江西地方品种鸡禽白血病病毒感染状况的研究

李海琴，刘林秀，季华员，武艳平，康昭风

(江西省农业科学院 畜牧兽医研究所，江西 南昌 330200)

禽白血病(avian leukosis，AL)是目前影响养禽业的主要疾病之一，其对生产的危害主要是发生肿瘤、生产性能下降和免疫抑制［1］。禽白血病病毒(ALV)是一种基因组为单股RNA的反转录病毒。根据病毒与宿主细胞特异性相关的囊膜蛋白的抗原性，ALV可分为A、B、C、D、E、F、G、H、I和J 10个亚群［2-4］。但自然感染鸡群的只有A、B、C、D、E和J 6个亚群［5］。其中J亚群致病性和传染性最强，而内源性的E亚群表现为非致病性或者致病性很弱［6］。ALV特别是J亚群白血病病毒(ALV-J)诱发的鸡白血病，给我国养鸡业带来了极大损失，更为严重的是ALV-J又进一步传入我国固有的一些纯地方品种鸡群中［7］。到目前为止，还没有有效药物和疫苗用于禽白血病的治疗与预防，控制禽白血病主要采用检测加淘汰的净化方法［8］。

禽白血病P27抗原检出率与种鸡群的发病状况及其子代鸡群的发病状况密切相关，即种蛋中P27抗原检出率越高，种鸡群发病情况越严重，P27抗原可以作为开展禽白血病的流行病学调查和感染风险评估的重要指标，P27抗原检测试剂盒可检测到所有亚群ALV的P27抗原，因此不能区别外源性病毒和内源性病毒;ALV-J亚型抗体检测用于确定鸡或鸡群是否被外源性ALV-J感染过，通常代表ALV-J亚型外源病毒感染［9］。对禽白血病进行预防和控制，目前主要是通过对原种鸡群开展外源性病毒的净化工作，通过多次的抗原、抗体检测，了解该原种鸡群的流行亚群并淘汰阳性个体。一般需要经过3～5个世代的净化才有可能达到净化［10］。本研究使用商业ELISA检测试剂盒，通过P27抗原检测结合ALV-J亚型抗体检测，对江西地方品种鸡群ALV感染情况进行了调查研究。

1 材料与方法

1．1 试验材料

1．1．1 试验动物 安义瓦灰鸡(300日龄)、余干乌黑鸡(280～320日龄)、宁都黄鸡(120～300日龄)、泰和乌鸡(210～350日龄)、东乡绿壳蛋鸡(280日龄)、崇仁麻鸡(330日龄)6个江西省地方品种鸡。禽白血病病毒(ALV)P27抗原ELISA检测试剂盒及禽白血病病毒J(ALV-J)亚群抗体ELISA检测试剂盒，均购自美国IDEXX公司。

1．1．2 样品采集与处理 2014年4—6月，在江西省不同地区的12个鸡场、6个不同地方品种鸡鸡群中共采集样本690份。血清的采集方法是每只鸡采集全血1 mL装于1．5 mL灭菌离心管中，转入37℃恒温箱中存放30 min，再放入4℃冰箱中至少存放3～5 h。蛋清样品的采集方法是每只蛋采0．3～0．4 mL的蛋清，加入灭菌离心管中，置－20℃冻存，反复冻融3次，每次解冻后用力摇匀，待测。

1．2 试验方法

按常规方法分离所采集血液的血清以及种蛋的蛋清，然后按试剂盒的使用说明书进行样品的处理及检测，其中血清用于抗体的检测，蛋清则用于P27抗原的检测。

2 结果与分析

2．1 不同地方品种鸡ALV感染情况

由表1可知，群特异性P27抗原总的阳性率为21．82%(72/330)。结果表明江西地方品种鸡禽白血病病毒的感染十分普遍，调查还显示地方品种鸡不同品种之间禽白血病病毒阳性检出率差异较大，JXDF4品种鸡 P27抗原阳性率高达 36．67%，其次为 JXDF5、JXDF1、JXDF3、JXDF6、JXDF2 品种鸡。ALV-J亚群抗体检测结果显示，ALV-J亚群抗体的总阳性率较高12．22%(44/360)，与P27抗原检出情况类似，JXDF4、JXDF5抗体水平均相对较高(15%、30%)，而 JXDF1、JXDF2、JXDF3、JXDF6 4 个地方品种的鸡群阳性率相对较低(≤10%)。

