2 h及4 h的RBC计数、RBC-p70Fsc、RBC-Fsc-Dw及Non-lysed RBC%与15 min相比，差异具有统计学意义（P<0.01）；混合型2 h及4 h的RBC-p70Fsc以及Non-lysed RBC%与15 min相比，差异具有统计学意义（P<0.01）；均一型2 h以及4 h的RBC-Fsc-Dw与15min相比，差异具有统计學意义（P<0.01）。提示标本放置时间对RBC计数以及参数有较大影响，且放置时间越长，影响越大。见表2。

3 讨论

血尿主要表现为尿液颜色发生改变，镜下血尿的颜色与正常无异，而肉眼血尿颜色则随出血量增多而加深。尿液呈淡红色表示尿液含血量超过1 mL/L，出血严重者尿液可呈血液状。如果出现肾脏出血，尿液与血液混合均匀，尿液多呈暗红色；膀胱或者前列腺出血时，尿液颜色鲜红，有时伴有血凝块[3]。常见的血尿原因有急性肾小球肾炎、慢性肾炎、急性肾盂肾炎等。“肾小球性”和“非肾小球性”血尿的鉴别对与各种泌尿系统疾病的诊断及治疗意义重大，二者病因截然不同，需采取的进一步检查及治疗原则亦不相同[4]。由此可见，对血尿进行准确的红细胞检测、分析显得尤为重要。

国内外学者关于标本的放置时间对红细胞检测结果的影响程度说法不一。本文研究结果显示放置2 h、4 h后，血尿来源鉴别的敏感度明显低于15 min，且对肾小球病变组的影响大于非肾小球病变组。结果符合郭燕[5]的报道。这可能是因为肾小球来源的RBC在体内因为血管内的压力受损，有受到肾小管各段不同渗透压以及pH值的作用，红细胞大多为变异型，容积变小，有的甚至破裂。这类细胞离体之后随着放置时间增加，其数量及形态变异性也会随着尿液渗透压、溶质成分及pH值的变化而发生进一步改变，再加上细菌大量繁殖促使其发生变化，尿结晶的形成均会造成仪器的误认，最终导致仪器信息错误[6]。而非肾小球来源的血尿中的RBC没有因为肾小球滤膜的挤压所导致的损伤，在肾小管滤液中流过的时间短，因此受滤液、渗透压及pH值变化的影响相对更小[7]，所以RBC的形态基本不变或者变化较小，尿液标本放置4 h，对其数量以及形态的改变相对更小。

本文研究结果显示，标本放置时间对变异型RBC计数以及参数的影响较大，且放置时间越长，影响越大，结果符合袁慧等[8]的报道。这可能是因为RBC Fsc-Dw是用来反映RBC形态大小以及变异程度的，当大小不一且形状各异的RBC增加时，Fsc-Dw就随之增加，反之则减小[8-10]。RBC均一型的血尿标本放置2 h后，Fsc-Dw逐渐升高，提示这时RBC处于大小不一且形状各异的状态。有菌尿或者结晶时，血尿中RBC更容易发生变形，其体积通常会变小，结晶也常常被仪器误认，导致给出错误的RBC信息，而这将直接造成临床的误诊[11-13]。RBC变异型和混合型血尿组的标本在放置2 h后，出现Fsc-Dw值降低，提示此时体系中的RBC变异性有所下降。对这些标本进行相差显微镜观察，发现部分标本中变异RBC数下降。15 min观察时所见的变异型RBC放置2 h后，有些已经消失不见，却出现了较多的RBC碎片等。这可能是因为尿液在存放过程中受到pH值、比重等多种因素的影响，导致部分变异的RBC发生溶解、破裂或者释放出血红蛋白形成影红细胞[14，15]。部分轻度皱缩变形的RBC因为肿胀变成形态正常的RBC，当用仪器进行检测时便出现RBC形态变异性下降，RBC计数结果减少，Non-lysed RBC%值下降等RBC参数改变[16-18]。

综上所述，对尿液进行RBC检测时，在条件允许的情况下最好采用新鲜尿液且在2 h内完成检测，以避免出现误诊。

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（收稿日期：2014-11-05）