清肺颗粒中甘草的薄层鉴别方法研究

李玉平，胡宇莉，苏　亮（重庆市动物疫病预防控制中心，重庆　401120）

清肺颗粒中甘草的薄层鉴别方法研究

李玉平，胡宇莉，苏亮
（重庆市动物疫病预防控制中心，重庆401120）

摘要：试验采用薄层色谱鉴别法研究和改进清肺颗粒中甘草的鉴别方法。结果显示，供试品色谱中，检出与甘草对照药材相同颜色的斑点，且阴性对照无干扰，说明改进后的方法简便快速，专属性强，重现性好。

关键词：清肺颗粒；甘草；薄层鉴别

清肺颗粒具有清肺平喘、化痰止咳的功效，主要由板蓝根、浙贝母、葶苈子、甘草和桔梗5味中药组成，其质量标准收载于兽药质量标准汇编中。在标准中甘草的薄层鉴别方法，对照药材与样品处理前处理方法不一致，进而会引起结果存在一些差异，专属性不强，同时提取方法复杂，提取次数较多，费时费力，增加了实验的成本。

为建立简便快速、专属性强和重现好的薄层鉴别方法，本试验参考《中华人民共和国兽药典》2010版第二部及相关文献报道，对处方中的薄层鉴别方法进行了研究和改进，进而建立适合制剂中甘草质量标准控制的薄层鉴别方法[ 1-3 ]。

1　试验材料

1.1试验仪器

KQ-600DA型超声波清洗器（昆山市超声仪器有限公司）；AB204-S型分析天平（梅特勒-托利多公司）；DK-98-Ⅱ型电热恒温水浴锅（天津市泰斯特仪器有限公司）；三用紫外检测仪（上海安亭科学仪器厂）。

1.2试验药品和试剂

甘草对照药材（批号：120904-201117，购自中国食品药品检定研究院）；清肺颗粒（批号为：20130901、20130902、20130903，由重庆市方通兽药有限公司提供）；所用试剂均为分析纯。

2　方法与结果

2.1不同处理方法的结果比较

2.1.1原标准方法

取清肺颗粒10 g，置具塞锥形瓶中，加水40 mL使其溶化，加乙醚45 mL，密塞，超声处理30 min，滤过，滤液挥去乙醚，加正丁醇提取2次，每次20 mL，合并正丁醇液，加水10 mL洗涤，取正丁醇层水浴蒸干，残渣加甲醇5 mL使其溶解，作为供试品溶液。

2.1.2改进后方法

取清肺颗粒研细，取粉末10 g，置具塞锥形瓶中，加水40 mL使其溶化，过夜，超声处理30 min，滤过，滤液加正丁醇提取2次，每次20 mL，合并正丁醇液，加水10 mL洗涤，取正丁醇层水浴蒸干，残渣加甲醇1 mL使其溶解，作为供试品溶液。清肺颗粒用不同方法对样品处理的结果比较见图1。

2.2改进后的方法和试验结果

2.2.1供试品溶液的制备

取清肺颗粒10 g，研细，按上述方法制备供试品溶液。

2.2.2阴性对照溶液的制备

取缺甘草的清肺颗粒粉末10 g，按上述方法制备阴性对照溶液。

图1　清肺颗粒不同方法对样品处理的结果比较

2.2.3对照药材溶液的制备

取甘草对照药材1 g，加水50 mL，回流提取30 min，滤过，滤液用正丁醇振摇提取2次，每次30 mL，合并正丁醇液，用水30 mL洗涤，取正丁醇层水浴蒸干，残渣加甲醇1 mL使其溶解，作为对照药材溶液。

2.2.4薄层层析及结果

取上述3种溶液各10 μL，分别点于同一羧甲基纤维素钠为黏合剂的硅胶G薄层板上，以乙酸乙酯-甲酸-冰醋酸-水（15ϑ1ϑ1ϑ2）为展开剂，展开，取出，热风吹干，喷以10%硫酸乙醇溶液，105℃加热至斑点显色清晰后，在日光及紫外灯365 nm下检视。结果显示，供试品色谱中，分别在与对照药材色谱相应的位置上，显相同颜色的斑点或荧光斑点，而阴性对照无干扰，清肺颗粒甘草TLC图谱见图2。

图2　清肺颗粒甘草TLC图谱

3　讨论

甘草的薄层鉴别过程中，原标准方法采用乙醚处理样品，乙醚易糊化于玻璃容器中，难以过滤；并且将提取后的滤液挥去乙醚，样品中含有水，具塞玻璃瓶中难以确定乙醚挥发的程度，进而影响到样品后续的提取，同时乙醚对人体有一定的危害。参考相关文献，改进后的方法减去了样品用乙醚处理的步骤，直接采用正丁醇提取，既没有影响色谱斑点的检出，又解决了样品糊化黏附和过滤的问题，简化了试验流程，减少了对人体的危害[ 4-6 ]。

改进后的方法将原标准中所使用的“含1%氢氧化钠的羧甲基纤维素钠为黏合剂的硅胶G薄层板”改为“以羧甲基纤维素钠为黏合剂的硅胶G薄层板”，结果显示色谱斑点清晰，专属性强和重现性好。

由于颗粒剂的硬度和脆度较大，改进法在制备供试品溶液时将其研细，此方法使样品的溶解度提高，从而使薄层谱在重现性和平行性方面良好，结果准确、可靠。

[参考文献]

[ 1 ]中国兽药典委员会.中华人民共和国兽药典[M].北京:中国农业出版社, 2010．

[ 2 ]李敏,陈建蓉,李莉.兽用四逆汤中甘草、干姜的薄层色谱鉴别研究[J].宁夏农林科技, 2010（5）: 38-39.

[ 3 ]曾赟昀,彭中芳.紫雪颗粒中甘草、玄参的薄层鉴别[J].今日药学, 2008, 18（2）: 32-33．

[ 4 ]孙国英,张春丽,黄超,等.椰露止咳合剂中鱼腥草和甘草薄层鉴别方法的改进[J].中药材, 2009, 32（7）: 1 148-1 150.

[ 5 ]赖克道,刘元,文志云,等.薄层色谱法定性鉴别小柴胡颗粒中的柴胡、甘草[J].广西医学, 2009（6）: 886-887.

[ 6 ]徐庆仪,徐济恒.清痤颗粒中赤芍、金银花、甘草的薄层色谱鉴别[J].内蒙古中医药, 2011, 30（5）: 87.

前沿科技摘编

Study of TLC Identification for Radix Glycyrrhizae of Qingfei Granules

LI Yuping, HU Yuli, SU Liang
（Chongqing Animal Disease Control and Prevention Center, Chongqing 401120, China）

Abstract:TLC were used to study and improve the identification method of radix glycyrrhizae of qingfei gran⁃ules. The results showed that the same color chromatographic spots were detected in the test samples and their respec⁃tive reference substance, and the negative control without interference. The results showed that this method was sim⁃ple andrapid,strong specificity,goodreproducibility.

Key words:qingfei granules; radix glycyrrhizae; TLC

作者简介：李玉平（1986-），女，河南林州人，硕士，助理兽医师，研究方向为中药质量研究。

收稿日期：2015-08-01

中图分类号：R286；R284.1

文献标志码：A

文章编号：1001-0084（2015）09-0005-03