2．2 同一品种鸡在不同种禽场感染情况

由表2可知，JXDF2、JXDF3品种鸡在不同种禽场的P27抗原阳性检出率相差不大，JXDF4品种鸡在H、I、J场抗原阳性率相差较大，这可能与不同鸡场的饲养管理水平以及生物安全措施不均有关。调查还显示同一品种鸡在不同种禽场的ALV-J感染阳性率相差较大。JXDF2品种鸡在B场的ALV-J亚型阳性率是3．33%，而在D场的ALV-J亚型阳性率16．67%;JXDF3品种鸡在F场的ALV-J感染阳性率为3．33%，而在G场的感染阳性率达23．33%;JXDF4品种鸡在J场的感染率是3．33%，而在H、I场的感染率26．67%、16．67%。由于目前市面尚未有 ALV疫苗，所以这些鸡只的抗体均是病毒感染后所产生［11］。生物安全是影响禽白血病的一个重要因素，提高种鸡场饲养管理水平是禽白血病净化的一个重要环节。

表1 不同品种鸡ALV感染状况的调查结果Tab．1 The results of ALV infection for different chicken breeds

表2 不同鸡场ALV感染状况的调查结果Tab．2 The results of ALV infection for chicken in different fields

3 讨论与小结

本研究通过对江西省不同地区11个鸡场、6个不同地方品种鸡330份蛋清进行P27抗原检测，阳性率达21．81%，这说明江西省地方品种鸡感染禽白血病病毒已十分普遍。试验通过对12个鸡场360份血清样本的ALV-J抗体检测，发现被检测鸡场均存在ALV-J亚型的感染，被检鸡群ALV-J个体阳性率为12．22%，这比前期对江西省J-亚型白血病的血清学调查结果更高［12］，表明江西省地方品种鸡ALVJ的感染已更严重。江西省地方品种鸡ALV-J的普遍感染可能与外来品种鸡的带毒传播有关，也可能是与使用污染了ALV的疫苗有关［13］。

试验共调查了6个不同地方品种鸡的血清样本，发现各品种鸡均有不同程度的ALV-J感染，且不同品种间阳性率差异较大。品种间的阳性率差异与饲养管理、疫苗使用、生物安全措施等多种因素有关，也可能与不同地方品种鸡对ALV-J的抗性差异有关，不同ALV-J分离株在遗传性及抗遗传性上不同，各品系鸡对其感染的免疫应答也不相同，表现为 ALV-J免疫应答的多样性［13］。

本研究比较了JXDF2、JXDF3、JXDF4这3个江西地方品种鸡分别在不同场的ALV-J感染阳性率，结果显示同一品种鸡在不同场的ALV-J亚型的感染率各不相同。ALV-J感染阳性率高低可能与祖代、父母代鸡场使用非SPF疫苗、开放式养殖、饲料管理差、环境卫生消毒不彻底等因素有关。ALV-J主要有垂直传播和水平传播两种方式，大多数鸡通过与先天性感染鸡密切接触而受到感染［14］。垂直传播一般仅引起小部分鸡感染，但由于在世代间持续不断，因此在流行病学上是很重要的。而ALV-J发生在孵化期间的水平传播在肉鸡更为广泛，它对保持足够的垂直传播率以使感染不消失也可能是必须的［15-16］。长期接触粪便、污染的饲料、饲养器具及工作人员等是外源性ALV传播的另一条主要途径。目前尚无防制外源性ALV感染的疫苗，只能通过防止生物制品污染、垂直传播和二次感染作为控制该病的主要手段。祖代和父母代种鸡场必须加强外源性ALV净化工作，提高饲养管理水平，并注意日常兽医卫生管理和消毒措施，控制其它病原的混合感染。

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